角质形成细胞抗白念珠菌感染免疫作用机制的研究
【学位单位】:四川大学
【学位级别】:博士
【学位年份】:2005
【中图分类】:R756
【部分图文】:
四川大学博士学位论文2一4代细胞和原代培养的细胞形态上没有明显差别。继续培养,细胞逐步变大,呈不规则型,出现空泡,甚至伪足,细胞崩解、死亡。一般可传5一9代,约30一60天。
1.1细胞的形态学变化:消化分离的细胞大小不一,呈圆形、椭圆形或不规则形,细胞境界清楚,胞浆均匀;培养4一h6后细胞开始贴壁,至24h贴壁达到高峰(图1一1)。贴壁细胞多呈岛状分布,逐渐向四周生长扩散,约二周左右细胞长满培养皿底部,达到融合。此时多以小细胞为主,呈多角形,扁平,铺路石状,核大,无异常核分裂像,细胞呈单层生长,没有成纤维细胞混杂(图1一2一1一5);而在有血清的培养基中,混杂较多的成纤维细胞(图1一6);当细胞长满皿底70一8%0时传代,第
四川大学博士学位论文图l一5无血清培养1d2细胞形态x600图1一6血清培养12d细胞形态x400图1一1~1一5分别代表角质形成细胞在无血清培养条件下,从贴壁(24h开始)到融合(12d左右)的过程;细胞形态呈多角形,扁平,铺路石状,细胞核较大。图1一6代表血清培养的角质形成细胞,有成纤维细胞的混杂。1.2细胞鉴定:试验组用抗广谱角蛋白抗体对角质形成细胞免疫组化染色,细胞浆呈黄棕色颗粒,即对广谱角蛋白抗体呈阳性反应(图1一7),鉴定为角质形成细胞;而阴性对照组细胞没有着色。图1一7广谱角蛋白CK的免疫组化染色x400细胞浆对广谱角蛋白KC抗体呈阳性反应(黄棕色),提示培养的细胞为角质形成细胞2RT一POR检洲TL--RZmRNA的结果
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