皮肤树突状细胞不同亚群在特应性皮炎经皮致敏中的作用

发布时间：2017-04-01 09:10

  本文关键词：皮肤树突状细胞不同亚群在特应性皮炎经皮致敏中的作用，，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：背景： 特应性皮炎(atopic dermatitis, AD)是一种常见的慢性、复发性、瘙瘁性、炎症性皮肤病,其发病机制不清,预防和治疗困难。目前认为AD是一定遗传背景下环境因素刺激、皮肤屏障功能障碍以及免疫应答失衡相互作用的结果,但确切的机制尚不明确。皮肤相关免疫系统(skin associated lymphoid system, SALT)能感知、传递外界的刺激和信号,介导并指导后续的免疫应答,在AD的始动和炎症维持中发挥重要的作用。树突状细胞(dendritic cells, DCs)是SALT的重要组成部分,参与了皮肤的多种免疫应答过程,在皮肤的抗感染、经皮致敏、经皮耐受等过程中发挥重要的作用,然而DCs在AD发病中的确切作用和机制尚未完全阐明。如能明确DCs及其亚群在AD中的作用,并能有针对性地调控DCs的功能和活性,将有可能改变皮肤的应答状态,实现对AD等炎症、过敏性皮肤疾病的预防和治疗。 皮肤DCs可以分为浆细胞样树突状细胞(plasmacytoid dendritic cells, pDC)和经典树突状细胞(conventional dendritic cells, cDC),皮肤cDC又可以分为至少三个亚群：表皮的朗格汉斯细胞(Langerhans cells, LCs)、真皮Langerin+树突状细胞(Langerin+dermal dendritic cells,Langerin+dDC)和真皮Langeirn-树突状细胞(Langerin-dermal dendritic cells, Langerin-dDC)。不同的cDC亚群在皮肤的免疫应答中发挥不同的作用,以往研究认为LCs主要介导致免疫活化应答,Nakajima等报道LCs促进蛋白抗原的经皮致敏,参与小鼠AD模型的炎症过程。然而最近大量研究显示,LCs还具有重要的负向免疫调控功能,抑制接触性超敏反应(contact hypersensitivity,CHS)、移植排斥反应等免疫应答,在维持皮肤免疫稳态中发挥重要作用。因此,LCs在AD经皮致敏中的确切作用和机制还有待于进一步研究。目前研究认为Langerin+dDC和Langerin-dDC主要参与促免疫活化应答,促进CHS等炎症,然而Langerin+dDC和Langerin-dDC在AD经皮致敏中的作用尚未见报道。 近年来LCs条件性缺失小鼠的应用大大促进了对LCs及dDC功能的认识。Langerin-DTR小鼠是在小鼠LCs特异性蛋白Langerin启动子下表达人白喉毒素受体(diphtheria toxin receptor, DTR),当给小鼠腹腔注射白喉毒素(diphtheria toxin, DT)时,就会导致表达Langerin的细胞迅速死亡,包括表皮的LCs和真皮的Langerin+DCs。之后,表皮的LCs和真皮的Langerin+DCs在不同时间逐渐恢复,在这些细胞恢复的不同时间点施加干预,则可以分析LCs、Langerin+dDC和Langerin-dDC的功能。 经皮致敏被认为和AD的发病机制密切相关。卵清蛋白(ovalbumin, OVA)经皮致敏能使小鼠OVA特异性血清IgE、IgG1升高,IL-4、IL-5mRNA表达增加,并诱导产生类似于AD的临床皮损和病理表现,是目前较好的反映经皮免疫应答的AD模型。 目的：利用Langerin-DTR小鼠及野生型小鼠建立经皮致敏AD模型,探索皮肤各DCs亚群在AD经皮致敏中的作用及机制。 方法： 1.小鼠AD模型的建立：皮肤封包OVA抗原,每次3天,每周1次,连续5周。检测总IgE, OVA特异性IgG1、IgG2a水平以判断经皮致敏效果,外用OVA抗原激发后予临床及病理评分,以评价AD模型制备效果。流式细胞仪检测表皮和真皮浸润炎症细胞的情况。 2.利用Langerin-DTR小鼠分析皮肤各群DCs在AD经皮致敏中的作用：利用Langerin-DTR小鼠,在注射DT后2天和10天两个时间点封包OVA抗原,以注射DT但未经皮致敏的Langerin-DTR小鼠和未注射DT的经皮致敏Langerin-DTR小鼠为对照,检测总IgE、OVA特异性IgG1和IgG2a水平,比较DCs各亚群缺失状态下经皮致敏的效果。 结果： 1.小鼠AD模型的建立：小鼠经皮致敏后,总IgE、OVA特异性IgG1和IgG2a水平均高于生理盐水对照组,接近腹腔OVA免疫小鼠;经皮激发后AD模型的临床及病理评分也高于生理盐水对照组,提示经皮致敏AD模型成功建立。激发后流式细胞仪分析表皮炎症状态下的LCs表型,发现激发后AD模型炎症皮肤CD11bhighlangerinhighLCs细胞显著增多,真皮浸润炎症细胞也增多。 2.利用Langerin-DTR小鼠分析皮肤各群DCs在AD经皮致敏中的作用：注射DT后不同时间点经皮致敏Langerin-DTR小鼠,发现与注射DT但未经皮致敏的Langerin-DTR小鼠相比,DT注射2天后经皮致敏的Langerin-DTR小鼠总IgE.OVA特异性IgG1和IgG2a均升高,提示Langerin-dDC参与了AD的经皮致敏过程Langerin-DTR小鼠注射DT后10天经皮致敏,其总IgE.OVA特异性IgG1和IgG2a高于注射2天后经皮致敏Langerin-DTR小鼠,但低于未注射DT的经皮致敏Langerin-DTR小鼠,提示Langerin dDC也参与了AD的经皮致敏过程,LCs很可能也参与了经皮致敏。 结论： 1.Langerin-dDC和Langerin+dDC均参与了AD模型的经皮致敏。 2.LCs很可能参与了AD模型的经皮致敏,仍需进一步研究以证实
【关键词】：特应性皮炎 树突状细胞 经皮致敏
【学位授予单位】：北京协和医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R758.2
【目录】：

• 缩略语表4-6
• 中文摘要6-9
• ABSTRACT9-12
• 1. 前言12-14
• 2. 材料和方法14-18
• 2.1 建立Babl/c及Langeirn-DTR小鼠经皮致敏AD模型14
• 2.2 ELISA 检测总 IgE、OVA 特异性 IgGl 及 IgG2a14-16
• 2.3 流式分析LCs分群16-17
• 2.4 统计学分析17-18
• 3. 实验结果18-26
• 4. 讨论26-28
• 6. 创新点和不足之处28-30
• 7. 参考文献30-34
• 综述34-40
• 参考文献38-40
• 致谢40-42
• 个人简历42-44

【共引文献】

中国博士学位论文全文数据库 前1条

1 徐英萍;在小鼠模型中研究衰老对表皮朗格汉斯细胞发育和功能的影响[D];山东农业大学;2013年

中国硕士学位论文全文数据库 前2条

1 王理;易感位点1q21.3和11q13.1与中国汉族人特应性皮炎的关联性研究[D];安徽医科大学;2014年

2 胡翠;探讨骨桥蛋白在寻常型银屑病发病中的作用及临床意义[D];华中科技大学;2013年

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本文编号：280358