他汀类药物对缺血性脑血管病患者体液免疫指标的调节作用

发布时间：2018-11-05 10:07

【摘要】：研究背景及目的他汀类药物,即3-羟基-3-甲基戊二酸单酰辅酶A(HMG-CoA)还原酶抑制剂,它作用于内源性胆固醇生物合成的限速酶——HMG-CoA还原酶,从而抑制胆固醇合成中间产物甲羟戊酸的合成,通过该途径抑制内源性胆固醇的生物合成,他汀类药物因其调节血脂、降低内源性胆固醇作用而被广泛应用于血脂调节及临床动脉硬化性疾病的预防和治疗。除了血脂调节功能以外,目前,他汀类药物的免疫调节及抗炎作用正逐渐受到关注。他汀类药物的免疫调节功能主要通过抑制甲羟戊酸(mevanolate, MAV)的生物合成,减少下游焦磷酸法尼酯(farnesyl pyrophosphate FPP)和r{牛儿基r{牛儿基焦磷酸(geranyl geranyl pyrophosphate,GGPP)的产生,进而抑制小GTP结合蛋白的活化而实现的：FPP和GGPP是内源性胆固醇生物合成的两个中间产物,在特异性酶的催化下,能与Rho家族等小G蛋白共价结合发生异戊二烯化,发生异戊二烯化的小G蛋白活化并参与细胞内信号转导途径,传递细胞内信号转导从而引起下游多种效应。他汀类药物作用于HMG-CoA还原酶,减少了中间产物的形成,使得细胞信号分子活化受阻导致下游多种成分的改变进而调节免疫活动。该药物作用可影响免疫系统中的一系列成分,干扰细胞免疫及体液免疫的多个环节,目前已知他汀类药物能对Th1/Th2细胞因子分泌、调节性T细胞、树突状细胞、NK细胞、NKT细胞等多种免疫成分产生调节作用,并影响细胞凋亡和增殖、抗原提呈、淋巴细胞归巢等免疫环节,他汀类药物的免疫调节作用已用于实验室动物模型及临床多种疾病的治疗。目前,他汀类药物对B细胞的调节作用尚不明确,本研究的目的在于通过检测缺血性脑血管病患者服用他汀类药物前后外周血中与体液免疫相关的指标变化,探讨他汀类药物在缺血性脑血管疾病患者中对B细胞免疫的调节作用。在体液免疫中,记忆B细胞是二次免疫中的主要效应细胞,在接受二次抗原刺激后,它能迅速分化为浆细胞产生大量抗体,IgG是再次免疫中生成的主要抗体类型,在二次免疫中发挥重要作用。IL-21近几年来因其在B细胞生成和活化中发挥重要作用而受到关注,IL-21可诱导所有B细胞亚群分化为Ig分泌细胞,分泌大量IgM、IgG和IgA,同时已有研究证实IL-21可辅助B细胞活化并产生抗体,同时可介导抗体亚型转换,BAFF是新的肿瘤坏死因子家族成员,它能刺激B细胞生长及活化。这些免疫分子与体液免疫息息相关,同时它们之间又存在相互作用和联系,构成免疫网络,对这些分子的相关研究也相对匮乏,因此,我们选择记忆B细胞(CD19+CD27+细胞)、IL-21、BAFF及IgG作为检测指标,探讨他汀类药物对B细胞免疫的体内调节作用。缺血性脑血管病是神经内科常见多发疾病,包括TIA、脑梗死、以及高脂血症、脑血管狭窄等引起的脑动脉供血不足,也是临床服用他汀类药物最主要的患者群。目前已经发现他汀类药物对SLE、MS患者的免疫系统及EAE、EAN和EAMG等免疫动物模型均存在免疫调节作用,但这些研究大多是在免疫激活状态下探究他汀类药物的免疫调节作用。而临床大多数服用他汀类药物的患者并未处于免疫激活状态,另一方面,目前临床使用他汀类药物主要关注它的血脂调节以及抗动脉硬化作用,对于他汀类药物的免疫调节作用对于普通患者的免疫系统会产生什么样的影响尚不清楚,因此,我们选择缺血性脑血管病患者这一临床他汀类药物的主要使用群体作为研究对象,探究他汀类药物在相对非激活免疫状态下的免疫调节作用。研究对象：山东省千佛山医院神经内科2013年6月-12月缺血性脑血管病患者。根据严格的入选标准和排除标准进行筛选。研究方法 (1)患者血液标本的采集：于早上8：00-10：00局部皮肤消毒后采集患者空腹肘静脉血2-3ml,加入无菌EDTA抗凝采血管,标本在采集后24h内上机流式检测memory B细胞(CD19+CD27+细胞),CD19+CD27-细胞,CD19+细胞； (2)另同法取肘静脉血5ml,加入无菌促凝采血管,离心分离血清后于-30℃冻存备用,用于ELISA检测IL-21,BAFF,免疫比浊法检测血清总IgG; (3)给予患者他汀类药物口服,分别为瑞舒伐他汀(可定)10mg(n=13),阿托伐他汀(立普妥)10mg(n=3),阿托伐他汀(阿乐)10mg(n=1),每日一次,晚饭后服用,服药治疗时间为20～34天。 (4)口服他汀类药物三周后再次采集患者外周肘静脉血液标本,EDTA抗凝血标本用于流式细胞检测memory B细胞(CD19+CD27+细胞),CD19+CD27-细胞,CD19+细胞。促凝血3000r/min离心10min,分离血清放置于-30℃保存,待所有标本留齐后进行成批检测,用于ELISA检测IL-21,BAFF,免疫比浊法检测血清总IgG。统计学处理：数据分析采用SPSS11.9统计软件,计量资料以(平均数±标准差)表示,计量资料比较使用配对t检验。数据结果使用GRAPHPAD PRISM v5软件作图。研究结果： 1.缺血性脑血管病患者服用他汀类药物后流式检测外周血中记忆B细胞(CD19+CD27+细胞)下降[(3.39±1.77)和(2.36±1.29)%,P=0.019]； 2.血清中IL-21水平下降[(112.79±45.19)和(88.83±18.40)pg/mL,P=0.024]； 3.血清中总IgG水平升高[(10.74±2.41)和(11.97±2.61)g/L,P=-0.03]。研究结论他汀类药物对缺血性脑血管病患者体液免疫存在调节作用
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【学位授予单位】：山东大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R743

【参考文献】