ID-1、Survivin和Caspase-3在ALA-光动力诱导皮肤鳞状细胞癌A431细胞增殖、凋亡中的作用

发布时间：2017-06-07 23:03

  本文关键词：ID-1、Survivin和Caspase-3在ALA-光动力诱导皮肤鳞状细胞癌A431细胞增殖、凋亡中的作用，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：皮肤鳞状细胞癌(squamous cell carcinoma, SCC),是起源于表皮附属器角质形成细胞的一种恶性肿瘤,具有病因复杂、临床误诊率高、恶性度大及侵袭性和破坏性强等特点。目前皮肤鳞癌的治疗方法有手术切除、放射治疗、外用药物治疗及光动力治疗等。光动力疗法(Photodynamic therapy, PDT)又被称为光辐射疗法(Photoratiation Therapy, PRT)或光化学疗法(Photochemotherapy),是一种正在研究发展中的,治疗某些体表良、恶性病变的有效方法,部分成果已经应用于临床。近年来,5-ALA (5-aminolevulinic acid,5-氨基酮戊酸)介导的光动力疗法(5-ALA-PDT)成功应用于非黑素性皮肤癌的治疗,但其作用机制还有待于研究阐明。 目的： 1.检测ID-1、Survivin和Caspase-3蛋白和mRNA在人皮肤鳞状细胞癌A431细胞中的表达,探讨其临床意义； 2.观察5-ALA-PDT对人皮肤鳞状细胞癌A431细胞的杀伤灭活作用； 3.观察5-ALA-PDT后人皮肤鳞状细胞癌A431细胞中ID-1、Survivin和Caspase-3蛋白表达水平的变化,探讨5-ALA-PDT诱导人皮肤鳞状细胞癌A431细胞增殖、凋亡的可能机制,为光动力治疗皮肤鳞状细胞癌提供理论依据。 方法： 1、采用Western Blot法和RT-PCR法检测ID-1、Survivin和Caspase-3在人皮肤鳞状细胞癌A431细胞和角质形成细胞(Hacat细胞)中的表达水平； 2、A431细胞与5-ALA共同培育,经630nm激光照射后,采用MTT法测其细胞抑制率,探讨培育时间、5-ALA浓度及光照剂量对其介导的光动力效应的影响； 3、A431细胞经5-ALA-PDT处理后,分别于0h、2h、6h、12h、24h、48h后提取蛋白,采用Western Blot法检测ID-1、Survivin和Caspase-3蛋白的变化。 结果： 1、ID-1和Survivin蛋白和mRNA在人皮肤鳞状细胞癌A431细胞中高表达,而在Hacat细胞中低表达或不表达,其表达强弱差异有统计学意义(P0.05)；而Caspase-3蛋白和mRNA的表达与之相反,其表达差异也有统计学意义(P0.05)； 2、光照剂量和5-ALA浓度相同时,5-ALA与A431细胞共同培养120min时,其介导PDT的杀伤作用最强； 3、光照剂量和培养时间相同时,5-ALA浓度为3.2mmol/L时,其介导PDT的杀伤作用达到了饱和； 4、培养时间和5-ALA浓度相同时,光照剂量为80J/cm2时,其对A431细胞的抑制率达到最大； 5、单独照光及单独加药对A431细胞并无杀伤或促进其生长的作用； 6、ID-1和Survivin在5-ALA-PDT处理后的A431细胞中蛋白表达水平随时间延长呈下降趋势,其差异具有统计学意义(P0.05)； 7、Caspase-3在5-ALA-PDT处理后的A431细胞中蛋白表达水平随时间延长呈上升趋势,其差异具有统计学意义(P0.05)。 结论： 1、高表达的ID-1和Survivin,低表达的Caspase-3可能参与皮肤鳞癌的形成； 2、5-ALA-PDT对人皮肤鳞状细胞癌A431细胞有明显的杀伤效应； 3、5-ALA-PDT诱导人皮肤鳞状细胞癌A431细胞增殖或凋亡的机制,可能与 5-ALA-PDT直接或间接抑制ID-1和Survivin的表达、促进Caspase-3的表达有关。
【关键词】：光动力疗法 人皮肤鳞癌A431细胞 ID-1 Survivin Caspase-3
【学位授予单位】：山东大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R739.5
【目录】：

• 中文摘要6-8
• 英文摘要8-10
• 符号说明10-12
• 前言12-15
• 实验材料与方法15-25
• 结果25-27
• 讨论27-37
• 结论37-38
• 附图38-44
• 参考文献44-51
• 综述51-57
• 参考文献55-57
• 攻读硕士学位期间发表的论文57-58
• 附录58-60
• 致谢60-61
• 学位论文评阅及答辩情况表61

【参考文献】

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本文编号：430552