去乙酰化酶Sirt1对神经母细胞瘤SK-N-SN细胞中Tau蛋白表达及磷酸化水平的影响

发布时间：2018-03-21 09:39

  本文选题：组蛋白去乙酰化酶Sirt　切入点：神经母细胞瘤细胞SK-N-SN　出处：《西安交通大学学报(医学版)》2017年03期 　论文类型：期刊论文

【摘要】：目的观察Sirt1对神经母细胞瘤SK-N-SH细胞系中Tau蛋白磷酸化的影响。方法在体外培养的SK-N-SH细胞中加入腺病毒过表达的Sirt1和SirtM(Sirt mutant),利用Western blot检测细胞中Sirt1和SirtM的表达,并通过Western blot、Real-time PCR、免疫细胞化学技术检测t-Tau蛋白以及p-Tau蛋白的表达,流式细胞术(FCM)检测Sirt1对SK-N-SH细胞凋亡的影响。结果 Western blot结果显示,Sirt1组及SirtM组相比于对照组t-Tau蛋白的水平降低,Sirt1组较SirtM组相比降低较为显著;Tau蛋白的磷酸化位点ser404、thr231更为明显;Real-time PCR结果显示,Sirt1组相比于对照组Tau的mRNA水平下降;免疫细胞化学结果显示,Sirt1可以降低Tau蛋白及其磷酸化的水平;流式细胞术检测提示Sirt1组较对照组降低了SK-N-SH细胞的凋亡。结论Sirt1能够降低神经母细胞瘤SK-N-SH中Tau蛋白的表达及磷酸化、减少细胞的凋亡;本研究为Tau蛋白病等神经退行性疾病的研究提供了重要的实验依据。
[Abstract]:Objective to observe the effect of Sirt1 on the phosphorylation of Tau protein in SK-N-SH cell line of neuroblastoma. Methods Adenovirus-overexpression Sirt1 and SirtM(Sirt mutant were added to SK-N-SH cells in vitro. The expression of Sirt1 and SirtM was detected by Western blot. The expression of t-Tau protein and p-Tau protein were detected by Western blotReal-time PCR and immunocytochemistry. Results the effect of Sirt1 on apoptosis of SK-N-SH cells was detected by flow cytometry. Results the results of Western blot showed that the level of t-Tau protein in Western blot group and SirtM group was lower than that in control group. The phosphorylation site ser404ht231 of tt1 group was significantly lower than that of SirtM group. The results of real-time PCR showed that the mRNA level of Tau in Sirt1 group was lower than that in control group. The results of immunocytochemistry showed that Tau protein and phosphorylation could be reduced by sirt1. Flow cytometry showed that the apoptosis of SK-N-SH cells in Sirt1 group was lower than that in control group. Conclusion Sirt1 can reduce the expression and phosphorylation of Tau protein and apoptosis in SK-N-SH of neuroblastoma. This study provides an important experimental basis for the study of neurodegenerative diseases such as Tau's disease.
【作者单位】： 西安交通大学第一附属医院病理科;西安交通大学医学部基础医学院;
【基金】：陕西省国际科技合作与交流计划项目(No.2015KW-037、No.2014KW21-01)~~
【分类号】：R741

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本文编号：1643292