禁食改善小鼠内皮祖细胞介导的缺血性血管新生研究

发布时间：2018-01-21 04:55

  本文关键词： 禁食 内皮祖细胞 细胞治疗 血管新生　出处：《第二军医大学》2017年硕士论文　论文类型：学位论文

【摘要】：研究目的:脑卒中是全球性重大疾病,是致死和致残的主要原因之一;由于脑卒中会导致机体功能性的损伤,给患者及其家庭和社会带来巨大的经济消耗。缺血性脑卒中是由大脑动脉的栓塞或血栓栓塞导致,从而导致脑部的血流量减少,进而又会导致脑部的缺血损伤。缺血性脑卒中患者的大脑缺血损伤部位病理学上可分为两部分:一部分是不可逆的梗死脑组织区域,另一部分是处于缺血状态但未完全梗死的区域,称为半影区。所有缺血脑卒中治疗的目的都是为了恢复半影区的血流量,通过半影区血液再灌注,抑制缺血进展,减少最终核心梗死区域面积的大小。内皮祖细胞是来源于骨髓的干细胞,在生理或病理因素刺激下,它们可以被招募至缺血损伤部位,促进内皮的再生和新生血管的形成。近年来,干细胞方面的研究提示,细胞治疗有望成为疾病治疗的一种有效手段;而内皮祖细胞移植治疗可能为缺血性脑卒中患者提供新的治疗方案。对于缺血性脑卒中的治疗,除了必要的医疗手段,饮食等生活习惯的干涉也至关重要。最新研究表明,一定程度的禁食可能会产生一系列生理益处。禁食属于热量限制的一种,其方式有间歇性禁食、长时间禁食等。长时间禁食为持续两天及以上的禁食,文献报道可以有效保护正常细胞及器官,帮助对抗各种毒素和毒性环境。我们前期研究发现,长时间禁食(禁食两天)可以改善小鼠的脑缺血损伤,本课题旨在进一步研究禁食改善小鼠脑部缺血损伤的机制,研究其是否是通过加强内皮祖细胞介导的血管新生实现的。研究内容及结果:1.禁食(两天)可显著改善缺血性脑卒中小鼠的内皮祖细胞功能为了检测禁食是否能够促进缺血性脑卒中小鼠中内皮祖细胞的功能,我们用电凝法凝断小鼠左侧大脑中动脉,制作小鼠缺血性脑卒中模型;模型成功后随机将小鼠分成两组,一组为禁食组,一组为任意饮食组;经过处理后,提取两组小鼠骨髓来源的内皮祖细胞,测试内皮祖细胞的功能;并且测试内皮祖细胞的中的NO和O2-的水平。结果发现,相比于任意饮食组缺血性脑卒中小鼠的内皮祖细胞,禁食组缺血性脑卒中小鼠的内皮祖细胞的迁移、粘附、小管形成功能均显著改善,禁食组缺血性脑卒中小鼠内皮祖细胞中的NO水平显著提高,O2-水平显著降低。2.禁食(两天)可显著加强内皮祖细胞移植对缺血性脑卒中小鼠的治疗作用为了检测功能加强的内皮祖细胞能否改善缺血性脑卒中小鼠的脑部缺血损伤,提取来源于禁食组和任意饮食组小鼠骨髓来源的内皮祖细胞,重新制作一批缺血性脑卒中小鼠模型,将禁食组来源的和任意饮食组来源的内皮祖细胞,通过尾静脉注射移入缺血性脑卒中模型小鼠中,检测内皮祖细胞移植后缺血性脑卒中小鼠第一天和第三天神经行为学变化,以及内皮祖细胞移植后第三天缺血性脑卒中小鼠脑梗体积的大小。内皮祖细胞移植后第三天检测脑梗体积发现,内皮祖细胞可以显著降低缺血性脑卒中小鼠的脑梗面积,改善缺血性脑卒中小鼠内皮祖细胞移植后第一天与第三天的神经行为学功能,并且禁食组小鼠的内皮祖细胞比任意饮食组小鼠的内皮祖细胞有更强的作用。3.禁食(两天)可以增强内皮祖细胞对缺血性脑卒中小鼠脑损伤部位血管新生的促进作用为了检测移植的内皮祖细胞能否归巢于脑部缺血损伤部位,我们提取来源于禁食组和任意饮食组小鼠骨髓来源的epcs,并通过免疫组化荧光双标实验,用brdu对内皮祖细胞进行标记,对植入缺血性脑卒中小鼠的内皮祖细胞进行示踪,并且检测缺血性脑卒中小鼠在内皮祖细胞移植治疗后的第三天的血管新生情况。结果显示,在缺血性脑卒中小鼠脑部缺血部位发现被brdu标记的内皮祖细胞,并且禁食组来源的标记的内皮祖细胞数目比任意饮食组来源的内皮祖细胞多;brdu标记的内皮祖细胞与cd31标记的新生血管共处;内皮祖细胞移植治疗三天后发现,禁食组来源的内皮祖细胞治疗后的脑部缺血区域新生血管的数量比任意饮食组的增多,并且有显著差异。4.禁食(两天)可以增强内皮祖细胞条件培养基对缺血性脑卒中小鼠的治疗作用内分泌细胞分泌的因子进入组织液,弥散至邻近的靶细胞,调节其机能,此方式称旁分泌。内皮祖细胞的条件培养基是指包含内皮祖细胞旁分泌因子的培养基,在以往的研究中通常用细胞的条件培养基作为工具研究细胞的旁分泌作用。为了检测内皮祖细胞的旁分泌对缺血性脑卒中小鼠缺血损伤的作用,提取禁食组和任意饮食组小鼠的内皮祖细胞,分别收集内皮祖细胞的条件培养基。将禁食组以及任意饮食组的内皮祖细胞的条件培养基通过尾静脉注射入缺血性脑卒中小鼠中。检测注射一天后,缺血性脑卒中小鼠脑梗体积的大小以及神经行为学变化。内皮祖细胞条件培养基治疗可以显著减轻小鼠的脑缺血损伤,禁食组来源的内皮祖细胞的条件培养基比任意饮食组小鼠的内皮祖细胞的条件培养基对于缺血性脑卒中小鼠的治疗作用更为显著,脑梗体积显著减少,神经行为学功能改善更显著。结论:1.禁食(两天)可以显著改善缺血性脑卒中小鼠中内皮祖细胞的迁移、粘附、小管形成功能。2.禁食(两天)可以显著加强内皮祖细胞对于缺血性脑卒中小鼠脑部缺血损伤的治疗作用。3.禁食(两天)可以增强内皮祖细胞对缺血性脑卒中小鼠脑损伤部位血管新生的促进作用4.禁食(两天)可以显著增强内皮祖细胞条件培养基对于缺血性脑卒中小鼠的治疗作用。综上所述,禁食改善缺血性脑卒中小鼠的脑部缺血损伤可能部分与其增强内皮祖细胞介导的缺血性血管新生和加强内皮祖细胞的旁分泌功能有关。
[Abstract]:......
【学位授予单位】：第二军医大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R743.3

【相似文献】

相关期刊论文 前10条

1 刘连友,周湘忠,冯鉴洲;缺血性脑卒中诊断与治疗的若干进展[J];日本医学介绍;2000年02期

2 覃绍则,陆健,卢永彪;缺血性脑卒中302例分析[J];现代康复;2000年13期

3 宋彩虹;缺血性脑卒中的治疗体会[J];哈尔滨医药;2001年03期

4 王玉玲;老年人饮食、生活习惯与缺血性脑卒中[J];医学综述;2001年04期

5 谭清华,赵忠新,邵福源,李莉;缺血性脑卒中患者外周血淋巴细胞神经细胞黏附分子和激活诱导分子的表达[J];中华神经科杂志;2002年01期

6 王凤芹,刘翠梅;缺血性脑卒中病人的个性研究[J];护理研究;2002年07期

7 王德仙;缺血性脑卒中病人的康复指导[J];中国临床康复;2002年03期

8 罗春华,李国静,赵武,陈华蓉;198例缺血性脑卒中患者血脂和血糖测定及其临床意义[J];中国综合临床;2003年04期

9 陈义禄;老年人缺血性脑卒中35例诊治体会[J];临床中老年保健;2003年04期

10 陈小转,陈志祥;30例缺血性脑卒中的血液流变临床分析[J];实用心脑肺血管病杂志;2003年03期

相关会议论文 前10条

1 王健蓉;许毅;;缺血性脑卒中发病时间规律临床研究及对策[A];中华医学会第十三次全国神经病学学术会议论文汇编[C];2010年

2 肖艳;张晓莺;何瑛;李燕云;徐隽莹;;缺血性脑卒中复发的危险因素临床分析[A];中华医学会第十三次全国神经病学学术会议论文汇编[C];2010年

3 孟昭义;李琳;张国斌;;缺血性脑卒中病理[A];中华医学会第十三次全国神经病学学术会议论文汇编[C];2010年

4 申素玲;;健康教育对缺血性脑卒中预防再复发的影响[A];危重病人监测、急救技术与基础护理暨21世纪护理理念发展与资源开发学术交流会论文汇编[C];2001年

5 沈介明;熊立凡;;中国缺血性脑卒中患者的活化蛋白C抵抗现象[A];中华医学会第七次全国神经病学学术会议论文汇编[C];2004年

6 袁荣峰;谢春;;非瓣膜性心房颤动与缺血性脑卒中[A];中华医学会第七次全国神经病学学术会议论文汇编[C];2004年

7 李泽军;褚泰伟;刘新起;王祥云;;缺血性脑卒中示踪剂的设计、合成、与药理学研究[A];第七届全国核化学与放射化学学术讨论会论文摘要集[C];2005年

8 张子莲;;健康教育对缺血性脑卒中预防再复发的影响[A];全国第11届老年护理学术交流暨专题讲座会议论文汇编[C];2008年

9 白亮;;基层医院缺血性脑卒中治疗和康复中存在的问题[A];第十一届全国神经病学学术会议论文汇编[C];2008年

10 石娟;孔德磊;马跃文;王玮;;睡眠呼吸暂停综合征对缺血性脑卒中患者凝血指标的影响[A];中华医学会呼吸病学年会——2011（第十二次全国呼吸病学学术会议）论文汇编[C];2011年

相关重要报纸文章 前10条

1 叶新;防缺血性脑卒中复发[N];农村医药报（汉）;2007年

2 丁香;缺血性脑卒中后预防性应用抗生素有益[N];中国医药报;2007年

3 北京天坛医院副院长 王拥军 葛宗渔 整理;远离缺血性脑卒中要把“坏胆固醇”控制好[N];光明日报;2014年

4 卫讯;未来三年我国将完成100万人脑卒中筛查[N];中国医药报;2010年

5 杨声瑞 赵强;缺血性脑卒中病因有新发现[N];中国医药报;2002年

6 附二医脑科康复中心 王小同;缺血性脑卒中的防治进展[N];温州日报;2005年

7 杨声瑞;赵强;预警脑卒中发生研究有进展[N];中国医药报;2003年

8 本报记者 王文郁;缺血性脑卒中要对症治疗[N];中国消费者报;2008年

9 付东红;血压血脂异常是脑卒中发病危险因素[N];中国医药报;2007年

10 蓝天;脑卒中不等于脑出血[N];民族医药报;2009年

相关博士学位论文 前10条

1 刘建平;缺血性脑卒中易感基因与环境因素交互作用的分子流行病学研究[D];华中科技大学;2008年

2 童叶青;缺血性脑卒中相关炎症因子及候选基因多态性与环境暴露交互作用的分子流行病学研究[D];华中科技大学;2011年

3 毛蕾蕾;调节性T细胞输注移植对缺血性脑卒中tPA溶栓后出血转换的治疗作用及其机制探讨[D];复旦大学;2014年

4 彭洁;特殊人群高血压的治疗及预后研究[D];山东大学;2015年

5 张振昶;缺血性脑卒中相关易感基因及蛋白质组学研究[D];兰州大学;2015年

6 韩新生;急性缺血性脑卒中患者Cathepsin S/Cystatin C水平与动脉斑块性质及短期预后关系的研究[D];郑州大学;2014年

7 柏盈盈;内皮祖细胞和p38 MAPK抑制剂联合治疗糖尿病小鼠缺血性脑卒中及其影像学评价[D];东南大学;2015年

8 金鑫;胆碱对缺血性脑血管新生的影响及其药理学机制研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2016年

9 孟冲;关于CYP4F2基因rs2108622位点多态性不同遗传模式下与缺血性脑卒中关系的meta分析[D];山东大学;2016年

10 朱晓岩;miRNAs、MTHFR基因多态性与中国汉族人群缺血性脑卒中的关联研究[D];青岛大学;2016年

相关硕士学位论文 前10条

1 王新民;青年缺血性脑卒中相关因素分析[D];大连医科大学;2007年

2 余德标;“扶正补土”针灸法结合康复训练对缺血性脑卒中后平衡功能的影响研究[D];福建中医药大学;2015年

3 黄冰;基于干细胞的新型靶向复合生物基因载体的构建与其对缺血性脑卒中的治疗研究[D];浙江大学;2015年

4 郭泽铭;血清尿酸水平与缺血性脑卒中TOAST分型的关系研究[D];福建医科大学;2015年

5 马亚新;Lokomat机器人对缺血性脑卒中患者下肢功能的影响[D];河北联合大学;2014年

6 廖少钦;电针促进缺血性脑卒中上肢功能恢复的DTI评价[D];福建中医药大学;2015年

7 刘丽娟;多模式MRI指导缺血性脑卒中超急性期静脉溶栓治疗的研究[D];河北医科大学;2015年

8 支晓东;支架预防颅内动脉粥样硬化性缺血性脑卒中再发的长期随访研究及危险因素分析[D];兰州大学;2015年

9 陈丽霞;载脂蛋白E基因多态性与缺血性脑卒中关联研究[D];兰州大学;2015年

10 范玉佳;5-脂氧合酶激活蛋白基因启动子区SNPs与缺血性脑卒中的关联研究及初步功能鉴定[D];郑州大学;2015年

，

本文编号：1450532