雌激素对体外培养的人皮肤成纤维细胞MMP-1基因表达的影响

发布时间：2020-06-02 18:16

【摘要】： 目的:通过研究雌激素对体外培养的人皮肤成纤维细胞MMP-1的mRNA转录水平的影响,探讨雌激素减缓皮肤老化的机制。 方法:首先采用酶消化法进行体外人皮肤成纤维细胞原代培养,然后将不同浓度的雌激素(0mol/L,1×10~(-5)mol/L,1×10~(-4)mol/L)加入体外培养的人皮肤成纤维细胞中,待药物作用后,提取其中的总RNA,通过逆转录反应获得cDNA,并进行体外扩增,对扩增产物进行琼脂凝胶电泳,并根据条带的亮度来判断成纤维细胞中MMP-1 mRNA的表达水平。 结果:经酶消化法体外培养的皮肤成纤维细胞,增生活跃,形态良好,呈典型的梭形、柳叶形,用细胞计数法进行生长曲线,显示:潜伏期为0～2天,指数生长期为2～5天,之后进入平台期。对细胞进行雌二醇干预,经β-actin内参校正后,RT-PCR示低剂量组与对照组相比,MMP-1 mRNA表达水平的差异没有统计学意义,高剂量组雌激素与对照组相比,MMP-1 mRNA表达水平有所下降,差异有统计学意义(P＜0.05)。 结论:雌激素可以下调MMP-1基因的转录水平,减少后者对胶原的降解,增加真皮的厚度及弹性,逆转或延缓皮肤老化。
【图文】：

图2.雌激素通过与其核内的受体结合对代谢和基因转录的调节研究发现，无论是内源性老化还是外源性老化过程都伴随着皮肤数量和质量的改变。基质金属蛋白酶(matrixmetalloproteinase，一组由多种锌离子依赖性酶组成的降解胶原的重要酶类，属于蛋白酶在已发现的这些MMPS中，又以MMP一1为最重要，它是降解细胞外基质加速皮肤老化的一个关键酶〔8]。Fi:her等1996年提出了日光诱导皮肤子机制，他们的研究表明低剂量的UVB辐射，包括检测不到日晒伤的快速诱导并维持转录因子激活蛋白1(AP一1)和核因子kaPpaB(NF一KB)合上调，随后，，由AP几调节的MMP(包括间质胶原酶，92kD明胶酶和mRNA表达和蛋白质含量均显著增加。体外实验研究发现，用紫外线辐成纤维细胞可导致MMP一1的mRNA高表达〔9，’。〕。用原位杂交技术和免疫组究发现:在日光损伤的皮肤中有较多的MMP一1沉积L”〕。

图3.Zllunx5Inln大小的皮片倒置显微镜下观察新分离的成纤维细胞为透亮的圆形细胞，呈单个分状态;培养3~4小时后开始贴壁，培养24小时后大部分成纤维细胞贴壁，呈体积逐渐增大，形态逐渐延长;培养2天后绝大多数细胞已经贴壁，形态改变更加明显，细胞拉平伸展，紧紧乳附于培养瓶底，呈典型的梭形、柳叶形;培养6~7天，新增生的成纤维细胞明显增多，长成致密单层，互相连接成网状(如图4~7示)。
【学位授予单位】：天津医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2008
【分类号】：R751

【参考文献】

相关期刊论文 前3条

1 许燕,许冰,马纲要;碱性成纤维细胞生长因子对兔皮肤成纤维细胞增殖的作用[J];郑州大学学报(医学版);2002年03期

2 居永芳;朱威;连石;;皮肤老化机制的研究进展[J];中国麻风皮肤病杂志;2006年02期

3 刘仲荣,范红霞,张海龙,孙林潮,刘玉峰,高天文;皮肤老化的一般特征及发生机制——皮肤老化与化妆品系列讲座一[J];中国美容医学;2004年04期

本文编号：2693571