甲基化修饰抑癌基因MSX1抑制黑色素瘤细胞迁移和侵袭的研究

发布时间：2021-10-08 18:36

　　目的探讨MSX1在黑色素瘤细胞系和组织中表达和甲基化及对黑色素瘤细胞A375迁移/侵袭的影响和机制。方法 qRT-PCR和免疫组织化学法分别检测MSX1在黑色素瘤细胞系和组织中的表达;甲基化PCR分析MSX1在黑色素瘤组织中甲基化;分别转染pcDNA3.1（+）-Flag-MSX1质粒（实验组）和pcDNA3.1（+）-Flag-Vector质粒（对照组）至A375细胞;Transwell迁移和侵袭实验检测MSX1对细胞迁移和侵袭的影响;RT-PCR验证MSX1对上皮间质转化及下游相关标志物的影响,免疫蛋白印迹实验验证MSX1对WNT/β-catenin信号通路的影响。结果与色素痣组织和细胞相比,MSX1 mRNA和蛋白在黑色素瘤细胞和组织中表达下调（P<0.001）;MSX1甲基化水平表达上调,其甲基化程度明显高于癌旁组织和正常色素痣组织。过表达MSX1后抑制细胞迁移和侵袭（P<0.001）,而上皮间质转化及下游相关标志物表达受到抑制。过表达MSX1能抑制WNT/β-catenin信号通路及其下游细胞因子的表达。结论 MSX1在黑色素瘤组织中表达下调,能抑制Wnt/β-c... 

【文章来源】：实用肿瘤学杂志. 2020,34(06)

【文章页数】：7 页

【文章目录】：
1 资料与方法
    1.1 细胞培养和材料仪器
    1.2 临床组织样本
    1.3 实验方法
        1.3.1 RNA和蛋白提取
        1.3.2 MSX1过表达载体构建,细胞转染和在线数据分析
        1.3.3 qRT-PCR检测MSX1在黑色素瘤中的表达
        1.3.4 免疫组织化学法
        1.3.5 甲基化PCR检测MSX1在黑色素瘤中甲基化
        1.3.6 Transwell实验检测迁移和侵袭
        1.3.7 蛋白质免疫印迹实验
    1.4 统计分析方法
2 结果
    2.1 MSX1在人黑色素瘤细胞系和组织中表达
    2.2 MSX1在人黑色素瘤中甲基化表达
    2.3 MSX1过表达表达对人黑色素瘤细胞迁移和侵袭的影响
    2.4 MSX1过表达表达对肿瘤干细胞标志物的影响
    2.5 重新表达MSX1对Wnt/β-catenin信号通路的影响
3 讨论


【参考文献】：
期刊论文
[1]CCNB1基因通过调控PI3K/Akt信号通路对口腔鳞癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响[J]. 王璞,韦丽宾,倪广晓.  实用肿瘤学杂志. 2020(02)
[2]WNT4在脑胶质瘤中甲基化下调及抑制恶性胶质瘤细胞增殖的研究[J]. 张巍,姜晓东,迟大鹏.  实用肿瘤学杂志. 2020(02)



本文编号：3424733