紫外线对体外培养人皮肤成纤维细胞蛋白质差异表达的影响

发布时间：2020-05-13 09:07

【摘要】： 背景:紫外线对皮肤晒伤、皮肤炎症、皮肤老化及皮肤癌的发生有重要影响。按波长长短紫外线可分为长波紫外线(UVA,320-400nm)、中波紫外线(UVB,280-320nm)和短波紫外线(UVC,200-280nm)。文献报道紫外线能影响皮肤细胞内多种蛋白质的表达。成纤维细胞是皮肤的重要细胞。本研究课题组在先前的工作中已通过双向凝胶电泳和MALDI-TOF质谱技术发现100mJ/cm~2UVB照射48小时前后人皮肤成纤维细胞中存在33个差异表达的蛋白质点,并鉴定了其中的7种蛋白:表达上调:Vimentin(波形蛋白)、Death receptor-interacting protein(死亡受体反应蛋白RIP)、IL-1 receptor accessory protein(白介素1受体辅助蛋白IL-1 RAcP)、Prohibitin(抑制素)、Prolyl 4-hydroxylase(脯氨酰羟化酶PHD4);表达下降:Annexin A2(膜联蛋白2)、PGK1(磷酸甘油酸激酶)。采用Western-blot及免疫荧光技术检测发现Vimentin和RIP在UVB照射后在细胞内的含量显著上升;prohibitin、IL-1 RAcP、PHD4细胞内含量变化未达统计学差异。 目的:采用RT-PCR方法检测在培养人皮肤成纤维细胞中经紫外线照射后AnnexinA2、PGK1的mRNA表达的变化,以寻找紫外线早期损伤标志。 方法:用健康男性包皮组织体外培养成纤维细胞,用100mJ/cm~2UVB照射培养人皮肤成纤维细胞,48小时后提取细胞总RNA,RT-PCR后进行紫外荧光显像,以ANX2、PGK1与β-actin的mRNA条带灰度比值用SPSS软件进行半定量分析。 结果:UVB照射后成纤维细胞中PGK1 mRNA表达下调,且具有显著性差异(p＜0.05)。 结论:PGK1 mRNA很有可能是紫外线早期损伤的标志。
【图文】：

5一6为照射后细胞总RNA M1234567M图2l、2为PGKI6为照射后、UVB照射对ANXZ、 PGK1mRNA表达的影响照射后、前328bp产物，3、4为照射后、前 ANxZ336bp产物，月日p一aCtlflZosbp产物，7为未加引物阴性对照，M为DL600的DNA

实验结果R半定量测定UVB照射对人皮肤成纤维细胞包皮来源的原代皮肤成纤维细胞传代至第uvB照射，未照射细胞为对照，，照射后48测ANXZ、PGKImRNA的表达情况，用凝胶，结果如下所示:
【学位授予单位】：中国协和医科大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2008
【分类号】：R751

【参考文献】

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本文编号：2661712