干预hTERT的表达及紫杉醇对Hut78细胞增殖及凋亡影响的研究

发布时间：2020-08-22 10:15

【摘要】：研究目的 1．探讨端粒酶逆转录酶基因反义寡核苷酸(hTERT-ASODN)对皮肤T细胞淋巴瘤(cutaneous T cell lymphoma，CTCL)细胞株Hut78端粒酶活性、基因表达及细胞生长的影响。 2．研究紫杉醇对Hut78细胞的生长抑制及凋亡诱导作用，并探讨其诱导凋亡作用的机制。 3．研究hTERT-ASODN与紫杉醇之间的联合抗肿瘤效应及hTERT-ASODN能否增加Hut78细胞对化疗药物紫杉醇的敏感性。 4．通过体外转录法合成hTERT-siRNA，建立体外siRNA(small interfering RNA)的合成制备方法，并对合成的条件进行优化，为RNA干扰(RNA interference，RNAi)的进一步研究提供技术平台；同时采用基因转染技术将siRNA转入Hut78细胞，观察端粒酶RNAi效应对端粒酶基因表达、端粒酶活性及细胞生长的抑制作用，探索皮肤T细胞淋巴瘤基因治疗的新途径。 研究方法 1．hTERT寡核苷酸(hTERT-ODNs)的设计、合成及细胞基因转染根据hTERT基因的cDNA序列分析，设计出一条互补于起始密码区的18个碱基长度的反义片段和相应的正义片段，并进行全程硫代修饰；采用脂质体介导的细胞基因转染技术将不同浓度(10μmol／L、20μmol／L、30μmol／L)的寡核苷酸分别导入Hut78细胞中。 2．检测hTERT-ODNs对Hut78细胞端粒酶活性、基因表达及细胞生长的影响分别于转染后的不同时间，应用端粒酶重复序列扩增及酶联免疫吸附方法
【学位授予单位】：中国协和医科大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2005
【分类号】：R739.5

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本文编号：2800565