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miR-219a-5p对皮肤鳞状细胞癌细胞凋亡的影响及机制

发布时间:2022-12-07 21:46
  目的探讨miR-219a-5p对皮肤鳞状细胞癌细胞凋亡的影响以及潜在的作用机制。方法设置miR-con组、miR-219a-5p组、anti-miR-con组、anti-miR-219a-5p组、miR-219a-5p+pcDNA组、miR-219a-5p+pcDNA-SMC4组、miR-con+SMC4-WT组、miR-con+SMC4-MT组、miR-219a-5p+SMC4-WT组、miR-219a-5p+SMC4-MT组,转染均用脂质体法。qRT-PCR检测miR-219a-5p和SMC4 mRNA表达水平;Western Blot检测蛋白表达;MTT法检测细胞增殖活性;流式细胞术检测细胞凋亡;双荧光素酶报告基因检测实验检测荧光活性。结果相较于人正常皮肤细胞HaCaT,皮肤鳞状细胞癌细胞HSC-2、Colo-16、SCL-1中SMC4 mRNA和蛋白表达水平显著升高,miR-219a-5p表达水平显著降低(P<0.05)。过表达miR-219a-5p可抑制皮肤鳞状细胞癌细胞增殖,诱导细胞凋亡;促进Caspase-3蛋白表达,抑制Cyclin D1蛋的表达;抑制Wnt/β-cat... 

【文章页数】:6 页

【文章目录】:
1 材料与方法
    1.1 材料
    1.2 方法
        1.2.1 细胞培养
        1.2.2 细胞转染与分组
        1.2.3 qRT-PCR检测miR-219a-5p和SMC4 mRNA表达水平
        1.2.4 Western blot检测SMC4、CyclinD1、Caspase-3、Wnt2、β-catenin蛋白的表达
        1.2.5 MTT检测细胞活性
        1.2.6 流式细胞术检测细胞凋亡
        1.2.7 荧光素酶报告基因检测实验检测miR-219a-5p对SMC4的靶向调控
        1.2.8 统计学分析
2 结果
    2.1 miR-219a-5p和SMC4在皮肤鳞状细胞癌细胞株中的表达
    2.2 转染miR-219a-5p诱导皮肤鳞状细胞癌细胞的凋亡
    2.3 miR-219a-5p过表达对Wnt/β-catenin信号通路的影响
    2.4 miR-219a-5p靶向SMC4抑制SMC4蛋白的表达
    2.5 过表达SMC4逆转miR-219a-5p诱导皮肤鳞状细胞癌的凋亡
3 讨论


【参考文献】:
期刊论文
[1]皮肤鳞状细胞癌的研究进展[J]. 王鑫,范志霞,王朋敏,张晶,苗国英.  中国临床研究. 2018(06)
[2]SMC4对人乳腺癌细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响及其机制研究[J]. 郑世杨,黄泽楠,李玺.  重庆医学. 2018(16)
[3]皮肤鳞状细胞癌的研究进展[J]. 郭济菡,李青峰.  组织工程与重建外科杂志. 2018(02)
[4]miR-219-5p对非小细胞肺癌细胞增殖、凋亡与侵袭的 影响及其机制[J]. 李磊,倪正义,汤中文,周密.  临床与病理杂志. 2017(09)
[5]MiRNA-3p/5p在肿瘤中的研究进展[J]. 张凌宇,陈昌杰,杨清玲.  分子诊断与治疗杂志. 2017(04)
[6]miR-219-5p对胰腺癌细胞增殖、凋亡和侵袭的影响及机制[J]. 李丽平,徐丹,叶俊,吴舜,马松林.  山东医药. 2017(25)
[7]Wnt/β-catenin信号通路在鼻咽癌组织的异常激活[J]. 黄孝文,崔伟伟,王宝凤,崔永华.  华中科技大学学报(医学版). 2017(03)
[8]MiR-200a抑制Wnt/β-catenin信号通路缓解肾间质纤维化[J]. 陈华,龚艺,周宝尚,张璟.  中国临床药理学与治疗学. 2017(04)
[9]微RNA在皮肤肿瘤中的研究进展[J]. 王莹,康晓静.  医学综述. 2016(19)
[10]Wnt2B及PAI-1在上皮性卵巢癌中的表达及临床意义[J]. 左丽娜,张晓薇,范良生.  中华生物医学工程杂志. 2014 (03)

硕士论文
[1]Sox9介导Wnt/β-catenin信号通路影响皮肤鳞癌细胞增殖的机制[D]. 李雪梅.大连医科大学 2015
[2]SMC4在原发性肝癌中的表达及其临床意义[D]. 周波.第三军医大学 2011



本文编号:3712915

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