UVB对皮肤成纤维细胞作用及机制研究

发布时间：2020-09-16 08:51

　　 目的:1.研究UVB对皮肤成纤维细胞的作用及Salubrinal抗UVB照射潜在的药用价值。2.探讨Salubrinal在UVB照射引起的皮肤成纤维细胞死亡中的作用机制。方法:1.UVB照射对皮肤成纤维细胞的影响及Salubrinal对UVB诱导的皮肤成纤维细胞死亡的影响:采用体外培养的人包皮成纤维细胞(BJ细胞),实验分4组,空白对照组,Salubrinal处理组,Salubrinal预处理后UVB照射组,UVB照射组,然后通过MTT法、台盼蓝试验检测细胞增殖存活情况。2.Salubrinal对UVB照射引起的皮肤成纤维细胞死亡的作用,采用体外培养的人包皮成纤维细胞(BJ细胞),分为实验组和对照组,实验组用Salubrinal预处理,对照组不进行处理,然后分别用5种不同强度UVB照射,通过MTT法检测细胞增殖存活情况。3.Salubrinal有效剂量测定:体外培养的人包皮成纤维细胞分为实验组及对照组,对照组及实验组均用5个浓度梯度Salubrinal预处理,然后实验组用凋亡剂量UVB照射,对照组不用UVB照射,通过MTT法检测各组细胞增殖存活情况。4.UVB照射对皮肤成纤维细胞内质网应激水平的影响:实验分4组,每组用不同强度UVB照射,然后通过Western blot检测内质网应激相关蛋白p-PERK、PERK、CHOP、p-IRE1α及裂解的caspase3的变化。5.Salubrinal对UVB照射皮肤成纤维细胞内质网应激水平的影响:实验分4组,对照组,Salubrinal处理组,UVB照射组,Salubrinal预处理后UVB照射组,通过Western Blot检测细胞内质网应激标记物p-PERK、PERK、CHOP及p-IRE1α的水平变化。6.Salubrinal对UVB照射皮肤成纤维细胞胞内Ca~(2+)水平影响,实验分Salubrinal处理组和对照组,然后分别分别用3个不同强度UVB照射,通过共聚焦荧光显微镜观察细胞内相应的Ca~(2+)信号。结果:1.UVB照射皮肤成纤维细胞后,细胞存活率下降,经不同浓度Salubrinal预处理后,细胞存活率增加,且呈剂量依赖性。2.不同强度UVB照射人皮肤成纤维细胞后,胞内内质网应激相关蛋白p-PERK、CHOP、p-IRE1α及裂解的caspase3表达水平增加,且呈剂量依赖性方式。3.经Salubrinal预处理组较未处理组相比,UVB照射人皮肤成纤维细胞后,内质网应激相关蛋白p-PERK、CHOP、p-IRE1α表达水平下降。4.Salubrinal能防止UVB照射引起的人皮肤成纤维细胞内Ca2+水平增加。结论:1.UVB照射能引起皮肤成纤维细胞死亡,Salubrinal对其具有保护作用。2.UVB照射通过内质网应激及钙稳态失衡引起皮肤成纤维细胞死亡,Salubrinal对其保护作用是通过阻断内质网应激及调节钙稳态来实现的。
【学位单位】：福建医科大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2018
【中图分类】：R758.1
【部分图文】：

Salubrinal浓度对UVB诱导的皮肤成纤维细胞损伤的影响

UVB照射对人皮肤成纤维细胞内质网应激水平的影响

通过Western blot检测Salubrinal预处理并暴露于UVB照射后细胞内CHPERK，磷酸化PERK（Thr 980）和磷酸化IRE1α（Ser 724）的表达水平，如示，通过预处理Salubrinal，UVB诱导的CHOP和磷酸化的PERK / IRE1a的表平升高显著减弱（图3A和B），而对照组及只加Salubrinal组相关蛋白表达无统计学差异。A3.Salubrinal 预处理后 UVB 照射人皮肤成纤维细胞内质网应水平变化

【参考文献】

相关期刊论文 前1条

1 蒋洁瑶;纪超;毕志刚;张美华;;反式玉米素抑制紫外线诱导的水通道蛋白3下调有关的信号通路[J];临床皮肤科杂志;2013年06期

本文编号：2819655