大蒜素对黑素瘤诱导淋巴管增生及黑素瘤增殖的抑制作用研究

发布时间：2021-01-12 10:40

　　目的诱导建立小鼠淋巴管内皮细胞构成的良性肿瘤模型,观察小鼠黑素瘤细胞B16-F1体外对淋巴管增生的影响,探讨大蒜素抑制小鼠黑素瘤细胞B16-F1体外诱导淋巴管增生及大蒜素对小鼠黑素瘤细胞B16-F1增殖及凋亡的影响。方法8周龄C57BL/6小鼠16只腹腔注射弗氏不完全佐剂,间隔15天2次,分批处死小鼠后,对诱导出的小鼠腹腔新生物进行病理组织学观察,用免疫组织化学方法检测淋巴管内皮细胞标志性抗原VEGF-C和Flt-4。分离、分切肿物后,于纤维蛋白凝胶内用单纯B16-F1细胞条件培养液培养及分别加入不同浓度（3、6、9μg/ml）的大蒜素细胞条件培养液培养,倒置显微镜下观察。传代培养小鼠黑素瘤B16-F1细胞,使细胞浓度为5×1 04个/ml,分别加入不同浓度（3、6、9、12、15μg/ml）的大蒜素细胞培养液。培养不同时间后,用噻唑蓝（MTT）法检测细胞毒性,用原位末端标记（TUNEL）法检测细胞凋亡,用定量RT-PCR法检测了不同浓度的大蒜素作用小鼠黑素瘤细胞B16-F1后肿瘤细胞ras基因的表达水平。结果实验小鼠中13只（81.3%）膈肌腹腔面、肝脏表面及侧腹壁腹腔面可见边界清楚... 

【文章来源】：华中科技大学湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：55 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

肿瘤组织电子显微镜下表现

4.免疫组织化学免疫组织化学可见构成的多管腔囊性结构的肿瘤内皮细胞表达VEGF一C和Flt一4阳性(图3)。(A)VEGF一3表达 X100(B)Flt一4表达 x200图3肿瘤组织免疫组织化学

结果见第一部分。疫组织化学结果见第一部分。淋巴管体外培养观察淋巴管瘤组织块培养3一4天后可见出芽，从肿瘤长入凝胶，逐管状，微管有明显的管壁和管腔，逐级分支。在B16一Fl细胞养液作用下，微淋巴管生成数显著高于对照组(图4)。在不同3、6、9pg/而)的大蒜素细胞条件培养液作用下，微淋巴管生著低于对照组(图5)。

【参考文献】：
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本文编号：2972706