青蒿素对实验性自身免疫性重症肌无力的免疫调节
本文关键词:青蒿素对实验性自身免疫性重症肌无力的免疫调节
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【摘要】:目的:探讨青蒿素对实验性自身免疫性重症肌无力是否有防治作用及其免疫调节机制。方法:用含有人工合成的大鼠来源的乙酰胆碱受体(acetylcholine receptor,ACh R)α亚基97-116肽段的抗原乳液分别于实验周期第0天、第11天对健康雌性Lewis大鼠的足垫部、背部进行免疫建立实验性自身免疫性重症肌无力(experimental autoimmune myasthenia gravis,EAMG)模型,于免疫后第6天随机分为青蒿素低剂量组(40mg/kg),青蒿素中剂量组(60mg/kg)、青蒿素高剂量组(80mg/kg)及对照组(橄榄油)给予灌胃治疗36天,然后采用流式细胞术检测淋巴结单个核细胞(lymph node mononuclear cells,LMNC)悬液中CD4+CD25+Foxp3+T细胞(Treg)百分比及Treg细胞表面CTLA-4的表达及单个核细胞培养上清中TNF-α、IL-10及IL-17的表达;酶联免疫吸附法(ELISA)检测细胞培养上清中TGF-β1的表达及大鼠血清中抗R97-116 Ig G/Ig G1/Ig G2a/Ig G2b抗体水平.结果:中、高剂量组青组蒿素能改善EAMG临床症状;中剂量组青蒿素能提高CD4+CD25+Foxp3+T细胞及IL-10、TGF-β1表达;各剂量组青蒿素均能降低TNF-α的表达,且中剂量降低显著;低、中组剂量青蒿素能降低IL-17的表达,两组之间无明显差异;青蒿素对Treg细胞表面CTLA-4及R97-116抗体水平的表达无明显影响。结论:青蒿素对EAMG具有免疫调节作用,其发挥作用的机制可能是通过提高诱导性(或者适应性)调节T细胞(i Treg)表达,继而上调抑制性细胞因子IL-10、TGF-β1的表达及调节Th1/Th2/Th17/Treg细胞因子网络平衡来改善其临床症状。
【关键词】:青蒿素 实验性自身免疫性重症肌无力 免疫调节
【学位授予单位】:山东中医药大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2016
【分类号】:R746.1
【目录】:
- 提要3-4
- Abstract4-8
- 引言8-10
- 材料与方法10-24
- 1 实验材料10-12
- 1.1 实验动物10
- 1.2 实验试剂10-11
- 1.3 实验仪器与耗材11-12
- 1.4 主要试剂的配置12
- 2 实验方法12-17
- 2.1 EAMG模型的建立与临床评分12-13
- 2.2 青蒿素治疗EAMG13
- 2.3 制备淋巴结单个核细胞悬液13
- 2.4 流式细胞术检测CD4+CD25+Foxp3+ T细胞(Treg)表达13-14
- 2.5 流式检测Treg细胞表面CTLA-4 表达14
- 2.6 流式检测单个核细胞培养上清中Th1/Th2/Th17细胞因子表达14-15
- 2.7 ELISA检测TGF-β1 的表达15-16
- 2.8 ELISA法检测EAMG大鼠血清中抗R97-116 IgG/ IgG1/ IgG2a/ IgG2b抗体水平16-17
- 2.9 数据处理与统计学分析17
- 3 实验结果17-24
- 3.1 青蒿素可改善EAMG大鼠的临床症状17-18
- 3.2 青蒿素能上调CD4+CD25+Foxp3+ T细胞百分比及其抑制性因子TGF-β1、IL-10的表达18-21
- 3.3 青蒿素能降低TNF-α 的表达21
- 3.4 青蒿素能降低IL-17的表达21-22
- 3.5 青蒿素对Treg细胞表面CTLA-4 表达的影响22-23
- 3.6 青蒿素对血清中抗R97-116 IgG/ IgG1/ IgG2a/ IgG2b抗体水平的影响23-24
- 讨论24-31
- 1 重症肌无力的发病机制及目前治疗24-28
- 2 重症肌无力与中医痿证28-29
- 2.1 重症肌无力与中医痿证的联系28-29
- 2.2 痿证的病因病机及治疗29
- 3 青蒿素的抗炎、免疫抑制作用29-30
- 4 青蒿素对EAMG的影响30-31
- 结语31-32
- 参考文献32-37
- 综述37-43
- 参考文献40-43
- 附录43
- 符号说明43-44
- 致谢44-45
- 发表论文45-48
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