尼古丁参与感觉刺激诱发小鼠小脑分子层场电位反应的作用机制

发布时间：2020-07-05 04:15

【摘要】：目的:本研究拟使用药理学及电生理手段研究尼古丁参与感觉刺激诱发小鼠小脑分子层场电位反应的作用,探讨尼古丁对小鼠小脑皮层分子层感觉信息传递过程中的影响机制,揭示nACh受体参与小脑皮层分子层感觉信息传递与整合机理。方法:选用出生后40天到60天内的昆明小鼠,称重并给与1.3g/kg剂量的乌拉坦注入小鼠腹腔实施麻醉。将小鼠放置在固定的处置仪上,经过完善的预先处理后,实施小脑Crus Ⅱ区钻孔术,孔径大约1-1.5mm,并去除表面颅骨。在显微镜下摘除硬脑膜,并用蠕动泵连续灌流含氧的人工脑脊液(ACSF)。尼古丁,六甲基氯化铵(Hexa),甲基牛扁碱(MLA),二氢-β-红霉素氢溴酸盐(DβEH)等药物,通过脑表面灌流方式,施用于小脑表面。利用吹风装置向同侧胡须垫吹风(50-60 ms,50-60 psi),即三叉神经感觉刺激,用计算机记录电生理结果,经数据软件收集数据。通过其将感觉刺激诱发分子层场电位变化予以整合;应用Clampfit 10.6软件进行数据分析。结果:(1)在麻醉状态下,给予吹风刺激,可发现小脑区分子层出现场电位反应,现象为迅速的负极性波之后随之出现的是较大的正极性波;在脑表面持续灌流Nicotine(1mM)后,小脑皮质分子层P1即抑制性成分的曲线下面积(AUC)明显减少,伴P1振幅大幅度下降。(2)尼古丁对感觉刺激诱发的分子层场电位的潜伏期没有明显影响,但P1的产生时间较给药前提前,波形上升的时间延长、延迟时间明显缩短。此外,尼古丁可导致N1波振幅及N1下曲面的面积显著降低,但给予尼古丁前后N1负极性波的开始时间没有差别,P1开始时间大幅提前。(3)在非选择性nACh受体阻断剂Hexa存在条件下,给予尼古丁没有观察到P1振幅的降低以及AUC的减少,也没有观察到N1振幅及AUC的改变,提示非选择性nACh受体阻断剂Hexa完全阻断了尼古丁对分子层场电位的影响。(4)在选择性α4β2亚型nACh受体阻断剂DβEH存在下,给予尼古丁依然可以导致小脑皮质分子层场电位反应P1振幅较大幅度下降,并伴有AUC的显著减少,表明选择性α4β2亚型nACh受体阻滞剂DβEH并未阻断尼古丁对于小脑皮质分子层场电位反应的影响。(5)在选择性α7亚型nACh受体阻断剂MLA存在下,在脑表面灌流尼古丁后,P1的振幅及AUC均没有出现显著变化,较给药前无明显差异,表明选择性α7亚型nACh受体阻断剂MLA完全阻断了尼古丁对感觉刺激诱发小鼠小脑皮质分子层场电位反应的抑制作用。结论:(1)尼古丁抑制感觉刺激诱发的小鼠小脑皮层分子层场电位中的GABA能成分,并影响波形动力学,导致抑制时间提前,但振幅与波形下面积减少。(2)尼古丁对感觉刺激诱发小鼠小脑皮层分子层场电位反应的抑制的作用是通过活化α7亚型nACh受体,而不是α4β2亚型nACh受体来实现的。(3)研究结果提示烟碱样受体在小脑皮层信息传递中起重要的调控作用并可能参与小脑的运动学习功能。
【学位授予单位】：延边大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R741

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本文编号：2742069