RAS-炎症系统在颅内动脉瘤发生发展中的作用研究和meta分析

发布时间：2020-04-01 19:29

【摘要】：本研究通过检测颅内动脉瘤患者血清、脑脊液及颅内动脉瘤壁中肾素-血管紧张素系统(renin-angiotensin system,RAS)相关蛋白,血管紧张素 Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)、血管紧张素转换酶(angiotensin converting enzyme,ACE)和血管紧张素Ⅱ 1型受体(angiotensinⅡ type 1 receptor,AT1R)的含量,探究其与炎症系统的相关性,来揭示RAS在颅内动脉瘤发生、发展过程中的潜在作用。进一步,采用meta分析方法评估ACE基因多态性对于颅内动脉瘤破裂的风险。本论文的研究表明:在颅内动脉瘤中,RAS与炎症呈正相关性,RAS可能促进了炎症的发生从而进一步导致了颅内动脉瘤形成。Meta分析证明ACE基因多态性会增加颅内动脉瘤破裂的风险。第一部分RAS-炎症系统在颅内动脉瘤发生中的作用研究研究目的:利用酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immuno sorbent assay,ELISA)、免疫组织化学和定量即时聚合酶链锁反应(quantitative real time polymerase chain reaction,qRT-PCR)等技术检测颅内动脉瘤患者中肾素-血管紧张素系统及炎症相关蛋白的表达,探究肾素-血管紧张素系统在颅内动脉瘤形成过程中的潜在作用。研究方法:实验组选取满足经CT血管造影(CT angiography,CTA)或数字减影血管造影(digital subtraction angiography,DSA)明确有颅内动脉瘤、且直径不小于3 mm、治疗选择开颅动脉瘤夹闭术的患者,在术中留取动脉瘤壁标本。此外,留取血液标本和脑脊液标本。对照组选取选择颅脑外伤后需行开颅血肿清除术的患者,在清除血肿及坏死脑组织时留取切除组织的血管标本;并留取脑脊液标本。血清标本的对照组选取头皮肿物患者。利用ELISA、免疫组织化学和qRT-PCR等技术检测颅内动脉瘤患者及对照组血清、脑脊液、颅内动脉瘤壁组织中AngⅡ、ACE、ATIR,及白介素 6(interleukin-6,IL-6)、白介素 1β(interleukin-1β,IL-1 β)、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、内皮型一氧化氮合酶(Endothelial nitric oxide synthase,eNOS)、基质金属蛋白酶 9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)、脂蛋白α(lipoprotein α,Lp-α)的含量,进行比较,探究肾素-血管紧张素系统与炎症的相关性,揭示RAS在颅内动脉瘤形成过程中的潜在作用。结果:ELISA、免疫组织化学结果显示颅内动脉瘤患者血清、脑脊液、颅内动脉瘤壁组织中AngⅡ、ACE、AT1R表达均增加(p0.05),除血清中AT1R增加不显著(p0.05)。ELISA显示颅内动脉瘤患者除动脉瘤壁中eNOS表达下降外,血清中IL-6、IL-1β、TNF-α含量及动脉瘤壁中MMP-9、Lp-α表达也均增加(p0.05)。qRT-PCR结果显示动脉瘤壁组织中miRNA-566表达量下降(p0.01)。相关性分析显示颅内动脉瘤组脑血管壁组织中RA S相关蛋白与各炎症因子都显示出较好的正相关性。结论:颅内动脉瘤患者中RAS和炎症被激活,RAS可能通过促进炎症发生,破坏脑血管内皮细胞、平滑肌细胞稳定性和完整性,降解细胞外基质,抑制内皮细胞生成,使脑血管壁结构重构,导致颅内动脉瘤形成。第二部分ACE基因多态性与颅内破裂动脉瘤的meta分析研究目的:血管紧张素转换酶在颅内脉管系统调节过程中有重要作用,而且研究显示血管紧张素转换酶基因插入/缺失多态性与颅内动脉瘤有关,但未显示与颅内动脉瘤破裂风险相关性。因此,本研究对血管紧张素转换酶基因插入/缺失多态性与颅内破裂动脉瘤进行meta分析,以明确其相关性。研究方法:利用计算机检索PubMed,Medline,Web of Science及万方、中国知网等数据库,同时通过手工检索相关研究文献的参考文献作为补充。检索日期从建库截止到2018年1月,检索已公开发表的研究破裂颅内动脉瘤患者的ACE基因插入/缺失多态性随机对照研究(randomizedtrolled trials,RCTs)。观测指标包括:基因检测方法、基因检测结果等。采用Ⅰ2和卡方检验检测纳入研究的统计学异质性,基因多态性变量采用比值比(odds ratio,OR)和95%置信区间(confidence interval,CI)表示。结果:按照检索策略共查到80篇文献,最终6各RCTs,包括2387名患者符合标准并纳入研究。Meta分析结果显示:ACE基因多态性会增加颅内动脉瘤破裂风险,等位基因Ⅰvs.D中OR=1.26,95%CI=1.10-1.44,POR=0.001,共显性模型纯合子Ⅱ vs.DD 中 OR=1.60,95%CI= 1.26-2.03,POR=0.00,显性模型(Ⅱ+ID)vs.DD 中OR=1.32,95%CI=1.00-1.73,POR=0.047。在亚组分析中发现,对于东亚人,共显性模型纯合子Ⅱ vs.DD 中(OR=2.04,95%CI=1.12-3.70,POR=0.02)和显性模型(Ⅱ+ID)vs.DD 中(OR=1.93,95%CI=1.32-2.80,POR=0.001),ACE 基因多态性也会增加IA破裂风险,然而在白种人中却没有显著相关性。在人群来源分析中,基于医院的研究结果显示除去隐性模型(OR=1.12,95%CI=0.73-1.74,POR=0.602)外,在其余模型中ACE基因多态性都会增加IA破裂风险,而在对于基于人群的研究中也是相似结果,等位基因模型Ⅰ vs.D(OR=1.28,95%CI=1.08-1.52,POR=0.005))和共显模型纯合子Ⅱ vs.DD(OR=1.56,95%CI=1.12-2.17,POR=0.009)。结论:ACE基因多态性会增加颅内动脉瘤破裂风险,而且这种风险在东亚人中较白种人中更高。
【图文】：

颅内动脉瘤,炎症,血流动力学,破裂过程

图１．１炎症在颅内动脉瘤形成、发展、破裂过程中的作用［４３］逡逑尽管目前在颅内动脉瘤方面已经取得了较大的进展，但血流动力学下炎症诱逡逑发的具体分子机制仍是未知。有一些学者通过比对破裂颅内动脉瘤和未破裂颅逡逑内动脉瘤，报道了一些破裂颅内动脉瘤的组织病理学特点，如大量炎症细胞浸逡逑润、血管壁的胞外基质降解、血管壁细胞缺失等事４４］。而在大部分未破裂动脉瘤逡逑中，炎症浸润和胞外基质降解程度较轻。尽管如此，颅内动脉瘤破裂具体机理逡逑还有待研究。逡逑１．２肾素－血管紧张素系统的促炎作用研究逡逑ＲＡＳ是人体内重要的体液调节系统，在调节血压、水分、电解质和保持体内逡逑环境稳定性中发挥着巨大作用。目前已证实，Ａｎｇ邋ＩＩ作为肾素－血管紧张素系统的逡逑

血清,检测结果,相关蛋白,血管紧张素系统

５）将－ＡＡＣｔ作为２的指数幂进行计算。２．邋２．邋２．邋６统计学分析逡逑实验数据以ｍｅａｎ士ＳＥＭ表示，采用ＧｒａｐｈＰａｄ邋Ｐｒｉｓｍ５．邋０统计软件进行数据分逡逑析，仅有两组时，组间比较采用ｔ检验，ｐ＜０．邋０５为差异有统计学意义。逡逑２．３实验结果逡逑２．３．１各样本中ＲＡＳ相关蛋白表达逡逑２．３．１．１血清中ＲＡＳ相关蛋白表达逡逑采用ＥＬＩＳＡ方法检测各组血清中Ａｎｇｌｌ、ＡＣＥ、ＡＴ１Ｒ含量，，结果如图２．邋１显逡逑示，相比对照组，颅内动脉瘤组患者血清中ＲＡＳ相关蛋白Ａｎｇｌｌ、ＡＣＥ含量明显逡逑增加（／Ｋ０．邋０５），而ＡＴ１Ｒ虽然也有增加，但并不显著（ｐ＞0．0５），这表明了颅逡逑内动脉瘤组患者外周血中肾素－血管紧张素系统被激活。逡逑
【学位授予单位】：浙江大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R743

【参考文献】