蛛网膜下腔出血的抗炎治疗：调节性T细胞过继转输

发布时间：2020-01-20 23:55

【摘要】：目的 1、建立大鼠蛛网膜下腔出血模型，静脉给予外源性CD4+CD25+调节性T细胞，探讨脑组织炎性细胞浸润的变化。 2、观察CD4+CD25+调节性T细胞静脉输注治疗后蛛网膜下腔出血大鼠模型脑组织中TLR4、NF-κB，以及血浆中相关炎性因子表达的变化，探讨CD4+CD25+调节性T细胞对蛛网膜下腔出血后炎症反应的抑制作用。 方法 1、用免疫磁珠两步法，从大鼠的脾脏及淋巴结中分离、获取高纯度的调节性T细胞。枕大池二次注血法制作SAH大鼠模型。随机将健康成年雄性wister大鼠随机分为正常组、假手术组、SAH组，SAH组分为静脉PBS输注组（PBS组）、脾细胞（spleencells，SP）输注组和Treg输注组。于术后2天断头取脑，免疫组化法检测脑组织中的炎性细胞浸润情况。 2、选用成年健康的雄性wister大鼠，枕大池二次注血法制作大鼠蛛网膜下腔出血模型。随机将动物分为正常组、假手术组、蛛网膜下腔出血组（SAH组），蛛网膜下腔出血组分为静脉PBS输注组、脾细胞（spleencells，SP）输注组和Treg输注组。术后第2天断头取脑，由股静脉留取静脉血，免疫组化法检测脑组织中TLR4的表达，westernbolt法检测脑组织中TLR4、NF-κB蛋白水平，ELISA法检测外周血中炎性细胞因子IL-1β、TNF-α、IL-6水平的变化。 结果 与假手术组相比，SAH后脑组织中性粒细胞浸润明显增多，TLR4表达也有明显升高。同时，SAH组NF-κB表达水平显著增高。血浆中IL-1β、TNF-α、IL-6表达显著增高。与PBS治疗组和SP治疗组相比，Treg治疗组脑组织中TLR4，NF-κB水平显著降低，，血浆中IL-1β、TNF-α、IL-6表达也降低（P0.05）。 结论 SAH早期出现脑血管痉挛及脑损伤后，炎性因子、NF-κB的表达与TLR4有关。TLR4在脑室周围的血管丛中表达较多，在小胶质、星形胶质细胞，少量分布于脑血管内的内皮细胞和平滑肌细胞。TLR4/NF-κB信号通路被激活进而导致的炎症反应在SAH后的脑血管痉挛及早期脑损伤的发生过程中发挥重要作用。Treg治疗SAH后，脑组织中的TLR4、NF-κB以及血浆中IL-1β、TNF-α、IL-6炎性因子表达水平显著降低。表明Treg能较好的限制SAH后中枢神经系统的炎症反应，从而减轻SAH造成的脑组织损伤。
【图文】：

图 1-1 SAH 大鼠眼角、鼻周血痂图 1-2 SAH 大鼠颅底部溶血物覆盖图 1-3CD4+CD25+Treg 细胞流式检测结果图 1-4 扩增后 Treg 细胞流式检测结果

图 1-1 SAH 大鼠眼角、鼻周血痂图 1-2 SAH 大鼠颅底部溶血物覆盖图 1-3CD4+CD25+Treg 细胞流式检测结果图 1-4 扩增后 Treg 细胞流式检测结果
【学位授予单位】：泰山医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R743.35

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本文编号：2571400