pEGFP-N1-NUCB2真核表达质粒的构建及在SH-SY5Y细胞中的转染效率

发布时间：2018-11-20 08:37

【摘要】：目的构建p EGFP-N1-NUCB2重组子并比较Lipofectamine 2000和Xfect两种转染试剂在进行神经细胞转染时的转染效率。方法构建p EGFP-N1-NUCB2重组子,然后采用碱裂解法进行质粒DNA的提取,PEG-Mg Cl2进行质粒DNA的纯化,最后将纯化的质粒DNA分别用两种不同转染试剂分别在HEK293细胞和SH-SY5Y细胞中进行转染。结果采用Lipofectamine 2000进行p EGFP-N1-NUCB2重组子的转染实验,发现在HEK293细胞中可以转染成功,但是在SH-SY5Y细胞中基本没有荧光显现;采用Xfect进行p EGFP-N1-NUCB2重组子的转染实验,发现在SH-SY5Y细胞中虽有荧光显现,但是转染效率非常低。结论 Xfect的转染效率高于Lipofectamine 2000,p EGFP-N1-NUCB2在SH-SY5Y细胞中采用脂质体进行转染很难成功。
[Abstract]:Objective to construct p EGFP-N1-NUCB2 recombinant and compare the transfection efficiency of Lipofectamine 2000 and Xfect in neural cell transfection. Methods the recombinant p EGFP-N1-NUCB2 was constructed, then the plasmid DNA was extracted by alkaline lysis, and the plasmid DNA was purified by PEG-Mg Cl2. Finally, the purified plasmid DNA was transfected into HEK293 cells and SH-SY5Y cells with two different transfection reagents. Results Lipofectamine 2000 was used to carry out the transfection of p EGFP-N1-NUCB2 recombinant. It was found that the transfection was successful in HEK293 cells, but there was no fluorescence in SH-SY5Y cells. The transfection of p EGFP-N1-NUCB2 recombinant by Xfect showed that the transfection efficiency was very low although there was fluorescence in SH-SY5Y cells. Conclusion the transfection efficiency of Xfect is higher than that of Lipofectamine 200p EGFP-N1-NUCB2 in SH-SY5Y cells.
【作者单位】： 河北北方学院法医教研室;河北北方学院;
【基金】：河北省卫计委基金项目(20170179) 河北北方学院创新人才培育基金项目(CXRC1323)
【分类号】：R741

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本文编号：2344428