FQ-PCR方法在四种常见性传播疾病病原学诊断中的应用研究

发布时间：2020-10-20 20:57

　　 目的采用荧光定量PCR(Fluorescent Quantitative PCR,FQ-PCR)检测沙眼衣原体(CT)、淋球菌(GC)、单纯疱疹病毒Ⅱ型(HSV-Ⅱ)和人类乳头状病毒(HPV)等性病病原体,评价其临床应用价值。同时分析4种常见的性传播疾病(Sexually TransmittedDisease,STD)的感染情况及流行情况,为临床防治以上疾病提供依据。 方法随机抽取420名疑为性病而来湘雅医院皮肤性病门诊就诊的患者,采用荧光定量PCR方法检测CT、GC、HSV-Ⅱ、HPV四种病原体,女性患者同时检测宫颈分泌物与阴道分泌物。通过检测结果和调查统计分析STD的患病情况及流行情况,采用成组资料的χ~2检验和配对χ~2检验分析其结果的差异性,所有结果均采用SPSS 13.0软件进行分析。 结果420例疑为性病患者中,用FQ-PCR检测CT、GC、HSV-Ⅱ、HPV四种病原体,总检出率为57.86%。282例男性标本阳性率分别为23.76%、12.06%、8.16%、11.7%,138例女性宫颈分泌物阳性率分别为18.12%、23.19%、9.42%、11.59%,阴道分泌物检出率分别为21.01%、20.9%、7.97%、8.70%。男女阳性检出率比较GC病原体女性检出率高于男性,统计学检验有显著性差异(χ~2=8.669,af=1,P=0.003);其余病原体男女检出率结果差异无显著性意义(P值均大于0.05);阴道分泌物与宫颈分泌物检测结果差异无显著性(χ~2=1.086,df=3,P=-0.781)。两种或两种以上混合感染例数的阳性检出率为13.81%。 结论 1、FQ-PCR方法可检测多种病原体,适合于临床应用及流行病学研究。 2、采用FQ-PCR方法检测阴道分泌物与宫颈分泌物的CT、GC、HSV-Ⅱ、HPV阳性率无显著性差异。 3、四种常见STD中CT阳性检出率居第一位,混合感染以两种病原体同时感染为主。
【学位单位】：中南大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2007
【中图分类】：R759
【部分图文】：

株扩增曲线和样本扩增曲线图2一1:部分样本FQ一cR循环扩增图从图2一l一a可以看出，编号11一16、23、29、33其Ct值的结果都小于37.0，因此其结果均可判断为阳性，而每个编号都对应着不同的颜色，不同的颜色代表了不同的样本和标准株及反应浓度，由于荧光染料在激发光的作用下所释放的荧光光能可直接反应出PCR扩增产物量的变化，其中所切割的荧光基团数与PCR产物的数量成比例，因而根据PCR反应液中的荧光强度就能算出原始的模版量，如图2一l一b。2.2不同性别CT、GC、HSV、HPV检测结果不同性别标本中的cT、Gc、Hsv、HPv阳性检出率、了、尸值见表2一1、图2一2。其中表2一1为女性患者宫颈分泌物的病原体检出率。

b扩增曲线:不同颜色代表不同的的标准株扩增曲线和样本扩增曲线图2一1:部分样本FQ一cR循环扩增图从图2一l一a可以看出，编号11一16、23、29、33其Ct值的结果都小于37.0，因此其结果均可判断为阳性，而每个编号都对应着不同的颜色，不同的颜色代表了不同的样本和标准株及反应浓度，由于荧光染料在激发光的作用下所释放的荧光光能可直接反应出PCR扩增产物量的变化，其中所切割的荧光基团数与PCR产物的数量成比例，因而根据PCR反应液中的荧光强度就能算出原始的模版量，如图2一l一b。2.2不同性别CT、GC、HSV、HPV检测结果不同性别标本中的cT、Gc、Hsv、HPv阳性检出率、了、尸值见表2一1、图2一2。其中表2一1为女性患者宫颈分泌物的病原体检出率。

仪冷)，临床上混合感染以两种病原体混合感染为主。2.4女性患者四种病原体阴道分泌物与宫颈分泌物检出率比较从表2一3和图2一3可见，女性患者阴道分泌物与宫颈分泌物的F奋PCR的检出率无显著性差异，了刃，163，动阵3，尹七。，983。各种病原体检出率和总检出率统计学检验均无显著性意义，P值均大于0.05。表2一3女性阴道分泌物与宫颐分泌物阳性检出率比较分泌物 (n=138)CT-DNAGC一 DNAHSV-DNAHPV-DNA合计阴道分泌物 29(21.01)28(20.9)11(7.97)12(8.70)80(57.97)宫颈分泌物25(18.12)32(23.19)13(9.42)16(11.59)86(62.32)了 0.9740.0880.0630.3540.5科 P0.3240.7670.8020.5350.461注:括号外为阳性数，括号内为阳性检出率
【参考文献】

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本文编号：2849138