黄藤素抑制三叉神经痛大鼠三叉神经节CGRP表达的初步研究

发布时间：2020-04-25 09:39

【摘要】：研究背景和目的:三叉神经痛(Trigeminal Neuralgia,TN)又叫做“痛性痉挛”,是颌面部常见的慢性疼痛之一。有报道称三叉神经节(trigeminal ganglia,TGs)的降钙素基因相关肽(calcitonin gene-related peptide,CGRP)在TN的痛觉传递中有重要作用。本研究拟通过观察黄藤素(palmatine)对TN大鼠TGs中的CGRP和CGRP受体表达的影响和作用机制研究,为寻找预防和治疗TN的新方法提供基础实验依据。方法:将健康的成年雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠随机均分为4组:假手术对照组(Sham group)、假手术+黄藤素组(Sham+Palmatine group)、三叉神经痛模型组(TN group)、三叉神经痛+黄藤素组(TN+Palmatine group)。我们将通过结扎大鼠眶下神经造成慢性压迫性损伤的方法来建立大鼠TN模型,配制10mg/ml黄藤素溶液按照2mg/100g的剂量在术后分别给假手术+黄藤素组及三叉神经痛+黄藤素组大鼠腹腔注射2周;同时使用电子机械测痛仪自术后第1,3,5,7,9,11,13,15天记录各组大鼠机械痛敏阈值。15天后,采用实时荧光定量PCR方法和免疫组织化学染色来检测大鼠术侧TGs中CGRP及其受体的表达变化,此外采用ELISA用于检测各组大鼠血清中的炎性细胞因子TNF-α和1L-1β的变化情况。同时采用蛋白印迹法来检测磷酸化蛋白激酶C(phosphated protein kinase C,p-PKC)的表达变化。结果:在术后15天内,行为学测试的结果表明,与Sham组大鼠相比,TN组大鼠手术侧面部感觉区域的机械痛敏阈值明显降低了(P0.05)。而连续黄藤素给药的TN+Palmatine组大鼠在术后第7天到第15天,与TN组大鼠相比,阈值出现了显著升高(P0.05)。另外,术后15天的qPCR和免疫组织化学染色结果表明,TN组大鼠与Sham组大鼠作比较,其TGs中CGRP及其受体CRLR、RAMP1的表达明显升高(P0.05)。而TN+Palmatine组大鼠与TN组大鼠比较,其TGs中CGRP及其受体CRLR、RAMP1的表达显著降低(P0.05)。ELISA检测结果表明TN组大鼠血清中TNF-α和1L-1β水平和Sham组相比显著升高,黄藤素治疗可以显著降低TN组大鼠血清中TNF-α和1L-1β的水平(P0.05)。蛋白印迹检测结果表明,TN组与Sham组相比,其磷酸化蛋白激酶C显著升高(P0.05)。TN+Palmatine组与TN组相比,其磷酸化蛋白激酶C显著降低(P0.01)。而TN+Palmatine组、Sham+Palmatine组与Sham组相比,没有明显差异(P0.05)。结论:TGs中的CGRP与TN的痛觉传递密切相关,而黄藤素能够下调CGRP的表达对TN起到一定的镇痛效果,其机制可能与通过抑制PKC信号通路磷酸化,降低血清中的炎症因子TNF-α和1L-1β的浓度有关。
【图文】：

痛敏,阈值,大鼠

第 3 章结果第 3 章结果3.1 大鼠行为学实验结果术前各组大鼠之间的面部感觉区域的机械痛敏阈值都没有明显差异(P >0.05)。在手术后的 15 d 中，Sham 组与 Sham+Palmatine 组相比，其机械痛敏阈值也没有显著差别（P>0.05），而 TN 组大鼠的机械痛敏阈值下降最明显，且与 Sham 组比较有显著性差异(P<0.01)。另外，TN+Palmatine 组大鼠在术后第 1天时手术侧面部机械痛敏阈值降至最低值，而每天持续黄藤素给药后，从术后第 7 天开始到第 15 天与 TN 组对比其面部机械痛敏阈值显著增加 (P <0.05)( 图 1)。

大鼠,受体,表达水平

第 3 章结果果术后第 15 天，使用 qPCR 检测各组大鼠 TGs 中 CGRP 及其受体达情况。qPCR 结果表明，Sham 组和 Sham+Palmatine 组这两组P 及其受体CRLR、RAMP1的mRNA的表达水平没有明显差异 (P >与 Sham 组比较，CGRP 及其受体 CRLR、RAMP1 的 mRNA 的表升高 (P < 0.05)；TN+Palmatine 组与 TN 组的相比，CGRP 及其受体 P1 的 mRNA 的表达水平有明显的降低 (P < 0.05) ( 图 2、3、4)。采用 qPCR 检测 TGs 中 CGRP、CRLR、RAMP1 的 mR
【学位授予单位】：南昌大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R745.11

【参考文献】