改良的qPCR检测水痘-带状疱疹病毒的临床应用

发布时间：2022-12-06 00:05

　　目的分析改良的qPCR与水痘-带状疱疹病毒（VZV）DNA试剂盒检测VZV DNA的检出率,并进一步探讨其临床应用。方法选取2017年5月—2017年7月在西南医科大学附属医院就诊的带状疱疹患者31例。利用患者疱液提取标准品,并根据VZV DNA保守序列ORF59制备引物以设计一种改良的qPCR。对比该方法与试剂盒检测VZV DNA的效果后,用该方法测定伐昔洛韦抗病毒治疗前后外周血单个核细胞（PBMC）和血浆VZV DNA的阳性率。结果患者疱液提取的标准品大小为395?bp。经测序并与VZV DNA进行比对,标准品被匹配上的碱基数占比99%。该qPCR的标准曲线决定系数R~2=0.9999,回归方程Y=-3.9367X+45.07,其中X为Log值,Y为Ct值。改良的qPCR与VZV DNA试剂盒检测PBMC中VZV DNA阳性率均为73.3%。治疗前后PBMC与血浆的VZV DNA阳性率比较,差异均无统计学意义（P?＞0.05）。PBMC和血浆在治疗前与治疗后的VZV DNA阳性率比较,差异无统计学意义（P?＞0.05）。结论改良的qPCR与VZV DNA试剂盒的检测效果相近,且血浆... 

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【文章目录】：
1 资料与方法
    1.1 一般资料
    1.2 主要试剂及仪器
    1.3 标本采集和处理
    1.4 巢式PCR和凝胶电泳制备标准品
    1.5 改良的qPCR
    1.6 VZV DNA试剂盒
    1.7 统计学方法
2 结果
    2.1 标准品分析
    2.2 改良的qPCR反应的标准曲线、扩增曲线及熔解曲线
    2.3 两种VZV DNA检测方法比较
    2.4 2种标本治疗前后的VZV DNA阳性率变化
3 讨论


【参考文献】：
期刊论文
[1]振幅整合脑电图与磁共振成像对儿童病毒性脑炎急性期诊断及预后的评估价值分析[J]. 王维,李佳,王立利,李小亚,郑伟,董琰,张淑敏,高静云.  实用心脑肺血管病杂志. 2019(02)
[2]带状疱疹患者疱液及外周血病毒载量与血浆S100β和神经元特异性烯醇化酶水平的研究[J]. 张馨月,钟婷婷,钟建桥,许飏.  中华皮肤科杂志. 2017 (02)
[3]67例妊娠期带状疱疹的治疗及对妊娠结局的影响[J]. 刘爱花.  中国现代医学杂志. 2016(08)
[4]不同荧光定量PCR分析方法检测大鼠脑缺血再灌注损伤中Caspase-3基因的表达研究[J]. 朱振洪,李金辉,万海同.  激光生物学报. 2011(03)



本文编号：3710637