强脉冲光治疗皮肤光老化的动物实验研究

发布时间：2020-09-01 15:33

　　 【目的】建立小鼠皮肤光老化模型,用强脉冲光(Intense PulsedLight,IPL)进行治疗,通过比较治疗前后皮肤组织中生化指标、组织结构、病理形态学和细胞因子的变化,从不同层面全面评价和了解IPL的作用。 【方法】 ①长波紫外线(Ultraviolet A,UVA)、中波紫外线(UltravioletB,UVB)联合光照造模。 ②实验分组:设立正常对照组、模型组小鼠,模型成功后,从中分别设立IPL治疗组(IPL治疗后1w、3w),以及与造模停止后与IPL治疗组同期动态观察的IPL对照组(未治疗1w后组、未治疗3w后组)。 ③生化指标的测量:紫外分光光度计测定IPL治疗前各组小鼠皮肤中的超氧化物歧化酶(Superoxide Dismatase,SOD)、丙二醛(Malcic Dialdehyde,MDA)、羟脯氨酸(Hydroxyproline,HYP)含量; ④组织形态学观察:分别采用HE常规染色和地衣红染色法观察皮肤的组织结构和胶原纤维和弹力纤维的变化; ⑤细胞因子的检测:用免疫组化SP法检测IPL治疗前后核转录因子-κB(nuclear factor kappa-B,NF-κB)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、肿瘤坏死因子(Tumour Necrosis Factor,TNF-α)在小鼠皮肤中的表达与分布情况。 【结果】 1.肉眼观察:模型组小鼠出现明显的光老化特征; 2.生物指标检测:与正常对照组比较,模型组SOD、HYP含量降低,MDA含量升高,差异有统计学意义(P＜0.01);IPL治疗后,SOD、MDA变化不明显,HYP轻度升高,与未治疗两组比较有统计学意义(P＜0.05): 3.病理组织切片形态学观察观察: 正常对照组:表皮菲薄,细胞层数少或单层,真皮层胶原纤维较纤细,排列较稀疏,呈粉红色; 模型组:表皮明显增厚,可伴有角化过度或角化不全,表皮细胞体积增大,核深染,真皮浅层胶原束增粗,均质化,染色变深: IPL治疗组:IPL治疗后1w、3w组表皮逐渐变薄;真皮浅层胶原增厚,组织排列较前致密; 未治疗组:未治疗1w、3w后组表皮逐渐变薄;真皮层变化不大; 4.皮肤厚度测量: 模型组小鼠表皮厚度值明显高于正常组小鼠,两组差异有统计学意义(P＜0.05);模型组小鼠真皮厚度值明显低于正常组小鼠,组间差异有统计学意义(P＜0.05): IPL治疗1w表皮略厚于未治疗1w后组,但差异无统计学意义(P＞0.05),真皮厚度差异亦无统计学意义(P＞0.05);IPL治疗3w后与未治疗3w后组比较,表皮厚度差异无统计学意义(P＞0.05),真皮厚度差异有统计学意义,即IPL治疗3w后组真皮厚于未治疗3w后组(P＜0.05); 5.弹力纤维染色:用地衣红染色法将弹力纤维染成棕黑色,与正常组比较模型组可见增多、增粗的变形弹力纤维,IPL治疗后,变性弹力纤维逐渐变少; 6.弹力纤维面积:模型组与正常对照组两组比较差异有统计学意义(P＜0.05),即模型组弹力纤维面积大于正常对照组;IPL治疗3w组与未治疗3w后组比较两组差异有统计学意义(P＜0.05),即IPL治疗3w后组弹力纤维面积小于未治疗3w后组弹力纤维面积; 7.免疫组化染色: ①NF-κB的表达:模型组与正常组相比,差异显著,有统计学意义(P＜0.05);IPL治疗后1w组与未治疗1w后组相比,有统计学差异(P＜0.05);IPL治疗后3w组与未治疗3w后组相比,无统计学意义(P＞0.05); ②TNF-α的表达:在模型组中的表达与正常对照组相比,差异显著有统计学意义(P＜0.05);IPL治疗后,模型1w组与IPL1w组比较,有统计学差异(P＜0.05),未治疗3w后组与IPL1w组比较,无统计学意义(P＞0.05); ③VEGF的表达:模型组与正常组对比,差异显著,有统计学意义(P＜0.01);IPL治疗1w后与未治疗1w组对比,有统计学差异(P＜0.05);IPL治疗3w与未治疗3w后比较,无统计学差异(P＞0.05): 【结论】 ①经UVA联合UVB照射8w的小鼠初步具备皮肤光老化模型临床及病理诊断依据; ②IPL对表皮层的刺激较小,引起的表皮增厚现象在组织病理形态学上并不持久; ③IPL主要作用于真皮层;④NF-κB、TNF-α、VEGF三者的表达与皮肤光老化的形成有显著相关; ⑤IPL治疗后NF-κB、TNF-α、VEGF的表达上调,提示三者可能参与了IPL所致的热损伤修复过程,且可能有时间相关性。
【学位单位】：中南大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2008
【中图分类】：R751.05
【部分图文】：

硕士学位论文第三章实验结果第三章实验结果3.1肉眼观察(见图3一‘一3一‘2)正常对照组:小鼠背部皮肤薄嫩光滑，湿润有光泽，柔韧而富有弹性，皮纹细致，看不见皱纹，无光老化皮肤特征;光照模型组:接受照射1周小鼠皮肤暴光部位明显较前潮红，湿润度下降;光照2周皮肤干燥，皮纹加深;光照3周皮肤干燥伴局部脱屑，可见活动性皱纹;光照4周，触感皮肤增厚，弹性下降，可见活动性皱纹;光照5周，静止状态下可见皱纹;光照6周皮肤明显干燥、皱纹变深

硕士学位论文第三章实验结果第三章实验结果3.1肉眼观察(见图3一‘一3一‘2)正常对照组:小鼠背部皮肤薄嫩光滑，湿润有光泽，柔韧而富有弹性，皮纹细致，看不见皱纹，无光老化皮肤特征;光照模型组:接受照射1周小鼠皮肤暴光部位明显较前潮红，湿润度下降;光照2周皮肤干燥，皮纹加深;光照3周皮肤干燥伴局部脱屑，可见活动性皱纹;光照4周，触感皮肤增厚，弹性下降，可见活动性皱纹;光照5周，静止状态下可见皱纹;光照6周皮肤明显干燥、皱纹变深

明显干燥、皱纹变深，皮肤弹性差，肤质较硬图3一7接受光照6w，皱纹进一加宽、加深，肤质硬图3一8接受光照8w，皮肤沟槽样粗深皱纹形成图3一10IPL术后的模型鼠图3一 11IPL术后3周的模型鼠，皱纹较治疗前明显减少、变浅图3一12与IPL治疗后3w比较，未治疗3w后小鼠皮肤外观无明显改善3.2小鼠皮肤组织中生化指标的测定与正常对照组比较，模型含量组SOD、HYP含量明显降低，MDA含量增高

【引证文献】

相关硕士学位论文 前2条

1 章小曼;基于新型光学成像技术的小鼠皮肤光老化及修复机制的实验研究[D];福建师范大学;2010年

2 徐小晖;小鼠皮肤深Ⅱ度烫伤及治疗的光学观察与分析[D];福建师范大学;2012年

本文编号：2809922