脉冲射频对SNI大鼠的镇痛作用及其机制研究

发布时间：2020-05-01 20:02

【摘要】：[目的]观察脉冲射频(Pulsed Radiofrequency,PRF)作用于坐骨神经分支选择损伤模型(SparedNerve Injury Model,SNI)大鼠坐骨神经分支结扎处引起的疼痛行为改变,检测背根神经节NF-κB、TNF-α、IL-6表达的变化,进而探讨脉冲射频治疗神经病理性疼痛的神经炎性反应相关机制。[方法]1实验对象选取200～250g纯种雄性SD大鼠18只,随机分为3组:假手术组(Sham组)、坐骨神经分支损伤组(SNI组)、坐骨神经分支损伤+脉冲射频组(SNI+PRF组),每组6只。2造模与取材建立坐骨神经分支选择损伤模型(SNI):将一侧坐骨神经干的胫神经和腓总神经分支切断并结扎,保留腓肠神经分支。Sham组仅暴露但不损伤坐骨神经及其分支。SNI+PRF组于造模第7天对大鼠胫神经+腓总神经结扎近端行脉冲射频治疗,脉冲射频设定脉冲频率2Hz,脉宽20ms,温度42℃,治疗持续时间2min。Sham组和SNI组不予治疗,三组均于术后8天疼痛行为学测试结束后进行背根神经节(Dorsal Root Ganglion,DRG)取材。3检测指标术前2小时及术后1、4、7、8天检测并记录各组大鼠疼痛行为变化,包括对 50%机械刺激缩足反射阈值(Paw Mechanical Withdrawal Threshold,PMWT)和冷板累积抬足时间进行测定,以反映大鼠机械性痛觉过敏和冷触诱发痛变化;术后8天行为学检测结束后每组随机抽取4只对大鼠L4、L5背根神经节进行取材,行Western Blotting法检测背根神经节NF-1κB、TNF-α和IL-6的表达。[结果]1.50%机械刺激缩足反射阈值(PMWT):术前各组大鼠左后足PMWT比较,差异无统计学意义(P0.05)。术后1、4、7天,与Sham组相比,SNI组、SNI+PRF组PMWT均逐渐降低,具有统计学意义(P0.05);SNI组与SNI+PRF组PMWT相比无统计学意义(P0.05)。术后8天(PRF治疗后24小时),SNI+PRF组PMWT较SNI组明显上升(P0.05);SNI组PMWT较Sham组进一步下降(P0.05)。2.冷板累积抬足时间:术前各组大鼠左后足累积抬足时间比较,差异无统计学意义(P0.05)。术后1、4、7天,与Sham组对比,SNI组、SNI+PRF组累积抬足时间显著延长(P0.05),且呈逐渐上升趋势;SNI组与SNI+PRF组累积抬足时间相比差异无统计学意义(P0.05)。术后8天(PRF治疗后24小时),SNI+PRF组大鼠累积抬足时间较SNI组缩短,具有统计学意义(P0.05);SNI组累积抬足时间相较Sham组,仍维持在较高水平,差异有统计学意义(P0.05)。3.Western Blotting法检测结果:术后8天,SNI组大鼠背根神经节中NF-1κB、TNF-α、IL-6的表达水平明显高于各组(P0.05)。与Sham组比较,SNI+PRF组TNF-α、IL-6的表达增加(P0.05),而NF-1κB的表达无统计学差异(P0.05)。与SNI 组比较,SNI+PRF 组 NF-κB、TNF-α、IL-6 的表达均减少(P0.05)。[结论]SNI大鼠神经病理性疼痛行为改变可能与背角神经节NF-1κB的激活及致炎因子TNF-α、IL-6的释放相关,脉冲射频24小时即可明显缓解大鼠疼痛,其机制与神经炎性反应调节NF-1κB、TNF-α、IL-6的表达有关。
【图文】：

图２－１实验总体流程图逡逑Ｆｉｇ．邋２－１邋Ｏｖｅｒａｌ邋Ｆｌｏｗ邋Ｃｈａｒｔ逡逑

暴露坐骨神经及其３个分支：胫神经、腓总神经和腓肠神经。用玻璃分针小心逡逑分离胫神经＋腓总神经以及腓肠神经，随后用４号丝线将胫神经＋腓总神经结扎，逡逑用眼科剪在结扎线的远端将神经剪断（见图２－１），并剪去约４＿远端神经断端，逡逑此过程注意勿损伤腓肠神经，以保留腓肠神经完整性。依次缝合肌肉层和皮肤逡逑层，并消毒手术切口。逡逑ｊ邋Ｌ４邋；邋々逡逑ｆｒｖ－逡逑！／逦＇Ｌ５，．，；少逡逑；）逦／广逡逑Ｉ邋Ｈ邋，土色＇：背根神经节逡逑ｌ＼邋Ｕ邋／／逡逑＼邋＼邋ＩＩ邋／邋／逡逑＼邋＼邋Ｈ邋，／１邋Ｉ逡逑！邋／邋＼＞逡逑（邋＼逡逑＼邋％逡逑＼逡逑＞逦Ｘ．逡逑＼邋卜、、、、、、逡逑腓脸神经逡逑腓总神＾邋■￣￣￣神经逡逑图２－２坐骨神经损伤模型图逡逑Ｆｉｇ．邋２－２邋Ｓｐａｒｅｄ邋Ｎｅｒｖｅ邋Ｉｎｊｕｒｙ邋Ｍｏｄｅｌ逡逑３不同实验动物组的处理逡逑假手术组仅暴露但不损伤坐骨神经及其分支，随即缝合手术切口，且无后逡逑续千预。ＳＮＩ组造模成功后也无后续干预。ＳＮＩ＋ＰＲＰ组于造模第７天疼痛行为逡逑学测试结束后对大鼠胫神经＋腓总神经结扎近端行脉冲射频治疗，脉冲射频参数逡逑２３逡逑
【学位授予单位】：南方医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R741

【参考文献】

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本文编号：2647008