单纯型大疱性表皮松解症的K5和K14基因突变分析

发布时间：2020-07-15 19:06

【摘要】： 背景单纯型大疱性表皮松解症(epidermolysis bullosa simplex,EBS)是以表皮内水疱为特征的较为少见的遗传性皮肤病,发病率约为1:30,000-1:50,000,主要表现为皮肤脆性增加和摩擦部位水疱形成。根据临床表现和超微形态,至少有11种亚型的EBS,其中7种为常染色体显性遗传,包括手足复发型(EBS-Weber Cokayne type,EBS-WC)、泛发型(EBS-Koebner type,EBS-K)、疱疹样型(EBS-Dowling Meara type,EBS-DM)为3种最常见类型,以及伴花斑状色素沉着型(EBS with mottledpigmentation,EBS-MP)、Ogna型、伴肌营养不良型和伴迁移性红斑型等少见类型。手足复发型大疱性表皮松解症始于儿童时期或者更晚,是最常见的一型,表现为机械刺激后手足部位厚壁水疱。泛发型大疱性表皮松解症始于新生儿至婴儿早期,多见于手足和四肢,可见掌跖过度角化和脱屑,多不累及甲、齿和口腔粘膜。疱疹样型出生时即可出现,是最严重的类型,水疱/血疱泛发全身,严重时可致新生儿死亡,与前两型不同,气候炎热时症状好转,口腔粘膜糜烂,甲板脱落和营养不良,并伴有粟丘疹,预后不留瘢痕。EBS的致病基因是角蛋白5(K5)或角蛋白14(K14)基因,分别定位于12q11-q13和17q12-q21。到目前为止,在EBS患者中共发现约140种K5和K14基因突变(http://www.interfil.org)。约有75-95%的EBS患者能检测到突变,且以点突变为主。K14或K5基因的突变会引起纤维结构网络的破坏,导致皮肤的脆性增加和水疱发生。然而,基因缺陷也可能位于K5和K14基因以外,最近发现,伴肌营养不良的单纯性大疱性表皮松解症与角蛋白丝相关蛋白(plectin)突变相关。目的检测3个中国汉族EBS家族和3例散发EBS患者的基因突变,为基因诊断和遗传咨询提供依据。方法收集3个中国汉族EBS家族和3例散发EBS患者及其家庭成员和100名健康对照的外周血样标本,利用改良盐析法提取外周血白细胞中的DNA,设计覆盖K5和K14基因所有外显子编码区的18对引物,通过PCR反应扩增和直接测序进行序列分析。结果本研究检测了3个EBS家系和3例散发EBS患者,发现4个错义突变和1个移码突变。家系1,先证者具有典型的EBS-MP型临床表现和组织病理特征,家族中共有3代19人,其中6人患病,通过直接测序,发现患者K5基因9号外显子均存在移码突变c.1649delG(p.Gly550AlafsX77)。家系2共有2代6人,其中3人患病,所有患者均携带K5基因1号外显子c.508G＞A(p.Glu170Lys)错义突变。家系3有芝代9人,3人患病,发现一个新的K14基因错义突变c.280G＞A(p.Ala94Thr)在患者。在2例散发EBS患者中分别在K5基因检测到一个新的错义突变c.1730T＞A(p.Phe577Tyr)和K14基因6号外显子重复错义突变c.1237G＞A(p.Ala413Thr)。有1例EBS散发患者未检测到基因突变。本研究同时对家系中非患者以及100例健康人对照进行K5和K14基因突变筛查,未发现同样碱基改变,证明以上突变是致病突变而不是单核苷酸多态性。结论K5基因错义突变c.508G＞A(p.Glu170Lys)、c.1730T＞A(p.Phe577Tyr),移码突变c.1649delG(p.Gly550AlafsX77),K14基因错义突变c.1237G＞A(p.Ala413Thr)、c.280G＞A(p.Ala94Thr)可能是导致3个EBS家系患者和2例EBS散发患者发病的主要原因。
【学位授予单位】：安徽医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2008
【分类号】：R758.5
【图文】：

照片,先证者,家系,照片

沉着及减退斑，并有绿豆大小水疙，尼氏征阴性。指(趾)甲发育不良。水疮边缘处皮损病理活检示基底细胞空泡变性，表皮真皮交接处可见色素沉着颗粒，真皮层淋巴细胞浸润(图8)。图8:家系1先证者临床及病理照片(HE，10*40) Fig.8CliniealfindingsandhistologiealofProbandinFamilyl 3.1.1.3家系成员调查家系1来自安徽省，3代19人，6人患病，研究对象包括先证者及其父母、姐姐、姨妈夫妇、表兄弟共9人。家族中无近亲结婚。 3.1.2家系2 3.1.2.1家系图(图9)图9:单纯型大疙性表皮松解症家系图(家系2) Fig.9PedigreeofEBS(FamilyZ) 3.1.2.2先证者调查先证者(H4)，男7岁。因手足水疮6余年就诊。患者出生后5个月左右手足出现水疤，病情反复发作，夏天加重，随年龄增长，水疤有所缓解，愈合后结痴一29-

患者,阴性,反复发作,足部

3.1.4散发病例资料散发病例患者4为18岁男性患者，学生，出生后’卜肢水抱，反复发作，无家族史，查体见双下肢及足部弥漫水疤，尼氏征阴性(图13)。患者5为10岁女性患者，l岁左右双手及双足部位出现水疤，尼氏征阴性，无家族史，病理示表皮内水疤(图14)。图13:患者4临床照片 Fig.13CliniealfindingsofPatie一lt4一31-

照片,先证者,家系,照片

后不留瘫痕。皮肤科检查:双下肢及上肢前臂、双手及背部可见水疮、血疤及结痴。指(趾)甲缺失。皮损病理活检示表真皮分离，间隙可见少址液体。真皮血管扩张，血管周少量淋巴组织细胞浸润(图12)。图12:家系3先证者临床及病理照片(HE，10*40) 3.1.3.3 Fig.12CliniealfindingsandhistologiealofProbandi一IFamily3家系调查家系32代9人，3人患病，先证者父亲及奶奶有类似发病史，家族中无近亲结婚。 3.1.4散发病例资料散发病例患者4为18岁男性患者，学生，出生后’卜肢水抱，反复发作，无家族史，查体见双下肢及足部弥漫水疤，尼氏征阴性(图13)。患者5为10岁女性患者，l岁左右双手及双足部位出现水疤，尼?

【引证文献】