一种高纯度小鼠原代脑微血管内皮细胞的分离培养方法

发布时间：2018-06-20 22:38

  本文选题：内皮细胞 + 细胞培养　； 参考：《中国组织工程研究》2016年51期

【摘要】：背景:脑微血管内皮细胞是神经科学研究领域的重要工具细胞,如何获得高纯度的脑微血管内皮细胞一直是体外研究的关键和难点。目的:探索一种简便易操作,高纯度的原代脑微血管内皮细胞的分离培养方法。方法:使用6-8周龄C57BL/6小鼠,经酶消化及梯度离心法获得微血管段,使用药物进一步纯化内皮细胞,利用CD31和GFAP免疫荧光染色鉴定内皮细胞纯度。使用Claudin-5免疫荧光染色鉴定紧密连接蛋白的表达情况。结果与结论:1细胞呈旋涡状或铺路石样排列、生长;2免疫荧光显示内皮细胞纯度达99%以上,并广泛表达紧密连接蛋白;3结果表明,实验建立了一种简便、易操作的,可以获得大量高纯度的原代小鼠脑微血管内皮细胞的培养方法。
[Abstract]:Background: brain microvascular endothelial cells (CBECs) are important tool cells in neuroscience research. How to obtain high purity brain microvascular endothelial cells (CBECs) is always the key and difficulty in vitro. Objective: to explore a simple and convenient method for isolation and culture of primary brain microvascular endothelial cells. Methods: the microvascular segments of C57BL / 6 mice aged 6-8 weeks were obtained by enzyme digestion and gradient centrifugation. The endothelial cells were further purified by drugs. The purity of endothelial cells was identified by CD31 and GFAP immunofluorescence staining. Claudin-5 immunofluorescence staining was used to identify the expression of tight junction protein. Results and conclusion: the cells were arranged in swirl or paving stone shape, and the purity of endothelial cells was over 99% by immunofluorescence. The results showed that the experiment was simple and easy to operate. A large number of primary mouse microvascular endothelial cells with high purity could be obtained.
【作者单位】： 徐州医科大学附属医院神经内科徐州医科大学神经病学教研室;徐州医科大学附属医院神经外科徐州医科大学神经外科学教研室;
【基金】：国家自然科学基金青年基金(81501095) 江苏省六大人才高峰资助项目(2014-WSN-034)~~
【分类号】：R741

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本文编号：2045929