【摘要】：目的:血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor,VEGF)又名血管通透因子(Vascular permeability factor,VPF),主要由角质形成细胞(keratinocyte,KC)产生,是目前发现的作用最强、特异性最高的促血管生成因子,具有血管生成、增加血管通透性的活性,对血管内皮细胞具有特异性。VEGF主要有VEGF121、VEGF145、VEGF148、VEGF165、VEGF165b、VEGF183、VEGF189、VEGF206,8种亚型。正常成人皮肤组织中VEGF有维持真皮原有微血管密度和维持血管运输营养物质所需通透性等自身稳定方面的生理学作用。许多炎症性皮肤病有共同的病理特征:真皮乳头层微血管增生、扩张且管壁增厚。有日本学者研究发现,异位性皮炎的皮损中,血管内皮生长因子的水平较非皮损区及健康人的皮肤明显增高,亚型分析显示,主要是VEGF 121和VEGF 165,因此考虑VEGF 121和VEGF 165和异位性皮炎的发病有关,但作用机制不明。 本实验旨在研究不同亚型血管内皮生长因子(VEGF)是通过激活何种生物信号转导途径而引起生物学效应,进一步阐明血管内皮生长因子与异位性皮炎的发生发展的关系,为异位性皮炎的临床预防和治疗的新靶点提供理论依据,也为最终阐明异位性皮炎等多种疾病的发生和发展的分子机制奠定基础。 方法: 1体外培养人类脐静脉血管内皮细胞。 2 VEGF165或VEGF121对血管内皮细胞分别刺激,不同时间后对细胞进行回收。 3采用蛋白印迹Western Blot方法对血管内皮细胞中的FAK信号转导通路中的FAK和磷酸化FAK的相对定量检测,分析其磷酸化FAK阳性表达变化。 4同样采用蛋白印迹Western Blot方法,对Akt信号转导通路中Akt和磷酸化Akt进行检测,分析磷酸化的Akt阳性表达及其变化。 5运用统计软件SPSS13.0对数据进行统计学分析。 结果: 1 VEGF121及VEGF165促人脐静脉内皮细胞FAK磷酸化的能力分析 1.1VEGF121促人脐静脉内皮细胞FAK磷酸化能力的分析经VEGF121刺激的血管内皮细胞,磷酸化FAK占总FAK的百分比在刺激30分钟内变化有时间依赖性,随时间变化迅速升高,5分钟时为0.893±0.048,30分钟时达峰值1.192±0.151,60分钟时水平已下降为0.966±0.069,不同刺激时相之间磷酸化FAK的百分比之间存显著差异, P0.05。 1.2VEGF165促人脐静脉内皮细胞FAK磷酸化能力的分析经VEGF165刺激的血管内皮细胞,磷酸化FAK占总FAK的百分比在刺激10分钟内变化有时间依赖性,随时间变化逐渐升高,5分钟时为0.469±0.042,10分钟时达峰值1.015±0.120,不同刺激时相之间磷酸化FAK的百分比之间存显著差异, P0.05。 1.3VEGF121和VEGF165促人脐静脉内皮细胞FAK磷酸化能力的比较分析 VEGF121与VEGF165相比,磷酸化FAK百分比的变化趋势在统计学上存在显著差异(P0.05),经VEGF121刺激的血管内皮细胞FAK迅速磷酸化,且磷酸化FAK的含量较高。 2 VEGF121及VEGF165促人脐静脉内皮细胞Akt磷酸化的能力分析 2.1 VEGF121促人脐静脉内皮细胞Akt磷酸化能力的分析经VEGF121刺激的血管内皮细胞,磷酸化Akt占总Akt的百分比随时间变化明显改变,经统计学分析不同刺激时相之间磷酸化Akt的百分比有显著差异,P0.05。 2.2 VEGF165促人脐静脉内皮细胞Akt磷酸化能力的分析经VEGF165刺激的血管内皮细胞,磷酸化Akt占总Akt的百分比随时间变化明显改变,经统计学分析不同刺激时相之间磷酸化Akt的百分比有显著差异,P0.05。 2.3VEGF121和VEGF165促人脐静脉内皮细胞Akt磷酸化能力的比较分析 VEGF121与VEGF165相比,磷酸化Akt百分比的变化趋势在统计学上无显著差异(P0.05)。(以上结论满足协方差矩阵对称条件,P0.05) 结论: 1 VEGF 121和VEGF 165均能激活FAK信号传导通路,但是VEGF 121较VEGF165的作用明显且迅速; 2 VEGF 121和VEGF 165均能激活Akt信号传导通路,但两者就该能力而言无显著差异; 3结合以往研究得出:VEGF 121之所以较VEGF165易引起血管通透性增加,很可能是其通过优势促进FAK及Src信号通路蛋白的磷酸化而实现的。
【学位授予单位】：河北医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2011
【分类号】：R758.2
【共引文献】
相关期刊论文 前6条
1 吕志强;李海刚;张蔚;曾弘;曾韵洁;沈溪明;;非小细胞肺癌淋巴结转移与分子生物学相关性研究[J];中国热带医学;2006年04期
2 冯振中;徐锦程;承泽农;;血管内皮生长因子-C和环氧合酶-2表达与口腔鳞癌淋巴结转移的关系[J];实用肿瘤杂志;2007年06期
3 甘世新;任晋军;米玉录;;血管内皮生长因子C和PTEN在口腔鳞状细胞癌中的表达及与颈淋巴结转移的关系[J];山西医药杂志(下半月刊);2012年07期
4 吕志强;李海刚;张蔚;江山平;曾弘;曾韵洁;沈溪明;;非小细胞肺癌预后与分子生物学因素的关系[J];中山大学学报(医学科学版);2006年S2期
5 刘元林;徐文;鲁祖清;;寻常型银屑病患者治疗前后血清E-cad及VEGF水平的变化[J];中国实验诊断学;2008年09期
6 杨晓红;满孝勇;郑敏;;血管内皮生长因子受体在皮肤病中的研究进展[J];中国医学科学院学报;2007年02期
相关博士学位论文 前6条
1 王勇杰;血管内皮生长因子家族及其受体在非小细胞肺癌中的表达、意义及以此为靶点的基因治疗[D];山东大学;2005年
2 杨进强;胃癌淋巴管生成与淋巴转移的关系及抗淋巴管生成的实验研究[D];河北医科大学;2006年
3 杨晓红;血管内皮生长因子受体2在HaCaT细胞中的表达及功能研究[D];浙江大学;2007年
4 汪五清;T-bet/GATA3信号通路与银屑病中医证型的相关性及中药治疗的机制研究[D];第二军医大学;2009年
5 周春蕾;促肾上腺皮质激素释放激素/MAPKs信号途径在银屑病发病中的作用[D];山东大学;2009年
6 吴贤杰;血管内皮生长因子受体2在毛囊上皮细胞中的表达及功能研究[D];浙江大学;2012年
相关硕士学位论文 前10条
1 禹钟哲;清热利湿饮治疗寻常型血热型银屑病的临床研究及其对血管内皮生长因子的影响[D];山东中医药大学;2010年
2 张永翠;银屑病患者骨髓间充质干细胞转分化为血管内皮细胞的初步研究[D];山西医科大学;2011年
3 高磊;VEGF121和VEGF165对血管内皮细胞通透性影响的研究[D];河北医科大学;2011年
4 马桂馨;肺癌血管内皮生长因子受体Fltl、KDR及Flt4的表达与转移和预后的关系[D];青岛大学;2003年
5 杨冬山;血管内皮生长因子C及其受体表达与乳腺癌淋巴结转移的相关研究[D];河北医科大学;2003年
6 彭晓林;VEGF-A、-C、-R3在喉癌中的表达及其与淋巴转移的关系[D];山西医科大学;2004年
7 何伟东;血管内皮生长因子VEGF及其受体KDR、FLT-1在脑星形胶质细胞瘤中表达的意义[D];青岛大学;2004年
8 刘玲;可溶性血管内皮生长因子受体-1与子痫前期发病关系的研究[D];青岛大学;2006年
9 罗景玉;E-cad和VEGFR-3在肺腺癌组织中表达的临床研究[D];山东大学;2006年
10 梁雄安;血管内皮生长因子（VEGF）及受体flt-1和KDR在SLE皮损中的表达及意义[D];山西医科大学;2008年
本文编号：
2745439
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/pifb/2745439.html
