GSK3β、STAT6在缺血后适应对灵长类动物缺血再灌注模型的保护机制研究

发布时间：2018-04-10 00:11

本文选题：缺血后适应　切入点：再灌注损伤　出处：《昆明医科大学》2017年硕士论文

【摘要】：[目的]本实验通过血管介入微导管栓塞法制作灵长类动物脑缺血再灌注(Ischemia/reperfusion,IR)及脑缺血后适应(Ischemic postconditioning,IP)模型,研究在灵长类动物中IP对IR的神经保护作用,以检测caspase-3、bcl-2、GSK3β、STAT6在脑组织中的表达探讨在灵长类动物中IP对IR的保护机制。[方法]实验主要分为三个步骤,第一:采用血管介入微导管栓塞方法建立食蟹猴右侧大脑中动脉栓塞-脑梗死缺血再灌注模型,采用高压注射器快速、间断、反复向食蟹猴脑缺血再灌注模型右侧大脑中动脉泵入自体动脉血以建立缺血后适应,使用灵长类动物脑功能损害模型行为评价量表对术后的食蟹猴进行神经功能评分,采用HE染色评估脑梗死区域面积大小变化,并分析组织学形态变化,第二:Western Bolt检测脑组织内caspase-3、bcl-2的表达,QPCR检测脑组织内caspase-3mRNA、bcl-2mRNA的表达,研究caspase-3、bcl-2参与缺血后适应对灵长类动物脑缺血再灌注损伤的保护机制,第三:免疫组织化学检测GSK3β、STAT6的表达,研究GSK3β、STAT6在缺血后适应对灵长类动物脑缺血再灌注损伤的保护机制的参与情况,使用SPSS24.0软件处理数据。[结果]成功建立模型13例,成功模型中IP组6只,IR组6只,假手术组1只,在新鲜取材中取其中一只IP组的左侧大脑为normal组。1.IP组及IR组的神经功能评分均高于假手术组,IP组神经功能评分低于IR组(P0.05,差异具有统计学意义);2.HE染色示:IP组及IR组于大脑中动脉供血区域出现不同程度脑梗塞病灶,假手术组未发现脑梗塞病灶,其中IR组梗死体积大于IP组(P0.05,差异具有统计学意义);3.免疫组化酶标染色GSK3β与STAT6示:IP组及IR组的GSK3β与STAT6阳性细胞计数均小于假手术组,其中IP组GSK3β、STAT6的阳性细胞计数大于IR组;4.Western bolt检测caspase-3和bcl-2示:脑组织内caspase-3的表达IR组最高,IP组其次,normal组最低(P0.05,差异具有统计学意义),脑组织内bcl-2的表达normal组最高,IP组其次,IR组最低(P0.05,差异具有统计学意义)。5.QPCR检测caspase-3mRNA、bcl-2mRNA:脑组织内caspase-3mRNA的表达IR组最高,IP组其次,normal组最低(P0.05,差异具有统计学意义),脑组织内bcl-2mRNA的表达normal组最高,IP组其次,IR组最低(P0.05,差异具有统计学意义)。[结论]1.通过血管介入微导管栓塞法可以成功制作灵长类动物IP及IR模型,并通过核磁共振即时证实,且成功率高,模型质量稳定。2.IP对灵长类IR模型有神经保护作用,减少了 IR的梗死面积,并改善梗死后24小时的神经功能评分。3.通过HE染色,在灵长类动物中,发现IP能减轻病灶区域神经组织坏死、水肿程度。4.在灵长类动物中,IP对IR可通过下调Caspase-3的表达和上调Bcl-2的表达发挥神经保护。5.在灵长类动物中,GSK3β与STAT6参与了 IP对IR的神经保护。
[Abstract]:Objective To study the protective mechanism of IP on IR in primates by vascular interventional microcatheter embolization . The protective mechanism of IP on IR in primates was studied . The expression of caspase - 3 , bcl - 2 , GSK3 尾 and STAT6 in brain tissue was assessed by HE staining . The expression of caspase - 3 mRNA , bcl - 2 mRNA and caspase - 3 mRNA in brain tissue were higher than those in sham operation group ( P0.05 ) . Conclusion : 1 . The IP and IR models of primates can be successfully produced by vascular interventional microcatheter embolization . The results show that IP has neuroprotection effect on primate IR model , reduces the infarct size of IR , and improves the neurological function score of 24 hours after infarction . In primates , IP has neuroprotection by downregulating the expression of Caspase - 3 and up - regulating the expression of Bcl - 2 . In primates , GSK3 尾 and STAT6 participate in IP protection of IR .

【学位授予单位】：昆明医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R743

【参考文献】