沉默长链非编码RNA-HOTAIR对脑胶质瘤U251细胞生物学行为的影响及其相关机制的研究
发布时间：2020-04-13 12:39
【摘要】：目的:探讨沉默长链非编码RNA-HOTAIR对脑胶质瘤U251细胞恶性生物学行为的影响及其相关机制,进一步明确脑胶质瘤的发生、发展,为脑胶质瘤的治疗开辟新道路。方法:将U251人脑胶质瘤细胞分组成空白对照组(control),阴性对照组(sh-NC)及实验组(sh-HOTAIR),培养至对数生长期,依次应用MTT法检测细胞增殖情况;利用qRT-PCR检测HOTAIR mRNA表达水平;采用磷酯酰丝氨酸联络蛋白-异硫氢酸荧光素/碘化丙啶(AnnexinV-FITC/PI)双标记流式细胞术检测细胞凋亡情况;应用Transwell体外侵袭实验检测细胞的侵袭能力;利用蛋白免疫印迹法(WesternBlot)检测各组凋亡相关蛋白Bcl-2,侵袭相关蛋白MMP-2,促凋亡蛋白Bax,PI3K/Akt信号通路重要蛋白蛋白激酶B(Akt)、磷酸化蛋白激酶B(P-Akt)的表达水平。结果:MTT结果提示,人脑胶质瘤细胞U251转染shRNA-HOTAIR增值率低于对照组(P0.05),qRT-PCR检测细胞转染shRNA-HOTAIR后HOTAIR mRNA表达较对照组明显下调(P0.05),流式细胞术数据显示shRNA-HOTAIR可以降低细胞凋亡率(P0.05),WesternBlot结果提示shRNA-HOTAIR可以降低细胞P-Akt、Bcl-2、MMP-2,增加Bax的表达程度。结论:沉默LncRNA-HOTAIR可抑制细胞增殖,促进细胞凋亡,降低细胞侵袭,其分子机制可能与活化PI3K/AKT信号通路有关。
【图文】：
图１邋各组ＨＯＴＡ丨Ｒ邋ｍＲＮＡ的表达水平．逡逑
结果显示与ｃｏｎｔｒｏｌ组相比，ｓｈ－ＨＯＴＡＩＲ组细胞凋亡百分比显著X椉渝义希ǎ保叮罚担ィ觯螅常埃担保ィ澹校迹埃埃担村澹螅瑁龋希裕粒桑义宕俳澹眨玻担卞逑赴蛲觯钜煊型冲义霞蒲б庖澹ǎ校
本文编号：2626005
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