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Sirtuin4和Sirtuin5在黑色素瘤中的表达及其功能研究

发布时间:2021-06-26 22:03
  目的:沉默调节蛋白(Sirtuin,Sirt)是一类具有多种代谢调节酶活性的蛋白质家族,Sirtuin家族成员共有7个成员(Sirt 1-7),其成员中Sirt 4蛋白和Sirt 5蛋白具有多种酶的活性。近年来研究发现,Sirt 4和Sirt 5广泛参与到细胞生存、衰老和代谢等生物学过程中,在生物体应激反应、炎症反应、肿瘤发生和能量代谢等众多生物学过程中扮演着重要角色,并在癌症、糖尿病、肥胖、帕金森和阿尔兹海默病等疾病的临床治疗方面具有一定潜力。黑色素细胞瘤是临床上比较常见的皮肤肿瘤,目前尚没有关于Sirt 4和Sirt 5在黑色素瘤细胞中表达情况的研究,Sirt 4和Sirt 5调控恶性黑色素肿瘤的发生、发展以及转移机制尚不明确,针对该疾病的治疗还需要更多的探索。本文拟研究Sirt 4和Sirt 5在黑色素瘤中的表达及其功能。研究方法:在黑色素瘤(n=82)和痣(n=18)的组织芯片上,应用免疫组织化学染色技术检测Sirt 4和Sirt 5在其中的表达情况。收集这些患者临床及病理资料,通过统计学分析手段探索临床信息、Sirt 4和Sirt 5的表达情况与黑色素瘤恶性程度的相关性。在3... 

【文章来源】:中国医科大学辽宁省

【文章页数】:54 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

Sirtuin4和Sirtuin5在黑色素瘤中的表达及其功能研究


Sirt4和Sirt5在恶性黑色素瘤和痣中的表达

实时荧光定量PCR,表达水平,黑色素细胞,技术检测


中国医科大学硕士学位论文22图2 实时荧光定量PCR检测Sirt 4和Sirt 5 mRNA的表达水平3.3 Western Blot技术检测Sirt 4和Sirt 5在正常黑色素细胞和黑色素瘤细胞中蛋白质水平的表达为了进一步验证 Sirt 4 和 Sirt 5 蛋白在黑色素瘤细胞系的表达情况,本研究对恶性黑色素瘤细胞系 HTB140、C8161、A2058、2813、A375、435S 和正常黑色素细胞系 PIG-1 的 Sirt 4 和 Sirt 5 蛋白表达水平进行 Western Blot 检测。实验结果显示,Sirt 4 和 Sirt 5 蛋白在 7 个细胞系中都存在表达(图 3)。为进一步探究相关蛋白的功能,本研究根据蛋白质表达情况选择恶性黑色素瘤细胞系 A375、C8161、A2058 和正常黑素细胞系 PIG-1 进行后续实验。图3 Sirt 4和Sirt 5蛋白在细胞系中的表达(A)Western Blot技术检测Sirt 4在恶性黑色素瘤细胞系和黑色素细胞系中的表达。(B)Sirt 4蛋白在细胞系中的相对表达量。(C)Western Blot技术检测Sirt 5在恶性黑色素瘤细胞系和黑色素细

细胞系,蛋白,黑色素细胞,实时荧光定量PCR


图2 实时荧光定量PCR检测Sirt 4和Sirt 5 mRNA的表达水平3.3 Western Blot技术检测Sirt 4和Sirt 5在正常黑色素细胞和黑色素瘤细胞中蛋白质水平的表达为了进一步验证 Sirt 4 和 Sirt 5 蛋白在黑色素瘤细胞系的表达情况,本研究对恶性黑色素瘤细胞系 HTB140、C8161、A2058、2813、A375、435S 和正常黑色素细胞系 PIG-1 的 Sirt 4 和 Sirt 5 蛋白表达水平进行 Western Blot 检测。实验结果显示,Sirt 4 和 Sirt 5 蛋白在 7 个细胞系中都存在表达(图 3)。为进一步探究相关蛋白的功能,本研究根据蛋白质表达情况选择恶性黑色素瘤细胞系 A375、C8161、A2058 和正常黑素细胞系 PIG-1 进行后续实验。

【参考文献】:
期刊论文
[1]Sirtuin 5:a review of structure,known inhibitors and clues for developing new inhibitors[J]. Lingling Yang,Xiaobo Ma,Yanying He,Chen Yuan,Quanlong Chen,Guobo Li,Xianggui Chen.  Science China(Life Sciences). 2017(03)



本文编号:3252172

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