GBS与C.jejuni感染相关性的系统评价和GBS患者C.jejuni的分离及基因分型

发布时间：2018-02-23 23:01

本文关键词： 吉兰-巴雷综合征空肠弯曲菌细菌分离血清抗体 Meta分析吉兰-巴雷综合征空肠弯曲菌分离基因分型吉兰-巴雷综合征空肠弯曲菌多位点序列分型　出处：《河北医科大学》2014年硕士论文　论文类型：学位论文

【摘要】：第一部分GBS与C.jejuni感染相关性的系统评价及Meta分析目的：评价GBS与C.jejuni感染相关性。方法：电子检索Pubmed(1966-2013.11)数据库，辅以手工检索，提取C.jejuni感染后GBS发病率、GBS患者C.jejuni分离率、GBS患者血清抗C.jejuni抗体阳性率数据，使用R软件合并率，并对相关因素进行meta回归，查找异质性的原因。结果：最终纳入25篇文献，其中目的结果为C.jejuni感染后GBS发病率的文献共2篇，2个研究均显示C.jejuni感染后GBS发病率明显升高。目的结果为GBS患者C.jejuni分离率的文献共13篇，各个研究间的异质性较大（Qdf=55.77, P0.001，I2=78.5%），采用随机效应模型，合并分离率为10.24%，(95%CI:6.7%,15.4%）。对“纳入人群的平均年龄”“所属国家（发达/发展中国家）”“研究时间”“是否进行增菌培养”“是否使用多种方法培养”“是否多样本培养”六个方面进行meta回归分析，结果显示“纳入人群平均年龄”和“研究时间”是分离率异质性产生的主要因素（P0.05），并显示分离率随着年龄的增加而下降，研究时间的推移而下降。目的结果为GBS患者血清抗C.jejuni抗体阳性率的文献共16篇，各个研究GBS患者血清抗C.jejuni抗体阳性率范围从17.24%到81.25%(中位数为36.97%)，而对照组血清抗C.jejuni抗体阳性率范围从0到58.33%（中位数为7.83%）。Meta分析合并率差“RD”为33.64%，(95%CI:23.33%,43.94%），各个研究间的异质性较大（Qdf=135.1, P0.001，I2=91.34%），对“纳入人群的平均年龄”“国家（发达/发展中国家）”“研究时间”“抗体选用”“对照组的差别”五个方面单因素回归分析结果显示都不为异质性的原因（P0.05）。结论： 1C.jejuni感染后GBS发病率明显升高； 2GBS患者C.jejuni合并分离率10.24%，随着患者年龄的增加分离率下降，研究时间的推移而下降。 3GBS患者血清抗C.jejuni抗体阳性率为17.24-81.25%(中位数为36.97%），对照组血清抗C.jejuni抗体阳性率为0-58.33%(中位数为7.83%），，Meta分析合并率差“RD”为33.64%。 4此次研究纳入的文献数量较少，异质性较大，期待各国实验室加强交流合作，大样本多中心的研究结果更新我们的数据和结论。第二部分GBS患者C.jejuni的分离及基因分型目的:对GBS患者粪便进行连续多次的C.jejuni分离并对分离菌株进行基因分型。方法:通过选择性血平板分离空肠弯曲菌，并对分离菌株进行马尿酸盐水解试验、VITEK生化鉴定以及16S、hipO多重PCR分子鉴定，并对鉴定的空肠弯曲菌进行随机扩增多态性分型（random amplifiedpolymorphic DNA,RAPD）、多位点序列分型（multilocus sequence typing,MLST）。结果:23例GBS患者中1例患者分离出空肠弯曲菌，从此患者先后分离得到5株空肠弯曲菌菌株，RAPD分子分型可分为3型，MLST分型全为ST508。结论: 1GBS患者可同时感染多种RAPD基因分型的C.jejuni菌株。 2从GBS患者分离出的C.jejuni菌株不一定是致GBS菌株，需经动物实验进一步证明。第三部分GBS患者C.jejuni的多位点序列分型研究目的：运用多位点序列分型（MLST）技术对我国华北地区8株GBS患者空肠弯曲菌（C.jejuni）临床分离株进行基因分型研究；通过MLST数据库探讨GBS患者的C.jejuni、我国C.jejuni的遗传特征。方法：将待测菌株提取DNA，并进行多重PCR鉴定。使用特异性引物PCR扩增7个管家基因，交予生物公司测序，将测序结果使用软件进行编辑和校正后，提交到MLST数据库获得每个管家基因的编号和其对应的ST型。使用eBURST软件、START2软件和splitstree4.0软件对此次研究的8株菌和来自MLST数据库的GBS患者C.jejuni和我国C.jejuni进行eBURST和UPGMA聚类分析以及split decomposition系统发生网络拆分网络分析。结果：此次研究的8株GBS患者C.jejuni MLST基因型别分别是ST51、ST45、ST3907、ST22、ST2240、ST22、ST22，没有发现新型别。MLST数据库中共GBS患者C.jejuni45株，共34个ST型，14个ST序列群,其中ST22complex基因型占28.89%（13/45），构建了系统发育树和拆分网络图。MLST数据库中共151株我国C.jejuni，共141个ST型，23个ST序列群，最多的ST型为ST353complex（8%），构建了系统发育树和拆分网络图。结论：GBS患者C.jejuni与ST22complex基因型可能相关。
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【学位授予单位】：河北医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R745

【参考文献】