CLDN 15在大鼠坐骨神经损伤后Wallerian溃变早期的作用研究

发布时间：2019-09-25 02:14

【摘要】：目的在周围神经损伤修复过程中,雪旺细胞(SCs)分泌多种细胞因子参与修复和再生过程,为神经再生提供良好的微环境。基于基因芯片和蛋白芯片分析结果,claudin 15(CLDN 15)在大鼠坐骨神经损伤后早期的信号调控网络中起核心作用。本实验旨在研究CLDN 15在Wallerian溃变早期对SCs的功能的影响,并探索其调控周围神经损伤与修复的分子机制,为神经再生修复提供更多的理论基础。方法1.构建大鼠坐骨神经横断损伤模型;2.IHC、ICC分析CLDN 15定位;3.CLDN 15 si RNA和过表达质粒转染体外SCs;4.Real-time PCR分析;5.Western Blot分析;6.Ed U增殖、Annexin V凋亡和Transwell小室迁移分析;7.统计学分析:所有实验数据都用平均值±标准差(±SD)表示,同时进行方差分析,认为p0.05具有统计学意义。结果1.IHC和ICC结果显示在SCs中CLDN 15和S100B共定位;2.大鼠坐骨神经横断后,在Wallerian溃变早期,CLDN 15在神经远端表达升高;3.CLDN 15 si RNA干扰后SCs的增殖数目增多,凋亡数目减少;4.CLDN 15质粒过表达后SCs的增殖数目减少,凋亡数目增多;5.CLDN 15干扰和过表达之后,相关基因差异表达;6.CLDN 15干扰和过表达后相关通路蛋白变化:p-AKT/AKT、p-ERK/ERK、β-catenin通路没有差异,p-c-jun/c-jun通路发生显著性变化,c-fos和PKCα通路只在过表达实验中发生显著变化。结论1.SCs的细胞膜上表达CLDN 15。2.CLDN 15可以抑制体外培养SCs的增殖,而促进SCs的凋亡,但对SCs的迁移功能没有显著作用。3.CLDN 15可能通过c-jun通路调节SCs的功能,CLDN 15还可能调节c-fos和PKCα通路。
【图文】：

19图 1 大鼠坐骨神经损伤远端的免疫荧光双标。如图分别示坐骨神经损伤后 0 h、1 h、6 h、12 h、24 h 的免疫荧光双标。红色荧光表示 CLDN15 蛋白表达，绿色荧光表示成髓鞘 SCs 的特异性标记 S100B，Merge 代表两者重合部分。Bar=20 μm。

通大学硕士学位论文3.2 坐骨神经远端 CLDN 15 的表达情况我们运用 Real-time PCR（图 2 A）和 Western Blot（图 2 B）分析 CLDN 15坐骨神经远端各个时间点的表达情况。结果显示，在 Wallerian 溃变早期，坐神经远端的 CLDN 15 基因和蛋白表达均上升，与组织免疫荧光和基因及蛋白片的分析结果一致。
【学位授予单位】：南通大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R745

【相似文献】

相关期刊论文 前10条

1 朱新辉;陈莉;杨建;沈爱国;严建军;;大鼠坐骨神经横断后β-1，4-半乳糖基转移酶-Ⅰ的表达变化[J];中华实验外科杂志;2007年08期

2 张志强;;超短波对大鼠坐骨神经损伤后运动神经传导速度的影响[J];中国医科大学学报;1992年02期

3 高月明;王兴林;张立宁;索伟;蒋天裕;赵秀梅;;不同压力和部位压迫大鼠坐骨神经对神经血流量的影响[J];中国康复理论与实践;2008年12期

4 姚鸿萍;封卫毅;魏友霞;董海燕;;大鼠坐骨神经传导速度测定的方法学考察[J];中国药房;2011年01期

5 楚晓丰;阮洪江;刘俊建;范存义;;不同角度修复大鼠坐骨神经损伤的组织学研究[J];中国修复重建外科杂志;2011年05期

6 李育浩，吴清和，，温素萍，韩坚，梁颂名;络通片对大鼠坐骨神经损伤的影响[J];中药新药与临床药理;1994年03期

7 陈晓东,顾玉东,徐建光;损伤大鼠坐骨神经诱导运动神经元凋亡的初步报告[J];中华手外科杂志;1999年02期

8 谢国庆;龚炎培;陆金荣;申世源;金文孝;;补阳还五汤对大鼠坐骨神经损伤的修复作用[J];辽宁中医药大学学报;2014年03期

9 刘京升,孙正义,董晓丽;脑源性神经营养因子对大鼠坐骨神经损伤诱导神经元凋亡的作用[J];中华实验外科杂志;2002年02期

10 杨恒文,曾琳,刘媛,龙在云,李应玉,伍亚民;大鼠坐骨神经离断后功能和超微病理变化[J];中国临床康复;2003年17期

相关会议论文 前10条

1 贺端端;姬斌;何伶俐;申帮利;宋学军;连庆泉;李军;曹红;;维生素B_(12)对大鼠坐骨神经结扎神经痛的影响及血药浓度监测[A];中华医学会疼痛学分会第七届年会论文摘要集[C];2007年

2 张亚声;杨勤;;芪楮复筋方对大鼠坐骨神经损伤的修复作用[A];中华中医药学会第二十一届全国脾胃病学术交流会暨2009年脾胃病诊疗新进展学习班论文汇编[C];2009年

3 苏欢欢;孙华燕;高旭鹏;王鑫;徐风华;;脑源性神经营养因子复合导管对大鼠坐骨神经损伤修复的研究[A];2013年中国药学大会暨第十三届中国药师周论文集[C];2013年

4 刘昊;齐巍;程爱国;;大鼠坐骨神经损伤后早期神经吻合术对脊髓前角运动神经元凋亡的影响及其可能机制的研究[A];“2008灾害创伤与急救新进展”学术交流会学术论文集[C];2008年

5 李培建;;BDNF基因转染修复大鼠坐骨神经损伤[A];中华医学会神经外科学分会第九次学术会议论文汇编[C];2010年

6 李培建;李兵仓;戴宜武;;腺病毒介导的BDNF基因转移治疗大鼠坐骨神经损伤的组织学评价[A];第七届全国创伤学术会议暨2009海峡两岸创伤医学论坛论文汇编[C];2009年

7 聂鑫;金岩;张勇杰;刘源;;外胚间充质干细胞构建组织工程神经对大鼠坐骨神经缺损修复的促进研究[A];中国组织工程、干细胞与神经再生学术会议论文集[C];2004年

8 董双海;曹云;李豪青;田纪伟;易诚青;桑伟林;;缺血预处理对大鼠坐骨神经缺血再灌注损伤影响的实验研究[A];第二届泛长江流域骨科新进展研讨会暨上颈椎伤病新理论新技术学习班论文汇编[C];2008年

9 薛景凤;;远志对糖尿病周围神经病变大鼠坐骨神经的保护作用[A];中国解剖学会2012年年会论文文摘汇编[C];2012年

10 孙鸿安;白俊清;程爱国;;大鼠坐骨神经损伤后不同窗吻合术后应用CNTF对脊髓运动神经元保护作用的研究[A];第五届全国灾害医学学术会议暨常州市医学会急诊危重病及灾害医学专业委员会首届年会学术论文集[C];2009年

相关重要报纸文章 前1条

1 ;糖络通防治糖尿病性周围神经病变[N];科技日报;2005年

相关博士学位论文 前10条

1 付昌马;大鼠坐骨神经损伤背根神经节内P物质和降钙素基因相关肽的表达[D];安徽医科大学;2014年

2 王士雷;白介素10基因治疗大鼠坐骨神经慢性压迫损伤性痛的实验研究[D];复旦大学;2004年

3 李陶;睫状神经营养因子对不同年龄大鼠坐骨神经再生的作用及其机制[D];第三军医大学;2002年

4 刘甬民;不同干预方法对大鼠坐骨神经损伤导致神经病理性疼痛的影响[D];华中科技大学;2006年

5 孟浩;光化学技术在大鼠坐骨神经损伤组织工程修复中的应用研究[D];第四军医大学;2011年

6 张为众;小分子化合物丙戊酸促进大鼠坐骨神经再生的研究[D];吉林大学;2006年

7 李沫;预防大鼠坐骨神经修复中瘢痕粘连及促进神经再生的作用研究[D];第四军医大学;2012年

8 李瓦里;明胶酶在大鼠坐骨神经挤压伤后的原位酶谱表达[D];天津医科大学;2009年

9 宋永周;组织工程神经修复大鼠坐骨神经缺损的实验研究[D];河北医科大学;2009年

10 高嵩涛;组织工程化周围神经修复大鼠坐骨神经损伤的实验研究[D];中南大学;2007年

相关硕士学位论文 前10条

1 刘冲;钙通道阻滞剂对大鼠坐骨神经损伤后神经瘢痕形成的影响[D];河北大学;2015年

2 刘义;慢病毒介导的CDNF对大鼠坐骨神经再生和功能恢复的作用研究[D];山东大学;2015年

3 成兴海;Jab1与p27kip1在大鼠坐骨神经损伤后的表达变化及意义[D];南通大学;2014年

4 张平安;TGF-β1在大鼠坐骨神经损伤后Wallerian溃变过程中的作用研究[D];南通大学;2014年

5 李沿江;川芎嗪预处理促进大鼠坐骨神经异体移植后神经再生[D];重庆医科大学;2015年

6 张钰;外周血单个核细胞对大鼠坐骨神经离断吻合后修复与再生的影响[D];遵义医学院;2016年

7 彭晴;淫羊藿次苷Ⅱ对大鼠坐骨神经损伤后神经再生和Tau蛋白表达的影响[D];遵义医学院;2016年

8 贺菊芳;分泌VEGF_(165)的NSCs协同鼠胎膜移植治疗大鼠坐骨神经损伤的前期研究[D];贵州医科大学;2016年

9 李怀芹;CLDN 15在大鼠坐骨神经损伤后Wallerian溃变早期的作用研究[D];南通大学;2015年

10 李松;660nm红光对大鼠坐骨神经钳压损伤的治疗修复作用[D];重庆医科大学;2013年

本文编号：2541176