【摘要】： 前言 皮肤是机体的重要免疫器官，具有多种免疫功能，构成机体抵制外界微生物侵犯的重要一线屏障。近年来越来越多的研究发现表皮朗格汉斯细胞(LC)及树突状表皮T细胞(DETC)与皮肤免疫系统(SIS)密切相关。而许多现象证明毛囊在SIS中占重要地位。以往很多文献报道了毛囊相关免疫系统包括黑素细胞、角朊细胞、神经因子、细胞因子等影响毛囊生长周期，进而影响SIS。我们也曾报道了MHC-Ⅱ及和Thy-1抗原在毛囊周期中的表达及作用。那么LC及DETC在SIS中的作用是否与毛囊周期具有相关性呢?本研究通过动态观察C57BL/6小鼠拔毛诱导的毛囊周期中毛囊间表皮LC及DETC数量和形态的变化，进一步探讨免疫细胞与毛囊周期及SIS的关系和作用。 材料和方法 1．动物：C57BL/6纯系小鼠15只，6-8周龄，体重15-20克。选择皮色粉红(毛发处于休止期)的小鼠。 2．试剂：所用单克隆抗体分别为：OX3、OX4及JIJ、22．1。ABC试剂盒(含生物素化马抗鼠IgG)。 3．方法：小鼠分3组，每组5只(3雌2雄)，将松香/蜡1：1混合，涂于小鼠背部以拔毛，隔天取皮肤标本，应用ABC法进行免疫组化染色。 4．观察指标：(1)每天观察小鼠皮色变化。(2)光镜下观察拔毛前、后不同时间内小鼠表皮免疫细胞的染色情况。 结果 1．小鼠皮色变化：拔毛后第1-4天内，小鼠皮肤呈粉红色；第5-6天鼠皮变黑色；第9-11天局部可见新毛长出；至17-19天鼠皮变灰色；第20天左右鼠皮恢复到原先的粉红色。 2.表皮LC及DETC变化。 (l)密度变化:拔毛后第2天开始二者密度较拔毛前升高(P0.05)，，拔 毛后第4一8天二者在表皮中密度最高(P0.01)，以后有所下降，直至第 16天，但仍较拔毛前升高(P0.05);拔毛后第17一20天，表皮毛囊间LC 及DETC密度基本恢复到拔毛前数值，二者之间的差异无统计学意义(P 0 .05)。 (2)形态变化:拔毛前、后3天内，多数LC及DETC胞体小、圆形，树突短 小，1一2个;第4一8天，二者多数细胞体大，圆或不规则形，树突粗大，约3 一5个，有的有分枝或次级突起;第9一16天，胞体大小不一，树突变细，2- 4个;17一20天，多数胞体较小甚至消失，树突纤细，长短不一，约2一3个。 讨论 小鼠毛发周期分为退行期、休止期及生长期。在对拔毛诱导C57 BU6 小鼠毛发生长周期中，以往文献已报道了毛囊的显著形态学变化，即拔毛后 第2一4天内，毛囊上皮细胞处于增生分裂状态，第5天达生长高峰，出现黑 色素及新生毛发，鼠皮呈黑色(生长期);以后是增生平稳状态，至17一19 天出现退化改变，黑素生成减少，鼠皮呈灰色(退行期)，直到第20天则停 止生长，鼠皮亦恢复到原先的粉红色(休止期)。可根据皮肤颜色变化判断 毛囊周期的变化。以上这些拔毛诱导的鼠毛发生长周期中毛囊的形态学变 化与自然状态下的鼠毛发生长周期中毛囊的形态学变化基本一致。 表皮LC是骨髓来源的树突状细胞，主要位于毛囊及基底细胞之上的 表皮层内，在常规HE染色的石蜡切片中为透明细胞而很难辨认，用氯化金 及ATP酶等特殊染色可以表现为树突状细胞。LC是表皮细胞中唯一具有 补体C3及Fc一IgG受体以及Ia抗原的细胞，因此可用免疫组化方法将其 显示。许多与免疫有关的皮肤病有LC改变，特别是在迟发超敏反应 (DTH)及覃样肉芽肿(MF)的发病机理中占重要地位，同时LC与皮肤移植 物排斥有关。人表皮内此细胞约有460一1000个/~2，真皮内也偶可见 到。LC具有迁移吞噬能力，能摄取、处理、携带并递呈抗原到局部淋巴 结，激活淋巴细胞。但LC密度在毛囊周期中如何变化目前尚报道，此研究 有利于进一步探讨免疫细胞与毛囊周期及515的关系和作用。 DETC是一种存在于小鼠表皮内的表达，盯细胞受体(TCR)的T细 胞，此细胞具有Thy一1(CD90)、CD3及CD45，呈树突状外观。现已证实 Thy一1+的DETC均匀分布于小鼠毛囊间表皮内，缺乏循环T细胞具有的 apTCR、CD4或CDS，它可以被IL一2及Con一A激活而具有辅助T细胞 作用，并能分泌IL一2及，一IFN。DETC是一种重要的表皮免疫细胞。半 抗原化表皮细胞富含DETC时可使动物耐受。目前认为DETC是一个重要 的表皮免疫效应细胞，DETC在不同品系小鼠及不同部位存在明显差异，这 些均表明DETC与515关系密切。 本实验选用C57 BU6小鼠建立‘毛囊周期。自动发育的毛囊周期同步 性差，拔毛可快速刺激表皮增生及毛发生长。本研究通过拔毛诱导小鼠毛 囊进人生长期、退行期直至休止期的变化，动态观察了此三阶段变化过程中 毛囊间表皮LC及DETC的密度及形态变化。结果显示毛囊间表皮LC及 DETC于拔毛后第2天开始密度值升高，第4一8天出现最高值，以后逐渐下 降，第17一20天密度逐渐恢复到拔毛前数值，，且二者形态也有相应变化。 表明毛囊间表皮内LC及DETC于毛囊生长期密度最高，树突多且有的有分 枝;退行期下降，至休止期稳定，树突也变少。 拔毛破坏毛囊完整性的同时，必然对皮肤产生一定影响。表皮中LC 及DETC的动态变化可能是作为一种抵御外界有害刺激的因素之一。引起 此变化的机理还不清楚，我们考虑主要有两点:
【学位授予单位】：中国医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2004
【分类号】：R751
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本文编号：
2606454
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