糠秕马拉色菌相关皮肤病的免疫状态研究

发布时间：2020-05-31 06:34

【摘要】：全文分三篇，分别就不同培养条件对糠秕马拉色菌蛋白产量和组成的影响、糠秕马拉色菌相关皮肤疾病(MFASD)与M．Fuffur相关的体液免疫研究以及MFASD患者Th1模式／Th2模式免疫状态进行描述。 第一篇重点阐述不同培养条件对糠秕马拉色菌蛋白产量和组成的影响。首次采用L16(4~5)正交设计对糠秕马拉色菌(P．Ovale)不同的培养条件进行设定，其中包括温度、培养时间、脂肪种类、不同吐温等因素，通过紫外分光光度法测定蛋白质含量和SDS—PAGE对蛋白组份进行研究，探索在不同培养条件下，对同一糠秕马拉色菌胞外提取物(ECE)、胞壁提取物(CWE)、胞浆蛋白(CPE)中的蛋白产量和组成变化的影响，并首次筛选出获得蛋白产量最高和组成最丰的最适培养条件。我们的研究结果显示：糠秕马拉色菌胞外提取物、胞壁提取物、胞浆提取物中蛋白含量的高低和其中中低分子量蛋白组份的多少与我们设定五因素四水平的影响因素密切相关。糠秕马拉色菌三种不同提取物蛋白含量最高和中低分子量蛋白组份最多的最适培养条件各不相同，糠秕马拉色菌胞外提取物、胞壁提取物、胞浆提取物中蛋白含量最高最适培养条件，一般而言，最适培养温度为30℃，不能缺乏单硬脂酸甘油酯，培养时间2～7天，以芝麻油和橄榄油为最佳。三种提取物中中低分子量蛋白成份最丰的最适培养条件，以芝麻油最好，最适培养温度32℃和30℃，最适培养时间4～7天。通常37℃培养、培养基中加入2％橄榄油培养并非最适培养条件。培养条件的不同与糠秕马拉色菌相关免疫学研究的可重复性至关重要。 第二篇重点阐述糠秕马拉色菌相关皮肤疾病(MFASD)与M．Furfur相关的体液免疫研究。采用病例对照设计，以糠秕马拉色菌整菌、胞外提取物、胞壁提取物、胞浆提取物为抗原，首次在同一条件下用ELISA对糠秕马拉色菌相关皮肤疾病(MFASD)中的花斑癣、糠秕马拉色菌毛囊炎、脂溢性皮炎、特应性皮炎和四型银屑病血清中的抗M．Furfur IgG、IgM、IgA抗体进行检测。结果显示：正常人血清中存在高滴度抗M．Furfur IgG抗体：花斑癣患者血清中IgG抗体明显低于正常对照组，，男性患者则更低；病程一年以上者IgG抗体明显低于病程少于一年者。抗M．Fuffur IgG抗体可能具有保护作用，花斑癣的反复发病与免疫缺陷有关。糠秕马拉色菌毛囊炎(MFf)患者血清中大量抗M．Furfur IgA抗体以及IgG抗体，未发现患者有免疫缺陷状况存在。糠秕马拉色菌毛囊炎(MFf)发病主要在皮脂分泌
【图文】：

和方法的情况下，收集了15种不同条件培养获得的糠批马拉色菌胞外提取物、胞壁提取物、胞浆提取物，并用紫外检测蛋白浓度，经冷冻干燥将蛋白浓度调至sm动‘，用SD-sRAGE对糠批马拉色菌在不同条件下菌的蛋白组成进行分析，结果见图1一2~7。根据糠批马拉色菌胞外提取物、胞壁提取物、胞浆提取物在SDS一APGE上的条带数，可得表1一8。A(试验号5):25℃培养、4天、橄榄油、吐温礴o、单硬脂酸甘油酷浓度.35叭B(试验号9):25℃培养、7天、椰子油、吐温一80、单硬脂酸甘油酷浓度.25叭C(试验号13):25℃培养、14天、芝麻油、吐温一20、单硬脂酸甘油醋浓度3.0叭D(试验号2):30℃培养、2天、橄榄油、吐温一。、单硬脂酸甘油酷浓度.25叭E(试验号6):30℃培养、4天、无油脂、吐温·80、单硬脂酸甘油酷浓度.30叭F(试验号10):30℃培养、7天、芝麻油、吐温一0、无单硬脂酸甘油酷浓度G(试验号14):30℃培养、14天、椰子油、无吐温、单硬脂酸甘油酷浓度3.5叭H(试验号3):32℃培养、2天、椰子油、吐温一。、单硬脂酸甘油酩浓度.3oLg/I(试验号7):32℃培养、4天、芝麻油、无吐温、单硬脂酸甘油酩浓度.25叭J(试验号11):32℃培养、7天、无油脂、吐温一20、单硬脂酸甘油酷浓度3.5叭K(试验号15):32℃培养、14天、橄榄油、吐温一80、无单硬脂酸甘油酷浓度L(试验号4):37℃培养、2天、芝麻油、吐温一80、单硬脂酸甘油酷浓度3.5叭M(试验号8):37℃培养、4天、椰子油、吐温一20、无单硬脂酸甘油酷浓度N(试验号12):37℃培养、7天、橄榄油、无吐温、单硬脂酸甘油酪浓度3.0叭O(试验号16):37℃培养、14天、无油脂、吐温一。、单硬脂酸甘油酷浓度.25叭M.业er:为中低分量标准蛋白图1一2~7中蛋白条带的分子量计算:根据标准蛋白分子量的对数与蛋白多肚在SDS一APGE中的相对迁移率呈直线负相关

.4kD图1一4糠批马拉色菌15种胞壁提取物(CWE)在12.5%SDS一PAGE上的带型表现(A~D，考马斯亮蓝染色JKLMN0Marker9.74kD66.2kD43kD3IkD20.IkD14.4kD图l一5糠批马拉色菌15种胞壁提取物(C刃E)在12.5%SDS一APGE上的带型表现(J~o)，考马斯亮蓝染色
【学位授予单位】：中国协和医科大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2000
【分类号】：R756

【参考文献】

相关期刊论文 前9条

1 范雪莉;银屑病的流行病学和遗传学[J];国外医学.皮肤性病学分册;1995年05期

2 邵长庚;银屑病的流行病学[J];国外医学.皮肤性病学分册;1997年01期

3 严道金;异位性皮炎发病机理的研究现状[J];国外医学.皮肤性病学分册;1997年06期

4 于波;糠秕孢子菌感染的研究进展[J];国外医学(皮肤性病学分册);1998年01期

5 李新宇;银屑病发病机制的现代概念[J];国外医学(皮肤性病学分册);1998年03期

6 王群;糠秕马拉色菌相关皮肤病的免疫学研究现状[J];国外医学(皮肤性病学分册);1999年03期

7 秦建中,杨海珍,王光超,钱玉昆;银屑病患者血清肿瘤坏死因子α和白介素6水平检测[J];中华皮肤科杂志;1994年06期

8 冉玉平,周光平,坪井良治,小川秀兴;糠秕孢子菌与培养人角朊细胞的相互作用[J];中华皮肤科杂志;1997年05期

9 吴勤学,尹跃平,李和莲,侯伟,张津平,蔡秀玲,邵长庚;银屑病患者血清抗致病分支杆菌抗体的检测[J];中华皮肤科杂志;1999年02期

本文编号：2689450