腺苷预处理对脑缺血再灌注损伤大鼠HIF-1α、VEGF、EPO表达的影响

发布时间：2018-02-28 12:27

  本文关键词： 脑缺血再灌注 腺苷 HIF-1α VEGF EPO　出处：《新乡医学院》2014年硕士论文　论文类型：学位论文

【摘要】：背景 缺血性脑病严重威胁着人类的健康,它以高发病率、高致残率、高死亡率为特点,给患者、家庭、社会带来了痛苦和负担。所以缺血性脑病一致备受医学界关注。在缺血性脑血管病中,大脑中动脉(MCA)供血区的发病率占到了60%。由于大鼠具有低成本、纯合性好、脑血管解剖结构及功能与人类的相似,一直成为学者们制作最接近人类脑梗死的动物模型的理想实验动物。 目的 通过对缺血再灌注大鼠进行腺苷预处理,观察损伤脑组织的病理结构改变,梗死体积变化和HIF-1α、VEGF、EPO在海马区的表达情况,从而探讨腺苷预处理对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤神经保护作用的具体机制。 方法 1、脑缺血再灌注模型的建立健康雄性SD大鼠120只,体重在230-280g,随机分为假手术组(F组)、腺苷预处理假手术组(AF组)、缺血再灌注组(IR组)、腺苷预处理缺血再灌注组(AR组),根据再灌注时间的不同又随机分为6h、12h、24h三个亚组。用线栓法制备大鼠大脑中动脉闭塞(middle cerebral artery occlusion, MCAO)模型。假手术组及腺苷预处理假手术组除不用线栓外,余同手术组。术后术后每组取24只进行观察,观察不同时间点大鼠右侧Homer征和左侧肢体瘫痪体征来判断模型是否成功。 2、各组大鼠在不同再灌注时间点的神经功能缺失行为学评分。 3、通过TTC染色检测大鼠局灶性脑缺血再灌注梗死体积的大小。 4、通过HE染色观察大鼠局灶性脑缺血再灌注海马神经细胞的形态学改变。 5、通过免疫组织化学检测各组不同再灌注时间点大鼠海马区HIF-1α、VEGF、EPO的表达变化情况。 结果 1、神经缺失症状和功能评分：F、AF组大鼠均无神经功能缺失症状,评分为0分。IR、AR组大鼠均出现不同程度神经功能缺失症状,对比得出,AR组大鼠不同再灌注时间点神经功能缺失评分较IR组低,差异具有统计学意义(P0.05)。 2、TTC染色：F、AF组大鼠双侧大脑半球未见明显梗死灶,呈均匀红色。IR、AR组右侧大脑半球可见苍白色的梗死区域,主要位于额顶叶皮质和纹状体。AR组较IR组脑梗死体积明显减少,差异具有显著意义(P0.05)。 3、HE染色：F、AF组大鼠海马区细胞排列紧密、规则、整齐,细胞轮廓清楚,胞体饱满,核居中,核仁清晰,未见死亡神经元,无异常的形态学改变；缺血再灌注6h海马区锥体细胞层轻度水肿,部分细胞出现了核固缩、浓染现象；再灌注12h、24h,细胞损伤情况有所减轻。AR组较IR组在相同缺血再灌注时间点的大鼠脑组织病理改变有明显改善,12h后改善客观。 4、HIF-1α免疫组织化学染色：免疫组织化学染色后,结果表明F、AF组大鼠海马区HIF-1α阳性表达少见,IR组大鼠脑缺血再灌注6h、12h、24h时,HIF-1α的阳性表达细胞升高,在12h达到高峰,随着时间延长逐渐下降；AR组在不同脑缺血再灌注时间点HIF-1α表达较IR组明显升高(P0.05)。 5、VEGF免疫组织化学染色：VEGF在F、AF组大鼠脑组织海马区表达微弱,IR组大鼠脑组织海马区VEGF表达明显增加,12h达到高峰,AR组在不同脑缺血再灌注时间点表达较IR组明显升高(P0.05)。 6、EPO免疫组织化学染色：EPO阳性细胞在F、AF组海马区中少见,1R、AR组在不同再灌注时间点EPO受HIF-la的表达作用影响,海马区阳性细胞表达明显增加,12h达到高峰,之后逐渐降低；AR组与IR组在相同再灌注时间点阳性细胞表达比较明显增高(P0.05)。 结论 1、腺苷预处理显著减轻大鼠局灶性脑缺血再灌注脑组织的损伤,并且能有效的改善再灌注引起的神经功能损伤症状。 2、腺苷预处理可以增加再灌注脑组织海马区HIF-1α、VEGF、EPO阳性细胞的表达。
[Abstract]:Background Ischemic brain disease is a serious threat to human health . It is characterized by high morbidity , high disability rate and high mortality rate , which brings pain and burden to patients , families and society . In ischemic cerebrovascular disease , the incidence of cerebral middle cerebral artery ( MCA ) supply region accounts for 60 % . Purpose The expression of HIF - 1伪 , VEGF and EPO in hippocampus was observed by adenosine preconditioning in ischemia - reperfusion rats , and the specific mechanism of adenosine preconditioning on the protective effects of adenosine preconditioning on focal cerebral ischemia - reperfusion injury in rats was investigated . method The rats were randomly divided into three subgroups : sham operation group ( group F ) , adenosine preconditioning sham operation group ( AF group ) , ischemia / reperfusion group ( IR group ) and adenosine preconditioning ischemia / reperfusion group ( AR group ) . 2 . The neurological deficit behavior score of each group of rats at different reperfusion time points . 3 . The size of infarct volume in focal cerebral ischemia / reperfusion was measured by TTC staining . 4 . The morphological changes of neurons in hippocampus after focal cerebral ischemia / reperfusion in rats were observed by HE staining . 5 . The expression of HIF - 1伪 , VEGF and EPO in hippocampus of rats with different reperfusion time points was detected by immunohistochemistry . Results 1 . There were no neurological deficit symptoms in F and AF group , and the score was 0 . IR and AR group showed different degree of neurological deficit symptoms , and the difference was statistically significant ( P0.05 ) . 2 銆，

本文编号：1547309