PGC-1α调控线粒体融合参与癫痫发作的分子机制研究

发布时间：2020-04-08 01:53

【摘要】：目的:探讨PGC-1α是否通过调控线粒体融合蛋白MFN1/MFN2的表达,参与大鼠的癫痫发作。方法:健康成年雄性SD大鼠随机分为以下四组:正常组(n=5)、癫痫组(6h、24h、72h、1W四个时间点,n=5×4)、PGC-1α抑制剂(Compound C)组(n=5)及DMSO溶剂对照组(n=5)。建立氯化锂-匹罗卡品癫痫大鼠模型,行为学观察各组大鼠首次癫痫发作的潜伏期以及1小时内癫痫发作次数;免疫荧光及Western Blot检测PGC-1α和MFN1/2在各组大鼠海马中的表达情况。结果:1.行为学结果显示:癫痫组的大鼠首次癫痫发作潜伏期为19.35±1.51 min,DMSO溶剂对照组为19.22±1.00 min,Compound C组为14.91±1.01min;癫痫组的1小时内大鼠癫痫发作次数为6.2±0.84次,DMSO溶剂对照组为6.0±0.71次,Compound C组为8.0±1.22次。大鼠首次癫痫发作潜伏期和1小时内癫痫发作次数在癫痫组与溶剂对照组之间比较,差异无统计学意义(P0.05);与上述两组比较,Compound C组大鼠首次癫痫发作潜伏期明显缩短,1小时内癫痫发作次数增多,差异具有统计学意义(P0.05)。2.Western Blot检测PGC-1α发现:正常对照组大鼠海马中PGC-1α有基础水平表达;癫痫组PGC-1α的表达在癫痫发作后6h较正常对照组出现明显的下调,24h表达出现一个高峰(P0.05);Compound C组,癫痫发作后第24h,PGC-1α的表达较癫痫组(24h)显著降低(P0.05);3.Western Blot检测MFN2发现:正常对照组大鼠的海马中MFN2有基础水平的表达;癫痫模型大鼠中,MFN2在造模成功后6h表达较正常对照组出现明显下调,24h表达出现增高,与正常对照组相比,差异具有统计学意义(P0.05);在应用AMPK抑制剂Compound C干预后,癫痫造模后第24h,Compound C组大鼠中MFN2的表达较癫痫组(24h)显著下调,差异具有统计学意义(P0.05);4.Western Blot检测MFN1结果示:正常对照组大鼠的海马中MFN1有基础水平的表达;癫痫组大鼠MFN1在癫痫发作后6h和24h均出现表达增高,但在6h出现表达高峰。与正常对照组相比,差异具有统计学意义(P0.05);在应用AMPK抑制剂Compound C干预后,癫痫造模后第24h,Compound C组大鼠中MFN1的表达与癫痫组表达相当(24h),差异无统计学意义(P0.05)5.免疫荧光检测MFN1/2的定位结果示:MFN1/2主要表达于神经元的胞膜及胞质中。免疫荧光检测PGC-1α发现其表达于神经元的胞膜及胞质中,且定位在兴奋性突触后。结论:抑制AMPK信号通路可缩短大鼠首次癫痫发作潜伏期和加重大鼠癫痫发作程度,其机制可能与降低核转录共激活因子PGC-1α以及融合蛋白MFN1/2的表达有关。
【图文】：

统计图,次数,统计图,癫痫发作

照组为 6.0±0.71 次，Compound C 组为 8.0±1.22 次。癫痫组及溶剂对照组在首次发作潜伏期和 1 小时内的发作次数相比，差异无统计学意义（P>0.05）；而 CompounC 组与上述两组比较，大鼠首次癫痫发作潜伏期明显缩短，1 小时内癫痫发作次数增多，差异具有统计学意义（P＜0.05）。腹腔注射 AMPK 抑制剂 Compound C 可明显缩短癫痫大鼠的首次癫痫发作潜伏期、增加癫痫发作次数。（见表 1、图 1）表 1 大鼠癫痫发作的潜伏期及发作次数的统计表（ x ±s）Tab.1 Statistical table of latency and frequency of epileptic seizures in rats（ ±s）Goups Latency of seizures （min） Number of seizures （times/h）EP 19.35±1.51 6.2±0.84DMSO 19.22±1.00#6.0±0.71#Compound C 14.91±1.01*8.0±1.22*Note:*P＜0.05 vs EP group;#P＞0.05vs EP group

比值,实验结果,癫痫,硕士学位论文

遵义医科大学硕士学位论文李东对照组相比，差异无统计学意义（P＞0.05）；MFN2 在 Compound C 组和溶剂对照组中的表达与内参（β-Tublin）的 OD 值比分别为：0.07±0.002、0.1±0.001，，结果表明癫痫发作 24h 后 Compound C 组 MFN2 的表达较癫痫组下调，差异具有统计学意义（P＜0.05）；溶剂对照组与癫痫组（24h）之间的差异无统计学意义（P＞0.05）。(见图 4）
【学位授予单位】：遵义医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R742.1

【相似文献】