黑色素瘤中癌基因B-Raf V600E 对B-Raf/ERK/Mps1负反馈抵抗作用的机制

发布时间：2022-02-22 14:11

　　目的明确癌基因B-RafV600E在Mps1和B-RafWT/MEK/ERK通路之间自动调节的负反馈回路中抵抗作用的具体机制。方法 （1）Sbcl2转染B-RafWT和Mps1-KD,Western blot方法检测p-ERK水平;（2）向B-Raf野生型SK-MEL31、Sbcl2、WM35细胞及V600E突变型SK-MEL28、A375细胞中过表达Mps1,Western blot方法检测p-ERK水平;（3）在SK-MEL31、Sbcl2、WM35细胞中敲低AKT,转染Mps1,Western blot方法检测p-ERK水平;（4）在SK-MEL31、Sbcl2、WM35细胞中敲低内源性B-Raf,过表达外源性RafV600E,Western blot方法检测p-AKT水平;敲低SK-MEL-28、A375细胞中RafV600E,Western blot方法检测p-A K T水平。结果 （1）M p s 1激酶和B-RafWT/MEK/ERK通路之间的自动负反馈通路不依赖Mps1激酶的活性;（2）在野生型SK-MEL31、Sbcl2、WM35细胞中外源性Mps1的表达可诱导AKT... 

【文章来源】：肿瘤防治研究. 2015,42(09)北大核心CSCD

【文章页数】：5 页

【文章目录】：
0引言
1材料与方法
    1.1材料
    1.2方法
        1.2.1细胞培养
        1.2.2反转录病毒的制备
        1.2.3目的细胞的感染
        1.2.4Westernblot检测
2结果
    2.1Mps1激酶活性对Mps1和B-RafWT/MEK/ERK通路之间的负反馈调节的影响
    2.2在黑色素瘤细胞中外源性Mps1的表达对AKT的磷酸化及ERK活性的影响
    2.3敲低野生型黑色素瘤细胞中的AKT后,观察对Mps1和B-RafWT/MEK/ERK之间的负反馈通路的影响
    2.4B-RafV600E对AKT的磷酸化的影响
3讨论



本文编号：3639609