Nna1突变在AMS小鼠小脑发育中的作用研究

发布时间：2020-04-10 05:59

【摘要】：目的:探讨不同发育时期小脑各皮层Nna1(nervous system nuclear protein induced by axotomy protein 1,Nna1)表达与浦肯野细胞的胞体和树突以及颗粒细胞的变化之间的关系,为小脑发育相关疾病的基因靶向治疗提供实验依据。方法:本研究通过限制性内切酶剪切以及PCR的方法检测实验动物基因型,将野生型小鼠(wild type,wt)设置为对照组,ams纯合子小鼠设置为实验组作为研究对象。分别观察出生后7天、15天、21天、28天小鼠小脑发育情况。通过免疫组化,免疫荧光的实验方法检测不同发育天数(P7、P15、P21、P28)小鼠的小脑皮层中Nna1抗原表达。通过western blot检测各基因型小鼠小脑皮层中蛋白表达情况。结果:野生型小鼠(wt)小脑的分子层和颗粒层均显示Nna1染色阳性。其阳性染色强度在出生后7天的小鼠小脑中达到峰值,即在浦肯野细胞(PCs)树突成熟之前,随后染色强度逐渐减低。对于浦肯野细胞的染色结果显示浦肯野细胞的胞体和树突在小鼠出生后的15天时染色强度最强,并且强度持续到出生后28天,我们推测原因可能P15小鼠中浦肯野细胞树突开始被单一攀缘纤维支配。在ams纯合子小鼠中,P Cs显示出和野生型小鼠相同的阳性趋势。在两种基因型P7-28的小鼠中检测到一条约140kDa的Western印迹条带,与Nna1编码蛋白的氨基酸序列长度一致。结论:浦肯野细胞的退化和缺失可能是由于Nna1基因蛋白质短缺造成的,Nna1基因点突变可能导致了其蛋白质的三级结构的不稳定性。
【图文】：

小脑皮层分层

AMS小鼠基因型的鉴定原理图
【学位授予单位】：宁夏医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R741

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本文编号：2621848