使用无标记LC-MS/MS对寻常型银屑病患者的皮肤屏障功能相关蛋白进行无创性定量蛋白组学分析

发布时间：2021-01-29 02:44

　　研究背景银屑病通常被认为是一种免疫学引发的疾病,近些年的很多的研究发现银屑病可能是由于表皮皮肤屏障功能的主要缺陷“驱动”。皮肤屏障的功能通常指表皮,尤其是角质层的皮肤屏障功能结构,角质层的各种蛋白质是角质层的皮肤屏障结构的重要生化组成。与蛋白质的任何异常表达都会影响着银屑病的皮肤屏障功能。角蛋白（keratin,KRT）是表皮细胞的主要结构蛋白,呈纤维状,与丝聚合蛋白（filaggrin,FLG）形成致密的角蛋白纤维束组成角质层的支架结构。丝聚合蛋白（FLG）与兜甲蛋白（loricrin,LOR）、内披蛋白（involucrin,IVL）、毛透明蛋白以及富含脯氨酸的小蛋白（small proline rich region protein,SPRRs）等蛋白质一起,在转谷氨酰胺酶（transglutaminas,TGs）的交叉连接作用下形成角化包膜（cornified envelope,CE）。角化包膜在对抗外界机械张力、防止病原生物入侵、保持角质层内外水平衡方面中有发挥着重要的作用,有效的防止外界有害物质对皮肤的入侵,是角质层作为一道防御屏障的基础。位于颗粒层的丝聚合蛋白原在半胱氨酸... 

【文章来源】：安徽医科大学安徽省

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【学位级别】：硕士

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安徽医科大学硕士学位论文28对健康志愿者和寻常型银屑病患者的皮肤蛋白进行无标记定量蛋白组学分析。在寻常型银屑病患者组的皮肤样本中检出1102种蛋白，正常健康志愿者组检出106种蛋白，选取42种与皮肤屏障密切的相关蛋白在寻常型银屑病患者和正常健康志愿者组之间做对比分析，通过统计分析发现其中41种与皮肤屏障功能密切相关的蛋白在正常人和银屑病病人的角质层表达存在明显差异。根据这41种蛋白的不同功能特点，把它们分类为角蛋白组类、SPRRs蛋白组、S100A蛋白组、角化包膜蛋白组、其他蛋白组五大类来逐一分析阐述。4.1角蛋白表6.12种角蛋白的蛋白峰面积值Table6.12Proteinpeakareaof12keratin蛋白名病人组蛋白峰面积值（中位数）正常人组蛋白峰面积值（中位数）KRT1433510000001.12515E+11KRT10493600000001.32295E+11KRT6B431215000001146250000KRT17383040000004549000000KRT14269805000003021400000KRT5143150000004150500000KRT1614262500000333795000KRT6A771775000082923000KRT97873100006157500000KRT725576000000KRT2548665001149000000KRT819415000图2.角蛋白蛋白峰面积值对比图Fig2.Contrastmapofpeakareaofkeratin

安徽医科大学硕士学位论文31TGM536257500FLG20386500078281000Caspase-143303100045124500图3.其他角化包膜蛋白蛋白峰面积值对比图Fig3.Comparisonofpeakareaofotherkeratinizedenvelopeproteins本次研究发现LOR在寻常型银屑病病人角质层中未检出，但是在正常人角质层中检出，考虑与银屑病患者皮损中肿瘤坏死因子(TNF)α对其的抑制作用有关。LOR是角质包膜的主要组成成分，既往有学者对TNF-α与表皮屏障蛋白之间的关系进行研究，结果显示，TNF-α可以显著抑制角质形成细胞内LOR基因的表达[40]。寻常型银屑病患者角质层LOR表达不足，可以严重影响角质包膜的形成和成熟，加重皮肤屏障功能的障碍。本次研究发现IVL在正常中未检出，正常人皮肤中IVN表达限制在颗粒层和棘层上部，所以角质层检测不出来，但是寻常型银屑病角质层中可以检测出来，实验结果与既往的有创皮肤活检加免疫组化实验方法结果不同，既往免疫组化实验方法结果为IVN在银屑病患者皮损内在棘层可以检测，在基底层和角质层通常检测不到，表达量较正常人明显增加[41]。FLG一直被研究认为是皮肤屏障异常领域的主要研究热点。FLG的基因突变已被证明是特应性皮炎的主要危险因素，既往的很多FLG与银屑病的相关研究发现在银屑病皮损中，FLG的表达明显增加，但是在局部的病例区域FLG不表达例如

【参考文献】：
期刊论文
[1]表皮细胞紧密连接在银屑病发病机制中的作用[J]. 赵京霞,王燕,底婷婷,蒙玉娇,刘宇,翟春燕,李萍.  中国皮肤性病学杂志. 2019(04)
[2]5个表皮松解性掌跖角化症家系的KRT9基因突变谱分析和产前DNA诊断[J]. 徐立群,王艳芳,汤悦笑,栾晓睿,俞萍,张咸宁.  中国优生与遗传杂志. 2017(09)
[3]寻常型银屑病患者血清S100A12水平的测定及临床意义[J]. 郑蕾,刘巧.  中国热带医学. 2017(05)
[4]银屑病易患基因研究进展[J]. 曹玉婷,孙立.  医学综述. 2016(07)
[5]基于不同裂解液的蛋白质组样品制备方法的比较研究[J]. 孙宁宁,王子健,高祥,程欣,孙万春,杨静波,刘宁.  分析化学. 2015(06)
[6]胶带粘贴技术结合LC-MS法测定人体皮肤角质层中艾迪康唑浓度[J]. 吴黎莉,周可,徐兰芳,陈沄,盛春泉.  中国药科大学学报. 2014(01)
[7]细胞角蛋白14、17和19在银屑病中的表达[J]. 郝小军,高顺强,李真,邢文晓,李文素.  临床误诊误治. 2012(02)
[8]“改进型”皮肤组织钻孔器应用临床分析[J]. 王新,杨改娥,杨根明.  中国麻风皮肤病杂志. 2011 (07)
[9]基于质谱技术蛋白质定量方法的研究进展[J]. 朱金蕾,张锴,何锡文,张玉奎.  分析化学. 2010(03)
[10]角蛋白1和17在点滴状银屑病患者皮损中的表达[J]. 马敬,艾东方,杨秀芳,季姗姗.  中国麻风皮肤病杂志. 2010 (03)



本文编号：3006133