HINT1和FAK mRNA及蛋白在恶性黑素瘤皮损中的表达及意义
发布时间:2021-12-30 17:59
在我国,肢端雀斑样黑素瘤(ALM)是黑素瘤的主要类型,其生物学行为、发展和预后与其它类型黑素瘤相比存在很大的不同,但是关于ALM基因表达的研究不是很多,我们选取HINT1/PKCI-1和FAK两个基因,比较研究它们在ALM和普通痣细胞痣表达的差异,为寻找ALM新的诊断和预后指标以及新的治疗靶位打下基础。并探讨从存档皮肤组织中提取RNA进行逆转录PCR反应的可行性和稳定性,并与原位杂交和免疫组化的结果进行比较,为今后利用存档组织标本进行基因RNA表达水平的回顾性研究打下基础。 本文首先用蛋白酶K消化和异硫酸氰胍—酸性苯酚法提取石蜡包埋组织中RNA,进行逆转录PCR反应。探讨并优化了在不同储存时间段的石蜡包埋组织中提取RNA和RT-PCR的条件,比较了不同扩增片段长度和分别以随机引物、特异性下游引物作为逆转录引物对RT-PCR结果的影响。发现扩增片段<120bp、采用特异性下游引物为逆转录引物的RT-PCR的结果稳定,不同储存时间的组织间无差异。比较了5例标本分别经福尔马林固定石蜡包埋和直接冻存提取RNA进行RT-PCR的结果,mRNA表达的水平均由与管家基因的相对比值来表示,结果石...
【文章来源】:北京协和医学院北京市 211工程院校 985工程院校
【文章页数】:87 页
【学位级别】:博士
【文章目录】:
缩略语
前言
全文摘要
Abstract
第一篇 实验材料及研究方法
第一节 研究对象
第二节 研究试剂和方法
一、RT-PCR试剂及实验方法
二、原位杂交试剂及实验方法
三、免疫组化试剂及实验方法
四、主要仪器
第二篇 石蜡包埋皮肤组织标本中提取RNA进行逆转录PCR的研究
第三篇 HINT1/PKCI-1mRNA在良恶性黑素细胞瘤中的表达
第一节 逆转录PCR法检测良恶性黑素细胞肿瘤中HINT/PKCI-1mRNA的表达
第二节 原位杂交法检测良恶性黑素细胞肿瘤中HINT/PKCI-1mRNA的表达
第四篇 良恶性黑素细胞肿瘤中局部黏附斑蛋白激酶(FAK)的表达
第五篇 论文相关综述
HIT家族及与肿瘤的关系
在读期间发表及参加会议文章
致谢
【参考文献】:
期刊论文
[1]西安、重庆两所医院20年皮肤恶性黑素瘤回顾[J]. 孙东杰,高天文,李春英,刘荣卿,李青,刘友生,刁庆春,何弘,黄高升,郝飞,马福成,柳凤轩,钟白玉,闫小初,刘东梅,李廷慧,刘玉峰. 中华皮肤科杂志. 2004(02)
[2]运用cDNA芯片技术对恶性黑素瘤相关基因的研究[J]. 林彤,孙建方. 中华皮肤科杂志. 2004(02)
本文编号:3558707
【文章来源】:北京协和医学院北京市 211工程院校 985工程院校
【文章页数】:87 页
【学位级别】:博士
【文章目录】:
缩略语
前言
全文摘要
Abstract
第一篇 实验材料及研究方法
第一节 研究对象
第二节 研究试剂和方法
一、RT-PCR试剂及实验方法
二、原位杂交试剂及实验方法
三、免疫组化试剂及实验方法
四、主要仪器
第二篇 石蜡包埋皮肤组织标本中提取RNA进行逆转录PCR的研究
第三篇 HINT1/PKCI-1mRNA在良恶性黑素细胞瘤中的表达
第一节 逆转录PCR法检测良恶性黑素细胞肿瘤中HINT/PKCI-1mRNA的表达
第二节 原位杂交法检测良恶性黑素细胞肿瘤中HINT/PKCI-1mRNA的表达
第四篇 良恶性黑素细胞肿瘤中局部黏附斑蛋白激酶(FAK)的表达
第五篇 论文相关综述
HIT家族及与肿瘤的关系
在读期间发表及参加会议文章
致谢
【参考文献】:
期刊论文
[1]西安、重庆两所医院20年皮肤恶性黑素瘤回顾[J]. 孙东杰,高天文,李春英,刘荣卿,李青,刘友生,刁庆春,何弘,黄高升,郝飞,马福成,柳凤轩,钟白玉,闫小初,刘东梅,李廷慧,刘玉峰. 中华皮肤科杂志. 2004(02)
[2]运用cDNA芯片技术对恶性黑素瘤相关基因的研究[J]. 林彤,孙建方. 中华皮肤科杂志. 2004(02)
本文编号:3558707
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