【摘要】：背景神经胶质瘤是中枢神经系统最常见的肿瘤,其组织来源于神经胶质细胞的肿瘤,治疗效果差,复发率高,死亡率高。神经胶质瘤治疗采取手术治疗联合化疗、放疗。紫草素是从紫草科植物紫草的根部提取出来的一个蒽醌类化合物。紫草素主要有效成分是紫草素衍生物(β,β-丙乙烯酰阿卡宁、乙酰紫草素为紫草色素的主要成分),具有电子传递作用,吸收后多结合成酯而存在,表现出多种多样的生物活性,促进或干扰细胞内某些生化反应过程,如抗炎、抗肿瘤、抗菌、保肝和免疫调节、降血糖、抗生育以及抗病毒等效果。有关紫草素能否抑制人神经胶质瘤以及相关作用机制仍不清楚,本研究选用人神经胶质瘤细胞系U251为研究对象,以紫草素作为诱导药物,研究紫草素对U251细胞调亡的影响以及相关分子生物学机制。 目的探讨紫草素(Shikonin)对人神经胶质瘤细胞系U251细胞的诱导凋亡作用,以及其可能存在的机制。 方法选择不同浓度Shikonin(终浓度分别为：1μM、5μM、20μM),作用于U251细胞24h后,通过CCK8法检测Shikonin对U251细胞增殖的影响,应用DNALadder, Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡状况,JC-1染色后使用荧光显微镜观察细胞线粒体变化,Western-blotting检测Cyt c、AIF、Bax, Bcl-2的蛋白表达。 结果CCK8结果显示Shikonin可以抑制U251细胞的增殖,且随着Shikonin剂量增加,药物抑制效果相应增强,最大抑制率可达71.20%(71.20±10.32%)。DNALadder显示：Shikonin作用U251细胞后,Shikonin各剂量组出现明显梯形电泳条带。荧光显微镜检测显示：Shikonin作用U251细胞后,引起U251细胞线粒体膜电位发生改变,诱导细胞线粒体损伤。且随着Shikonin剂量的增加U251细胞凋亡百分率逐步增大。Western-blotting结果显示：与对照组相比,Shikonin作用U251细胞后,随着Shikonin剂量的增加Cyt c、AIF、Bax蛋白表达升高,而Bcl-2蛋白表达量减少。 结论(1) Shikonin能显著抑制人神经胶质瘤细胞系U251细胞的增殖,对细胞生长具有抑制作用。(2) Shikonin对人神经胶质瘤细胞系U251细胞增殖抑制及具有促凋亡的作用,表现有一定的剂量依赖方式。(3) Shikonin诱导对人神经胶质瘤细胞系U251细胞的凋亡作用机制,可能与上调Cyt c、AIF、Bax蛋白及下调Bcl-2蛋白的表达相关。
【学位授予单位】：新乡医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R739.41
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本文编号：2531788
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