周细胞在癫痫持续状态后SD大鼠血脑屏障通透性中的研究

发布时间：2020-06-05 23:01

【摘要】：目的:观察周细胞在癫痫持续状态后血脑屏障开放中的异常变化,探讨周细胞对癫痫持续状态后急性期血脑屏障开放和慢性期血脑屏障修复中的作用,为癫痫持续状态的临床治疗和科学研究提供新的思路和方法。研究方法:制备氯化锂-匹鲁卡品致痫大鼠模型,采用伊文思蓝法和干湿重法评估癫痫持续状态后2h、24h、3d、7d、14d和21d海马组织中血脑屏障破坏程度;电镜观察发作后不同时期周细胞及血脑屏障的超微结构改变,Western Blot法检测发作后不同时期海马组织中周细胞标记蛋白pdgfrβ的表达量,免疫组织化学以及免疫荧光法半定量分析Pdgfrβ在海马中的分布和表达情况,观察周细胞在癫痫持续状态发作急慢性期的破坏和恢复中的作用。结果:(1)癫痫持续状态后血脑屏障破坏,渗透性增强,其中发作后24h破坏最严重,发作3d及以后逐渐恢复正常;(2)透射电镜结果表明SE发作后脑微血管周细胞及其连接基膜超微结构均发生改变;(3)Western blot和免疫荧光的结果提示SE发作后24hPdgfrβ的表达水平明显高于对照组(P0.05),3d及以后逐渐趋于平稳;(4)免疫荧光检测结果提示Pdgfrβ沿着微血管壁分布,SE发作后24hPdgfrβ表达和分布水平明显高于对照组(P0.05),3d及以后逐渐趋于平稳。结论:癫痫持续状态后24h血脑屏障破坏最严重,3d及以后又逐渐恢复正常,周细胞在其急性期的破坏机制和亚急性期恢复机制中起到了重要的作用,可为临床治疗SE早期脑破坏提供重要作用。
【图文】：

匹鲁卡品前 30 分钟腹腔注射东莨菪碱(应。重程度采用修正 Racine 六级评价标准进;、面肌痉挛如眨眼、动须及节律性咀嚼挛表现为点头和 /或甩尾;挛;挛伴站立;失去平衡，跌倒。搐状态并且抽搐至少 30 分钟定义为癫痫痫持续状态的动物模型。抽搐发作持续若无发作或发作未达到Ⅳ级，则每隔 30再观察 30min，最多可追加 3 次，若追加造模失败。正常对照组等量生理盐水腹

中国医科大学硕士学位论文醛经腹腔麻醉，待麻醉后将大鼠固定在脑鼠颅骨顶部局部消毒后剪开 3-4cm 皮肤，膜钝性分离，仔细清除多余的皮下组织和固定到前囟位置，记录此时定位仪上各轴 0.5 mm 的小手钻，分别在大鼠前囟门两个记录电极孔，插入自制银针 3-5cm，锈钢电极夹夹住银针，参考电极夹住大鼠前，先进性 10 分钟脑电图记录，腹腔注间脑电图 30 分钟。脑电监测后的大鼠经，所有操作均在冰上快速完成，，分离大鼠待统一进行 Western Blot 检测。
【学位授予单位】：中国医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R742.1

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