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NT-3基因修饰的MSCs脑内移植对颞叶癫痫大鼠作用的研究

发布时间:2018-02-15 07:59

  本文关键词: 神经营养素- 间充质干细胞 颞叶癫痫 慢病毒载体 出处:《华中科技大学学报(医学版)》2017年02期  论文类型:期刊论文


【摘要】:目的观察神经营养素-3(Neurotrophin 3,NT-3)基因修饰的间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)脑内移植对颞叶癫痫(temporal lobe epilepsy,TLE)的作用及其对大鼠海马苔藓纤维发芽(mossy fiber sprouting,MFS)的影响。方法将构建成功的LV-GFP-NT-3转染大鼠骨髓MSCs,检测转染后MSCs内NT-3的表达;建立海人酸(Kainic acid,KA)TLE大鼠模型;将NT-3基因修饰的MSCs移植至海人酸TLE大鼠侧脑室模型后,观察其对TLE大鼠行为学、脑电图的影响,并用Timm组织化学染色法观察海马结构MFS;Western blot检测细胞移植后大鼠海马组织中NT-3的表达。结果 LV-GFP-NT-3转染细胞后,MSCs中能够正确过表达NT-3;细胞移植后NT-3-MSCs组TLE大鼠的发作次数减少,发作级别减低;脑电图结果表明TLE发作痫波减少;NT-3-MSCs组大鼠海马CA3区内分子层及始层未见到或极少见到Timm染色颗粒,Timm染色颗粒较对照组和LV-MSCs组显著减少;Western blot检测结果显示NT-3-MSCs组大鼠海马组织中NT-3含量明显增高。结论 NT-3基因修饰的MSCs脑内移植对颞叶癫痫大鼠有明显的抑制作用。
[Abstract]:Objective to observe the effect of intracerebral transplantation of neurotrophin-3 neurotrophin 3 (NT-3) gene modified mesenchymal stem cells (MSCs) on temporal lobe epilepsyTLEs (TLEs) of temporal lobe epilepsy and its effect on mossy fiber sprouting MFSs in hippocampus of rats. The expression of NT-3 in transfected rat bone marrow (MSCs) was detected by using MSCs. The rat model of kainic acid kainic acidKa-Ka-TLE was established, and the effects of MSCs modified with NT-3 gene on the behavior and electroencephalogram of TLE rats were observed after transplanting MSCs into the lateral ventricle model of kainic acid TLE rats. Timm histochemical staining was used to detect the expression of NT-3 in rat hippocampal tissue after transplantation. Results the expression of NT-3 was correctly detected in LV-GFP-NT-3 transfected cells, and the attack times of TLE rats in NT-3-MSCs group were decreased after cell transplantation. Grade of attack reduced; The results of electroencephalogram showed that the molecular layer and initial layer of hippocampal CA3 in the NT-3-MSCs group were less than those in the control group and LV-MSCs group. The results showed that the Timm staining granules in the LV-MSCs group were less than those in the control group and LV-MSCs group. Conclusion Intra-brain transplantation of MSCs modified by NT-3 gene has a significant inhibitory effect on temporal lobe epilepsy rats.
【作者单位】: 广州医科大学基础学院生理学教研室;湖南医药学院病理学教研室;广州医科大学第二临床学院;广州医科大学附属第五医院皮肤美容科;
【基金】:广东省省级科技计划项目(No.2014A020212512,No.2013B021800191) 广州市属高校科研计划项目(No.2012C128,No.2012D001) 2017年大学生科技创新培育专项资金资助项目(No.pdjh2017b0417)
【分类号】:R742.1

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