鞘脂激活蛋白原（Prosaposin）在胶质瘤组织中的表达及其对胶质瘤细胞增殖、迁移及侵袭的影响

发布时间：2020-04-26 01:46

【摘要】：目的:恶性胶质瘤是最常见的中枢系统肿瘤。研究发现,在许多肿瘤中Prosaposin的表达异常,例如乳腺癌、前列腺癌。Prosaposin在恶性胶质瘤肿瘤形成和发展过程中的生物作用依然不清晰。研究方法:本研究经中国医科大学附属第一医院伦理委员会同意。研究采用100例来自于中国医科大学附属第一医院神经外科2012-2017年之间经手术切除并被组织病理学确诊为胶质瘤的患者标本,所有患者在接受手术前均未行化疗或者放疗。采用U251、U87胶质瘤细胞系进行研究。本研究采用Western blot、RT-PCR、免疫组化等实验方法探究Prosaposin在胶质瘤组织中的表达情况。采用MTS和克隆形成实验测定Prosaposin对U251、U87胶质瘤细胞增殖能力的影响。采用细胞划痕和Transwell方法测定Prosaposin对U251、U87胶质瘤细胞侵袭及迁移能力的影响。通过Western blot观察Prosaposin对于U251、U87胶质瘤细胞的作用机制。结果:1、Prosaposin的表达与胶质瘤级别具有相关性,在高级别胶质瘤中表达水平高于在低级别胶质瘤中的表达水平。2、MTS检测,在72h时,U251、U87细胞实验组的吸光度值开始降低,与对照组相比(P0.05)。在96h时,U251、U87细胞实验组的吸光度值明显降低,与对照组相比(P0.05),差异性具有统计学意义。在克隆形成实验中,U251细胞,实验组组克隆细胞数(155±25)明显少于对照组克隆细胞数(300±25),P0.05。U87细胞,实验组克隆细胞数(140±25)明显少于对照组克隆细胞数(280±25),P0.05。差异性具有统计学意义。3、细胞划痕法,U251细胞,实验组细胞划痕愈合率(23±5)明显少于对照组细胞划痕愈合率(56±6),P0.05。U87细胞,实验组细胞划痕愈合率(40±5)明显少于对照组细胞划痕愈合率(75±6),P0.01。差异性具有统计学意义。4、Transwell法检测,U251细胞,实验组侵袭细胞数(50±25)明显少于对照组克隆细胞数(160±35),P0.01。U87细胞,实验组克隆细胞数(60±40)明显少于对照组克隆细胞数(180±25),P0.01。差异性具有统计学意义。5、通过Western blot检测,在U251胶质瘤细胞中,与对照组相比,实验组的p-AKT和p-GSK3β的相对表达量降低,P0.05。在U87胶质瘤细胞中,与对照组相比,实验组的p-AKT和p-GSK3β的相对表达量降低,P0.05。差异性具有统计学意义。AKT和GSK3β的总蛋白量不改变。结论:我们的研究结果表明,Prosaposin蛋白在恶性胶质瘤的肿瘤形成发展、侵袭及迁移过程中起到重要作用。Prosaposin蛋白在胶质瘤中表达增高且与胶质瘤的级别以及恶性程度具有相关性。除此之外,我们还阐明了Prosaposin对胶质瘤细胞系的生物学行为的影响,敲除Prosaposin可抑制胶质瘤U251、U87细胞的增殖、迁移及侵袭能力,以及其潜在的作用机制,敲除Prosaposin可降低胶质瘤U251、U87细胞p-AKT,p-GSK3β的表达。Prosaposin可作为有意义的临床诊断分级生物标记物,同时为人脑胶质瘤的靶向治疗提供理论和实验依据。在未来的研究中,我们将进一步探究Prosaposin在胶质瘤形成过程中的分子机制以至于更好的了解Prosaposin基因在胶质瘤中功能。
【图文】：

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posin 蛋白在高级别胶质瘤中表达水平高于在低级别胶质rotein expression of Prosaposin was higher in high-grade gliolow-grade gliomas Prosaposin 蛋白在高级别胶质瘤中表达水平高于在低级别0.05。

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3.1.1 Prosaposin 蛋白在高级别胶质瘤中表达水平高于在低级别胶质瘤中的表达 3.1.1 The protein expression of Prosaposin was higher in high-grade gliomas comparlow-grade gliomasn blot 检测 Prosaposin 蛋白在高级别胶质瘤中表达水平高于在低级别胶质瘤中的中*表示 P<0.05。
【学位授予单位】：中国医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R739.41

【参考文献】