survivin在尖锐湿疣组织中表达的研究

发布时间：2020-07-16 01:50

【摘要】： 尖锐湿疣是由人乳头瘤病毒引起的外阴、生殖道、肛门等部位的良性表皮肿瘤。早期发病症状较轻常难以觉察到。主要病损表现为肛门生殖道疣状赘生物。尖锐湿疣的典型病理改变是棘细胞层中出现空泡细胞。迄今为止已发现人乳头瘤病毒有100多个分型，绝大多数是无害的，有30多种可以通过性传播方式致病。这30多种病毒又可分为低危型和高危型，低危型HPV引起的生殖道、宫颈、阴茎、直肠等处的损害一般不会癌变，而高危型的HPV感染有癌变的可能。CA的发生发展是一个多因素、多步骤的过程，过去的几年对尖锐湿疣的发病机制的研究主要集中在某些免疫蛋白的异常表达如HLA—A3860DQ2、Caspase—3、Bcl-2、CD44、COX-2.指导临床从干扰细胞免疫功能方面进行治疗。Survivin是一种新发现的凋亡抑制基因，可以抑制细胞凋亡，诱导增生。我们利用免疫组化法对17例正常皮肤、120例尖锐湿疣组织中survivin的表达进行了检测，探讨了survivin与尖锐湿疣发生发展的关系，研究认为survivin基因在尖锐湿疣组织中的异常表达可能导致了细胞的增殖异常，与尖锐湿疣的发生、病理改变、临床复发、发展有关。研究提示我们可以从封闭survivin基因，调节细胞凋亡方面来治疗尖锐湿疣，为尖锐湿疣的临床治疗提供新思路，从而提高治愈率，降低复发率。目的：用聚合酶链式反应技术(PCR)检测HPV-DNA，免疫组织化学链霉素抗生物蛋白-过氧化酶连接法(SP法)检测尖锐湿疣组织中survivin的表达，以探讨凋亡抑制基因survivin在尖锐湿疣组织中的表达与尖锐湿疣发生发展、临床病理之间的关系，以及在临床治疗方面的意义。方法：收集2005年2月—2006年10月在天津医科大学总医院皮肤性病门诊就诊的临床诊断为尖锐湿疣的病例120例，另取外科非皮肤病手术的正常皮肤17例作为阳性对照。取材方法均采用剪除法剪除标本0、2×0、2×0、3大小，应用PCR方法检测HPV-DNA，将PCR检测HPV-DNA为阳性的120例标本平分成两份，一份用5％的甲醛溶液固定24—48小时，石蜡包埋，常规石蜡标本切片，4—5um厚；一份用铝箔包裹并编号贴上标签投入液态罐(—196℃)中冷冻保存。将120例尖锐湿疣组织病理切片用免疫组织化学链霉素抗生物蛋白-过氧化酶连接法(SP法)，检测survivin在120例尖锐湿疣组织，17例正常皮肤组织中的表达。结果：经过PCR技术检测120例尖锐湿疣标本，通用引物扩增的是HPVDNA位点是6321—6340，碱基长度是450bp，故在450 bp出现扩增带者为阳性。120例标本经二甲苯脱蜡，系列酒精水化，热修复抗原，滴加生物素化山羊抗兔或兔抗山羊1gG，DAB显色，显微镜观察，染色阳性信号呈棕黄色颗粒，表达主要位于细胞核，将阳性细胞按其数量及染色强度分为3级：表达弱阳性(+)，即阳性细胞数小于10％，染色强度为弱阳性或仅个别细胞呈中至强阳性者；表达强阳性(+++)，即阳性细胞数60％，染色强度为中至强阳性，少数细胞可为弱阳性表达；中性阳性(++)，即阳性细胞数介于表达弱阳性与表达强阳性两级之间；染色强度与背景无明显差别者为阴性。尖锐湿疣中survivin的阳性表达率为52.5％、17例正常皮肤组织中survivin不表达，差别分别有显著性(p＜0.05)；结论：1、survivin基因在尖锐湿疣组织中表达异常，以基底层，棘细胞层中表达明显。在正常皮肤中不表达。 2、survivin基因可能导致细胞的增殖异常，与尖锐湿疣的发生、病理改变、临床复发、发展有关。 3、survivin在尖锐湿疣中的表达不能作为尖锐湿疣的生物学行为指标。
【学位授予单位】：天津医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2007
【分类号】：R752.53
【图文】：

正常皮肤,免疫组化

正常皮肤免疫组化x400

免疫组化,正常皮肤

尖锐湿疵皮损中survivin表达免疫组化x40q门豁图

HE染色,免疫组化

尖锐湿优组织HE染色x400

【共引文献】