下调CENP-W对人脑胶质瘤U87细胞的影响
本文选题:着丝粒蛋白W + 小干扰RNA ; 参考:《中国病理生理杂志》2017年02期
【摘要】:目的:研究下调着丝粒蛋白W(centromere protein W,CENP-W)的表达水平对人脑胶质瘤U87细胞的影响。方法:采用小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)抑制人脑胶质瘤U87细胞CENP-W的表达,采用RT-qPCR和Western blot法评价siRNA的干扰效果,采用MTT法、BrdU实验和平板集落形成实验测定细胞的增殖,Transwell小室检测细胞侵袭力的变化,划痕实验检测细胞迁移能力的变化,流式细胞术检测细胞周期及细胞凋亡的改变。结果:MTT实验、平板集落形成实验和BrdU实验显示转染siRNA的实验组U87细胞的增殖能力、集落形成能力较空白对照组及阴性对照组明显降低;Transwell实验和划痕实验显示实验组细胞的迁移、侵袭能力较空白对照组及阴性对照组明显减弱;流式细胞术分析表明实验组细胞的细胞周期被阻滞在G_0/G_1期;实验组细胞凋亡比例较对照组增多(P0.05)。结论:下调CENP-W的表达可抑制人脑胶质瘤细胞的增殖、迁移和侵袭能力并促进细胞的凋亡,提示CENP-W有望成为人脑胶质瘤基因治疗的候选靶点。
[Abstract]:Aim: to study the effect of down-regulation of the expression of W(centromere protein WnP-W on human glioma U87 cells. Methods: small interfering RNA(small interfering siRNAs were used to inhibit the expression of CENP-W in human glioma U87 cells. RT-qPCR and Western blot were used to evaluate the interfering effect of siRNA. MTT assay and plate colony formation assay were used to detect the changes of cell invasion, scratch test, cell cycle and apoptosis. Results the cell proliferation ability of U87 cells transfected with siRNA was significantly decreased by cell proliferation assay, colony formation assay and BrdU assay, and the migration of U87 cells in the experimental group was significantly lower than that in the control group and negative control group, and the migration of U87 cells in the experimental group was significantly lower than that in the control group and the negative control group. Compared with the control group and the negative control group, the invasive ability was significantly decreased, the cell cycle of the experimental group was blocked in the G_0/G_1 phase, and the proportion of apoptosis in the experimental group was higher than that in the control group (P 0.05). Conclusion: down-regulation of CENP-W expression can inhibit the proliferation, migration and invasion of human glioma cells and promote the apoptosis of human glioma cells, suggesting that CENP-W may be a candidate target for gene therapy of human glioma.
【作者单位】: 新乡医学院第一附属医院神经外科;南昌市第二医院神经外科;南昌大学第二附属医院神经外科;
【基金】:江西省优势科技创新团队建设计划(No.20152BCB24009) 江西省对外科技合作计划(No.20151BDH80009)
【分类号】:R739.41
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,本文编号:1807441
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