Toll样受体2在银屑病皮损中的表达及其对角质形成细胞增殖的影响

发布时间：2020-07-06 18:31

【摘要】： 第一部分Toll样受体2及相关因子在银屑病患者皮损中的表达目的:探讨TLR2、信号途径下游分子NF-κBp65,以及可能的效应分子TGF-α在银屑病患者皮损中的表达及其与银屑病严重程度的关系。方法:采用EliVision免疫组化法检测40例银屑病患者进行期皮损、11例非皮损区及15例正常人皮肤中TLR2、NF-κBp65、TGF-α的表达,对其在皮损中的表达进行相关性分析,并将结果与PASI评分进行相关性分析。结果:与正常人皮肤及银屑病患者非皮损区相比,银屑病患者皮损表皮中TLR2、NF-κBp65、TGF-α的表达明显上调,而非皮损区TLR2的表达也高于正常人皮肤,差异均有统计学意义(P＜0.05)。银屑病患者皮损表皮中TLR2、NF-κBp65的表达水平与PASI评分之间存在正相关(P＜0.05)。银屑病患者皮损表皮中TLR2与NF-κBp65、TLR2与TGF-α、NF-κBp65与TGF-α表达水平之间均存在正相关(P＜0.05)。结论:TLR2、NF-κBp65、TGF-α在银屑病中表达异常,可能共同参与了银屑病的发病过程。 第二部分Toll样受体2对人角质形成细胞增殖的影响 目的:探讨TLR2对体外培养的人角质形成细胞增殖的影响。方法:应用天然配体肽聚糖(PGN)体外活化人角质形成细胞TLR2,用MTT法检测PGN对角质形成细胞体外增殖的影响,确定最适作用浓度;用实时荧光定量PCR法和Western-blot方法分别检测角质形成细胞TLR2、细胞增殖标记Ki67基因转录和蛋白的表达水平;采用抗体封闭实验分析封闭TLR2对PGN诱导角质形成细胞表达TLR2、Ki67的影响。结果:不同浓度的PGN处理角质形成细胞后24小时,在1.25、2.5、5ug/mL的浓度下细胞出现明显增殖(P＜0.05)。1.25ug/mL PGN作用后12小时和24小时角质形成细胞TLR2 mRNA的表达明显增高,24小时和48小时Ki67 mRNA的表达明显增高;1.25、2.5和5ug/mL PGN作用后24小时,各浓度组角质形成细胞TLR2 mRNA和蛋白的表达均增加,其中1.25和2.5ug/mL浓度下Ki67 mRNA的表达明显增加,各浓度组Ki67蛋白合成均增加(P＜0.05)。以抗人TLR2单克隆阻断性抗体封闭TLR2后,PGN诱导的角质形成细胞TLR2、Ki67 mRNA和蛋白表达的上调均受到明显抑制(P＜0.05)。结论:角质形成细胞TLR2信号途径的活化可促进角质形成细胞的增殖,这一过程可能参与了银屑病的发病。 第三部分Toll样受体2在人角质形成细胞增殖中的作用机制探讨 目的:研究TLR2对体外培养的人角质形成细胞NF-κB活化及TGF-α表达的影响,以探讨TLR2在人角质形成细胞增殖中的可能作用机制。方法:应用天然配体肽聚糖(PGN)体外活化人角质形成细胞TLR2,用实时荧光定量PCR法检测角质形成细胞NF-κBp65、TGF-αmRNA的表达,用Western-blot方法检测核内NF-κBp65和细胞TGF-α蛋白的表达;采用抗体封闭实验分析封闭TLR2对PGN诱导角质形成细胞NF-κB活化和TGF-α表达的影响。结果:1.25ug/mLPGN作用后24小时角质形成细胞NF-κBp65 mRNA的表达明显增高,6小时和24小时TGF-αmRNA的表达明显增高;1.25、2.5和5ug/mL PGN作用后24小时,各浓度组角质形成细胞核内NF-κBp65蛋白合成均增加,其中1.25和5ug/mL浓度下TGF-αmRNA和蛋白表达均明显增加(P＜0.05)。以抗人TLR2单克隆阻断性抗体封闭TLR2后,PGN诱导的角质形成细胞NF-κB活化及TGF-α表达上调均受到明显抑制(P＜0.05)。结论:角质形成细胞TLR2经PGN诱导活化后,可能通过促进NF-κB活化及TGF-α表达而导致角质形成细胞的异常增殖。
【学位授予单位】：复旦大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2008
【分类号】：R758.63
【图文】：

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嘴‘飞图1一 2NF一 KBp65在正常皮肤、银屑病非皮损区和皮损区表皮中的表达(Elivision法X100)a:NF一 KBP65在正常皮肤表皮角质形成细胞中的弱表达;b:NF一 KBp65在银屑病外观正常的非皮损区表皮中基底层和棘层细胞中表达增加;C:NF一 KBp65在银屑病皮损区表皮全层表达，胞核可见较深的表达

【引证文献】

相关硕士学位论文 前2条

1 闵倩;TLR2在口腔粘膜下纤维性变组织中表达的研究[D];中南大学;2011年

2 郑景文;消银洗剂治疗寻常型银屑病的临床研究及实验研究[D];北京中医药大学;2013年

本文编号：2743980