角质形成细胞中FXYD3对银屑病的调控及其机制研究

发布时间：2020-06-22 09:25

【摘要】：银屑病是免疫系统过度激活引起的皮肤慢性炎症疾病,皮肤中的炎症因子作用于角质形成细胞和免疫细胞,导致炎性细胞浸润和持续炎症反应。虽然目前认为的白细胞介素23-白细胞介素17A轴是银屑病的主要发病机制之一,但是银屑病作为一个多因素多步骤多环节的疾病,其具体发病机制至今尚不明确。角质形成细胞是皮肤表皮中最主要的组成细胞,通过其表面表达的各种模式识别受体感受外界环境的各种刺激,在不同应激状态下产生各种细胞因子和趋化因子,调控皮肤的免疫应答,发挥重要的免疫监视作用,影响皮肤相关疾病的发生发展。FXYD3,是一种Na,K-ATP酶的特异性辅助亚基,主要在各种类型的上皮细胞中表达,有研究表明FXYD3在肿瘤的发生发展中有着重要调控作用。FXYD3在皮肤组织中有较高的表达,但是其在皮肤免疫中的作用从未有报道,本研究中我们旨在探讨角质形成细胞中FXYD3对炎症的调控作用及其机制。我们发现在人和小鼠银屑病的皮肤表皮中,FXYD3表达显著升高。我们构建了角质形成细胞中特异性敲除FXYD3(K14creFXYD3f/f)的小鼠,通过涂抹咪喹莫特(Imiquimod,IMQ)软膏诱导银屑病模型,研究FXYD3在角质形成细胞中的功能和对于银屑病发生发展的调控作用。角质形成细胞中特异敲除FXYD3对于小鼠免疫细胞的发育并无影响,但在诱导银屑病模型后能显著减轻皮肤炎症反应,表现为表皮增厚减少,炎症因子和趋化因子表达减少,炎症细胞浸润减少等。IL-17A和TNF-α刺激体外培养的小鼠原代角质形成细胞和人角质形成细胞NHEK细胞系,FXYD3缺失对IL-17A促角质形成细胞的增殖作用并无影响,但能减少CXCL1、CXCL2、CXCL8、CXCL10和CCL20等趋化因子的表达,减少角质形成细胞的活化和S100A8、S100A9等抗菌肽的产生。分子机制方面,我们发现干扰FXYD3的表达能抑制IL-17A和TNF-α诱导的角质形成细胞内NF-κB和P38、ERK、JNK等MAPK信号通路的活化。IP实验表明在NHEK细胞系中,FXYD3与IL-17A受体和TNF-α受体均有结合,且IL-17A和TNF-α刺激均能引起FXYD3与相应受体的结合增多。因此,FXYD3在角质形成细胞中可能是通过与细胞膜上的受体复合物结合来发挥作用的。上述研究结果显示,FXYD3能够调控角质形成细胞的趋化因子表达能力,从而在小鼠银屑病发生发展过程中发挥重要的促进作用。我们的研究为揭示FXYD3在皮肤天然免疫中的作用增加了新的认识,为FXYD3这个分子的功能研究提供了新的视角,也对银屑病的诊治提供了新的潜在靶点。
【学位授予单位】：浙江大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R758.63
【图文】：

３．１邋ＦＸＹＤ３在临床银屑病患者和小鼠银屑病模型的皮肤组织中表徶逡逑升高逡逑为了探究ＦＸＹＤ３在银屑病发病过程中表达水平是否有变化，我们收集了临床逡逑银肩病患者的银屑病部位皮肤组织样本，同时我们通过在Ｃ５７ＢＬ／６小鼠背部以及逡逑双耳连续５天涂抹T�喹莫特（Ｉｍｉｑｕｉｍｏｄ，邋ＩＭＱ）软膏构建了小鼠银屑病模型［２６］，逡逑然后收集小鼠银屑病皮肤组织样本，对这些样本进行ＦＸＹＤ３的免疫组化染色。我逡逑们发现，ＦＸＹＤ３在银屑病皮肤部位的表达量较正常皮肤组织中升高（图１Ａ）。然逡逑后我们提取了小鼠背部以及双耳的皮肤组织提取ＲＮＡ进一步验证，实时荧光定量逡逑ＰＣＲ结果显示，银屑病皮肤部位的ＦＸＹＤ３邋ｍＲＮＡ的表徸水平较正常皮肤组织明逡逑显升高（图１Ｂ）。这些结果提示我们ＦＸＹＤ３在银屑病的发生发展过程中可能发挥逡逑着一定的调控作用。逡�

本文编号：2725531