胶质瘤细胞U87中NSPc1与lncRNAs分子的功能性互作研究
[Abstract]:Objective: recent studies have found that the multicomb protein family plays a transcriptional inhibitory role at the epigenetic level in glioma cells and is closely related to the genesis and development of glioma. At the same time, some long-chain non-coding RNA (lncRNAs) have been found to be abnormal in gliomas and correlated with tumor grading and typing. The changes of long chain noncoding RNA expression in U87 cells induced by malignant glioma and the expression of candidate interacted lncRNAs after up-regulating and down-regulating the expression of multicomb protein 1 (NSPc1) in the nervous system were analyzed. The functional interaction between U87 and NSPc1 was identified. Methods: first, we detected the difference of NSPc1 expression in different malignant glioma cell line H4U251U87 and detected the expression level of candidate interacted lncRNAs by real-time quantitative PCR, and then differentiated U87 cells by 10 ~ (-6) mol / L retinoic acid. The expression of NSPc1 gene in U87 cells was detected, and the expression of candidate lncRNAs was analyzed during the differentiation of U87 cells. Then, the expression of NSPc1 gene was up-regulated or down-regulated by lipo2000 liposome transfection. The expression of candidate lncRNAs in U87 cells was also detected before and after transfection. Subsequently, the functional interaction between NSPc1 and U87 cells was identified by cell proliferation assay and RNA-binding protein immunoprecipitation (RIP) technique. Results the expression of NSPc1 in different glioma cell lines was positively correlated with the malignancy of the cell lines. There was significant difference in the expression level of LNSPcRNAs among the candidates. 2 the expression of NSPc1 decreased at first and then increased during the differentiation of U87 glioma cell line U87 on the 10th day after induction of retinoic acid, and reached the lowest level on the 6th day. After upregulation or down-regulation of NSPc1 expression in U87 cells, the expression of multiple candidate interacted lncRNAs changed significantly, especially after MALAT1 ANRIL was knocked down in U87 cells. The growth of U87 cells was inhibited and the proportion of cell apoptosis increased. 5 RIP technique showed that there was interaction between LNSPcRNAs and NSPc1 protein in U87 cells, such as MALAT1 and ANRIL. The enrichment of ANRIL by NSPc1 was positively correlated with the expression of NSPc1. Conclusion the expression of 1 / 1 NSPc1 in gliomas is positively correlated with the malignancy of gliomas. 2 MALAT1 ANRIL can promote the growth of U87 cells and inhibit the interaction between MALAT1 and MALAT1 ANRIL. And ANRIL has functional interaction with NSPc1 during U87 cell differentiation.
【学位授予单位】:河北医科大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2017
【分类号】:R739.41
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,本文编号:2133530
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