新型HO-1可变剪接体在黑色素瘤细胞增殖中的作用研究

发布时间：2024-06-29 07:57

　　背景:黑色素瘤是世界上最具侵袭性的恶性肿瘤之一。在过去的几十年里,黑色素瘤的发病率一直在持续上升。肿瘤的早期诊断是非常重要的。因此,器官特异性生物标志物的发现迫在眉睫,这有助于及早发现黑素瘤,准确监测疾病进展并预测治疗效果。血红素氧合酶1(HO-1,32k Da)是一种重要的酶,它能催化血红素降解为胆绿素、一氧化碳和铁离子。许多人类肿瘤中的HO-1的表达水平上升,尤其是乳腺癌、甲状腺癌和口腔癌,通常与疾病分期和病人预后不良有关。HO-1促进癌细胞增殖,抑制化学毒性物质或紫外线照射引发的细胞凋亡。据报道,在细胞压力反应下HO-1转移到细胞核发挥独立于酶活性的许多重要功能,特别是转录调节。除了细胞定位影响HO-1的功能,异构体的产生可能也是影响HO-1功能的一种重要途径。在真核细胞中,内含子的存在极大地增加了基因表达的复杂性,这使得一个基因可以产生各种各样的蛋白质,这是通过一种叫做选择性剪接的过程来实现的。大多数人类基因转录本可以通过多种方式剪接而成。然而,HO-1的可变剪接体到目前为止还没有被报道过。本文鉴定了HO-1基因的一种新型选择性剪接形式,它是由移除3号外显子产生的,我们将它命名...

【文章页数】：72 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图2.1.HO-1基因扩增及测序分析

用TBST溶液清洗PVDF膜2次，每次2分钟，加入用一抗稀释液稀释好的抗体（稀释比例为1：1000），放置在摇床上在0到4度低温环境下缓慢摇晃过夜。回收一抗后，用TBST溶液清洗PVDF膜3次，每次7分钟。将PVDF膜浸泡在5%的脱....

图2.2.HO-1外显子/内含子剪接方式及相应蛋白结构预测

图2.1中可以看出，以A375，FEK4，OSC-19和SCC-15的cDNA为底到的HO-1基因867bp的条带，但同时发现以A375，OSC-19和SCC-15为底物扩增的基因片段存在400bp大小的条带，我们对该条带进行测序后条带为37....

图2.3.HO-1不同外显子区域PCR扩增结果

重庆大学硕士学位论文2新型可变剪接体14kDaHO-1的发现及鉴定修饰后导致HO-1编码的蛋白质失去了与Heme绑定的结构域。推测14kDaHO-1具有独立于HO-1酶活性的生物学功能。2.4.3HO-1不同外显子区域基因PCR分析为进一步从m....

图2.4.Westernblotting检测HO-1的表达

图2.4.Westernblotting检测HO-1的表达Fig2.4.DetectionofHO-1proteinbyWesternblotting从图2.4中可以看出，在A375，OSC-19和SCC-15细胞中均可检测到14kDaHO-....

本文编号：3997397