重症肌无力伴胸腺瘤患者胸腺内microRNA-125a-5p对FOXP3基因表达调控的初步研究

发布时间：2018-07-13 20:12

【摘要】：目的研究重症肌无力伴胸腺瘤（myasthenia gravis with thymoma，MGT）患者瘤旁胸腺与正常对照者胸腺microRNA的差异表达，预测筛选与MG相关的microRNAs，并探讨miR-125a-5p与其靶基因FOXP3的调控关系。 方法收集MGT组瘤旁胸腺组织13例以及正常对照组胸腺组织13例，用miRNA基因芯片筛选两组胸腺组织间差异表达的miRNA，用生物信息学方法结合芯片结果寻找与免疫相关的miRNA及其靶基因，用实时荧光定量PCR对寻找的miRNA及其靶基因在MGT组与NC组胸腺中的表达进行定量分析，然后构建野生型载体，将重组的载体转入HEK293细胞中，再分别转入Ncontrol或miRNA mimics，分为wide/Ncontrol;wide/miRNAmimics二组，然后分析相对荧光强度。 结果1. miRNA微阵列芯片结果显示，相比NC组，MGT组胸腺内显著差异表达的miRNA有137个，miR-125a-5p是显著上调中的一个(2.099579倍，P0.01)且与免疫相关。2.生物信息学预测发现miR-125a-5p的靶基因可能是FOXP3。3.RT-PCR结果显示，相比NC组，，MGT组胸腺中FOXP3下调(0.93±0.12比0.26±0.05，P0.01)而miR-125a-5p上调(0.91±0.09比6.12±1.22，P0.01)，两者的表达水平呈负相关（r=-0.8830,P0.01）。4.双荧光报告显示，miR-125a-5p对FOXP3有明显的下调作用。 结论 1、MGT患者胸腺组织内有其特异的微小RNA表达谱。 2、MGT患者胸腺组织内miR-125a-5p可能通过调控靶基因FOXP3的表达，从而参与重症肌无力的发生发展。
[Abstract]:Objective To investigate the differential expression of thymic microRNA in thymus and normal controls in patients with myasthenia gravis with thymoma ( MGT ) and to predict the screening of microRNAs related to MG , and to investigate the relationship between miR - 125a - 5p and its target gene FoxP3 .

Methods 13 cases of MGT group and 13 normal controls were collected . miRNA gene chip was used to screen the miRNA and its target gene . The miRNA and its target gene were analyzed quantitatively by means of bioinformatics . Then the wild type vector was constructed . The recombinant vector was transferred into 293 cells . Then the recombinant vector was transferred to Ncontrol or miRNA microarray , and then it was divided into wide / Ncontrol ; wide / miRNAse two groups , and then the relative fluorescence intensity was analyzed .

Results 1 . The results of miRNA microarray showed that there were 137 miRNA expression in the thymus of MGT group compared with NC group , and miR - 125a - 5p was significantly up - regulated ( 2.099579 times , P0.01 ) .

Conclusion

1 . MGT patients had specific micro - RNA expression profiles in thymus tissues .

2 . miR - 125a - 5p in the thymus tissues of MGT patients may be involved in the development of myasthenia gravis by regulating the expression of target gene FoxP3 .
【学位授予单位】：广西医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R746.1;R736.3

【共引文献】

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本文编号：2120605